转移相关基因CD44和胃癌关系的研究

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1、南京医科大学博士学位论文转移相关基因CD44和胃癌关系的研究姓名：王道荣申请学位级别：博士专业：外科学（普外科）指导教师：刘训良;陈国玉2003.4.1CD44CD44v6RT．PCRFQ—RT—PCRSCD44LaurenI。l。aurenDFGC英文缩略语(Clusterofdifferentiation)(CD44variants6、(ReversetranscriptionPolymerase—chain—reaction)(FluorescentQuantitativeRT—PCR)(Solublevari

2、ants6)(Intestinaltype肠型)(Diffusetype弥漫型)(EarlyGastricCarcinoma)南京医科人学阱卜学位论文转移相关基因CD44与胃癌关系的研究王道荣陈国玉刘训良中文摘要CD44(clusterofdifferentiation)是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白，在淋巴细胞、成纤维细胞和上皮细胞表面均能检测到它的表达，最早由Dalchau等f11于1980年用单克隆抗体技术检测到并确定，曾被许多学者称为PgP一1、ECM一和透明质酸受体等。我们应用半定量逆转录一聚合酶链反应

3、(RT—PCR)技术检测胃癌患者骨髓血和外周血中CD44v6mRNA的表达；应用定量酶链免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学(S-P)法检测胃癌患者外周血清中可溶性CD44v6(sCD44v6)的浓度和胃癌组织中CD44v6蛋白的表达；应用荧光定量RT—PCR(F0一RT．PCR)法检测胃癌患者手术前后外周血中CD44v6mRNA的实时定量表达，探讨并分析CD44v6基因在胃癌发生、发展过程中的作用。目的检测胃癌患者外周血(骨髓血)中／胃癌组织中CD44v6mRNA／CD44v6蛋白的表达，观察分析它与胃癌临床病

4、理之间的相关意义，分析CD44v6基因与胃癌发生、发展的关系，探讨以CD44v6基因来判断胃癌侵袭转移能力的可能性和方法。方法应用半定量RT—PCR、荧光定量RT．PCR法、定量ELISA法、及免疫组化S-P法检测胃癌患者外周血及部分胃癌患者手术后外周血中CD44v6mRNA、sCD44v6和胃癌组织中CD44v6蛋白的表达。结果1．38例有淋巴结转移的胃癌患者外周血中35例CD44v6mRNA表达阳性，表达率92．10％，而无转移的8例患者外周血中仅4例CD44v6mRNA表达阳性，表达率50％，两者比较有显著性差

5、异；34例较晚期(11I—IV)I莉京医科人学博1

6、≥位论文胃癌患者外周血中32例有CD44v6mRNA表达阳性，表达率为94．12，而较早期(I—II)12例中仅7例有表达，表达率58．33％，两者比较有显著性差异；32例弥漫型胃癌患者外周血中30例CD44v6mRNA表达阳性，表达率93，75％，而肠型胃癌中14例有9例CD44v6mRNA表达阳性，表达率64．28％，两者比较有显著差异；至于肿瘤大小方面，表达率比较无显著差异。2．20例胃癌患者术前外周血都检出有CD44v6mRNA基因表达，表达强度在4．9×1

7、02～3．2x105拷贝／ugRNA之间，20例患者CD44v6RNA平均表达量为3．9×104拷贝／ugRNA，20例患者根治性手术后外周血中CD44v6mRNA的表达强度为5．5×10‘～7．6x103拷贝／ugRNA，平均2．4×102拷贝／ugRNA，根治性手术切除术后外周血中CD44v6mRNA表达强度明显下降，两者比较P<0．01，有显著性差异。3．胃癌患者外周血血清中可溶性CD44v6(sCD44Vv6)含量明显高于正常对照组；胃癌组血清中sCD44v6含量明显高于胃渍疡组；根治性胃癌患者术后外周血血清

8、中sCD44v6含量明显下降，术后和术前比较有显著性差异，而不能行根治性手术的患者外周血血清中sCD44v6含量与术前相比无显著性差异。sCD44v6浓度表达和肿瘤病灶大小无相关性，两种病理分型中表达有显著性差异；在有无淋巴结转移组中表达有显著差异；在肿瘤病程进展方面，表达有显著性差异。4．胃癌组织中CD44v6蛋白表达率为78，57％。52例较晚期(Ill—IV)胃癌组织中有50例表达CD44v6蛋白，表达率为96．1％，而18例较早期(I-1I期)胃癌组织中仅5例有表达，表达率为27．78％，两者比较有明显性差异

9、；65侧有淋巴结转组中有5l例表达CD44v6蛋白，表达率78．46％，而5例未转移组中仅2例有表达，表达率为40％，两者比较有显著性差异；29例肠型胃癌组织中16例有CD44v6蛋白表达，表达率55．17％，而41例弥漫型胃癌组织中39例有表达，表达率达95．12％，两者比较有显著性差异；在49例>Scm胃癌组织中有40例表达CD44v6蛋白