人类乳突瘤病毒基因分型检验

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1、財團法人長庚紀念醫院林口醫學中心臨床病理科人類乳突瘤病毒基因分型檢驗HumanPapillomavirusGenotyping介紹人類乳突瘤病毒(HPV),屬Papovaviridae，是nonenvelopeddsDNAvirus，genome約8000bp；有8openreadingframe（E1,2,4,5,6,7,L1,L2）。約有150種血清型，其中有30多種主要通過性行為傳播。絕大多數情況下人體可以自動清除病毒﹐感染者不會有任何不適症狀。在少數情況下﹐持續多次的HPV病毒感染會引發女性子宮頸發生病變﹐並可能導致子宮頸癌。子宮頸癌是

2、台灣婦女排名第一的常見癌症，目前已有足夠證據顯示HPV感染是導致子宮頸上皮細胞內層腫瘤以及侵犯性子宮頸癌最重要的原因。常林口長庚紀念醫院臨床病理科規抹片檢查（Paptest）之敏感度較低；在CINII/III階段，Paptest與人類乳突瘤病毒去氧核醣核酸（HPVDNA）檢測之陽性率分別為55.4﹪及99.4﹪。我們的網址藉由抹片檢查結合HPVDNA檢測可以提高子宮頸癌患者篩檢之靈敏度。比http://www.cgmh.org.tw/intr較本項檢驗法與美國DigeneHCII檢驗法之檢驗效能可知，兩者之結果一致/intr2/c3920/in

3、dex.htm性為（80.8﹪）；針對細胞病理學診斷異常（ASCUS）者進一步分析，本檢驗法之陽性率(45.7﹪)則比DigeneHCII檢驗法之陽性率(36.2﹪)為高。地址：桃園縣龜山鄉復興街5號依HPV在子宮頸癌患者出現之頻率可將其區分為高致癌型（型別16,18,電話：(03)328120031,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,82）,疑似致癌型（型別26,53,66）,或低分機2553、2537致癌型（型別6,11,42,43,44,54,61,70,72,CP8061,32,37,55,62,67,69,7

4、4,P8304,LIAE5,MM4,MM7,MM8）；本項目可針對上述39型HPV進行基因分型檢測。基因分型檢驗法不但可提供一迅速、靈敏、可靠之HPV診斷與分型報告，且可進行多重HPV感染的檢測。其結果可作為細胞學診斷結果分類依據（triagetool），並可作為HPV疫苗(HPV6,11,16,18)施打之評估指標之ㄧ。關於本篇檢驗分析方法聯絡人：黃瓊瑰電話：(03)3281200本項檢驗採用金車『EASYChip』人類乳突瘤病毒基因定型點墨（HPV分機8354blot），產品設計是針對常見於人類生殖道之39種HPV基因型的L1基因片Emai

5、l：段進行偵測。採得的子宮頸抹片檢體必需經過DNA萃取取得HPVDNA，joyce@adm.cgmh.org.twHPVDNA以biotin標示的MY11/GP6+混合引子進行聚合酶鏈鎖反應(PCR)，再與點有39種HPV基因型特定DNA探針之HPVBlot進行DNA雜交反應（DNAHybridization），最後經由呈色反應來判讀檢體中所含之HPV記錄編號：CGMHCP017基因型。July2008結果判讀及意義經由HPVBlot上點墨呈現之形式可判斷是否感染前述之39種HPV基因型。在病人罹癌後，可能因HPV嵌入人體細胞基因中，導致病毒L

6、1等基因刪除，只留下E6/E7基因，因此在特定期間病毒量會降低且不容易檢測。研究顯示，squamouscellcarcinoma患者之HPV檢測陽性率約76.4﹪~87.3﹪。檢驗相關事項、採檢須知檢驗代號L72-985檢驗組別病毒組檢驗項目HPVGenotyping檢體種類子宮頸抹片人類乳突瘤病毒基因分型檢測CervicalSwab檢驗方法PCR+雜交反應送檢時間每日8:30-17:00採檢方式採用CervicalBrush採檢套組；操作時間W1,W3採檢後將刷子置入檢體運送保存管，依折點折斷刷子，旋緊蓋子，置於夾鏈袋中，立即送檢(維持攝氏4

7、度)。參考值Negative核發報告時間操作第二天W2,W4健保給付自費費用2000元臨床意義本檢驗採用金車公司『EASYChip』HPVBlot試劑，可區分39種人類乳突瘤病毒基因型。其中HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,66,68,及70等15型已通過衛生署認證；檢驗方法本身之Detectionlimit為100copies,sensitivity為97%,specificity為96%。另HPV6,11,26,32,37,42,43,44,54,55,59,61,62,67,69,72,74,8

8、2,CP8061,CP8304,LIAE5,MM4,MM7,MM8等24型，因為臨床試驗所取得陽性檢體個數不足及考慮效能，故此24項分型結果僅供研究參