黑麦草胜黑穗病菌的检测与鉴定

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1、第30卷增刊山东农业大学学报1999年5月V01．30journalofShandongAgriculturalUniversityMay1999=======c=======#=；；==一==========，；；}E；=；==================；=；；；；=_目々d≈≈j_￥_￥I￥≮_====j±。一I一“黑麦草腥黑穗病菌”的检测与鉴定张传飞陈国弥刘军民高文通李怡珍廖建华肖百进王东卫钟国强陈加平(广州动植物硷疫局．广州51001o)【摘要】“黑麦草腥黑穗病菌”(简称“草腥”)与印度腥黑穗病菌很难区分

2、．研究表明．a．二者在孢!r的形态、太小和颜色等形态特征方面相同或相近抽．二者在冬孢子萌发，次生担孢子繁殖和菌落生长等生理特征方面相似。但“草腥”对4、麦无致病力不同于印腥。关键词：黑麦草腥黑穗病菌；印腥；鉴定DETECTIONANDIDENTIFICATIONON“THERYEGRASSBUNT”ZhangChuanfei，ChenGuomi，LiuJunmin，GaoWcntong，LiYizhenLiaoJianhua，XiaoBaijin，WangDongwei，ZhongGuoqiang，ChertJiapi

3、ng(Guangzh*mAnimal＆fPlantQuarantineBureau·Guangzhou510010)AbstractIt’sanduneasyjobforUStotellthedifferencebetween。theryegrassbunt”andKarnalbunt(7’illeLiaindica)．Thisworkshowedthatbothorthepathogensaree—aualorsimilartoeachotherinthefollowingaspects：a．morphologiec

4、haracteristicssuchaslheform，sizeandcoloroftheirspores；b．physiologicfeaturessuchastelioporegermi·narion，secondarybasidiosporcmultiplicationandcolonygrowth．Nevertheless，“therye—grasshunt”isnotpathogenictowheat，therefore．itshouldbeconsideredtobedifferentfromKarnalb

5、unt．Keywordstheryegrassbunt；karnalbunt；identification1材料和方法1．1材料供试小麦品种：福繁～17、龙溪一18和铁春1号。其中，铁春1号为已知的印腥感病品种，由t海动植物检疫局提供；福繁一17和龙溪一18由汕头动植物检疫局提供，为南方推广品种，可感染腥黑粉菌属的矮腥、网腥。{，，．1囊j{●●●●，，●●11●j{{增刊张传飞等：“黑麦草腥黑穗病菌”的检测与鉴定·67·供试菌种：来源于我局截获的4个黑麦草品种即“T97—17071”、“T97一BAR一7”、“L67

6、—6—60”和“L151—6～FL3”。先找菌瘿，在未找出菌瘿的情况下，采用单孢分离法获取单孢系。接种试验所采用的10个单孢系，有5个单孢系来自品种“L151—6一FL3”．编号为“H1”、“H2”、“H3”、“H4”、“H599有3个来自“T97一BAR一7”，编号为“FS3”、“FS4”、“FS5”，：与2个来自混合品种的筛下物，编号为“FSl”和“FS2”。1．2方法1．2．1抱子含量和大小测定抽样方法参照国家局颁布的TCK抽样法．抽样后不同品种各取309，按常规洗涤法检验．沉降物用席尔氏缓冲液浸泡24h后，摇匀

7、镜检．孢子测量在测微尺下完成。1．2．2单袍系分离、扩大繁殖和保存单个冬孢子的分离培养在选择性培养基上完成，方法参见Kaureta1(1994)的文章。单孢系的扩大繁殖，采用wA或PDA培养．也可用马铃薯汁液恒温摇床振荡培养，18～22C下培养2～3周即可。欲长期保存的菌种，可转到lO～15‘C低温下培养。1．2．3小麦接种试验①供试小麦的栽培管理(略)②供试菌种的准备将4个以上的单孢系制成孢子悬浮液(含菌丝片断)，混匀后经40pm孔径的筛过滤，收集筛下物，然后制片镜检，将孢子悬浮液的浓度调至于1000～100000个

8、次生担孢子／ml后备用。③接种方法小麦生长进入孕穗蝴(刚露芒)后接种，方法以孢子悬浮液注射法为主，以喷雾法为辅，即在每株小麦上注射lml的孢子悬浮液，完毕后再用手持喷雾器喷雾接种麦穗，在20422‘C、相对湿度90％以上的条件下保湿培养72h，移至20～24℃的条件下培养3周，再转入简易室内培养。对照组麦穗注射、喷雾无菌水，其它同