广西两地异盘并殖吸虫分子系统发生研究

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4、)aminomethane三羟甲基氨基甲烷5广西医科大学研究生学位论文独创性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切责任。论文作者签名：指导教师签名：日期：≯Do&．‘

5、．f5广西医科大学保护知识产杖说明本人完全了解广西医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期间，博士后工作人员、人才小高地工作人员在校工作期间，论文工作的知识产权单位属广西医科大学。本人保证在校期间和离校后，发表或使用论文工作成果时署名第一作者单位均为广西医科大学。学校有权保留论文，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。论文作者签名：陈激少指导教师签名：—_。．彬日期：2DD矿．Z．△颁上研究m。≯化论文广西两地异箍并靖吸虫分r

6、系统发乍研究广西两地异盘并殖吸虫分子系统发生研究摘要目的：通过研究广西两地(灵川、那坡)异盘并殖吸虫分离株的核糖体DNA第二内部转录间隔区基因(ITS2)和细胞色素c氧化酶亚单位I基因(C01)序列，比较分析两地虫体的基因差异，揭示它们之间的亲缘关系和分类学地位。方法：采集灵川和那坡两地的异盘并殖吸虫囊蚴接种适宜终宿主大鼠，获得成虫后提取基因组DNA，PCR扩增其ITS2和C01基因序列并测序。从Genebank检索到与它们同源性相近的并殖吸虫基因序列，应用Megalign软件对基因序列进行比较和同源

7、性分析，然后用Mega及Phylip软件以最小进化法(ME)、邻接法(N．J)、最大似然法(ML)、最大简约法(MP)构建系统发生树，其中ME和N—J法用Kimura双参数法计算遗传距离，自举检验副本数为1ooO，胤和MP法自举检验副本数为500。结果：那坡异盘并殖吸虫分离株与灵川异盘并殖吸虫分离株的ITS2基因序列相似度为lOO％，COl基因序列相似度为97．5％，同源性较高；而那坡与泰国一个分离株的ITS2和C01基因序列相似度高达100％，具有高度同源性。从ITS2序列系统发生树来看，来自那坡、

8、灵川、越南、泰国和印度的分离株均处于异盘并殖吸虫的种群下，但印度分离株是个相对独立的分枝，亲缘关系较远。从C0l序列系统发生树来看，不同的发生树中那坡分离株均与泰国、越南分离株的亲缘关系较近，以较高的自举检验置信值形成单系群，而灵川分离株的分枝均处在这个群之外，印度分离株的亲缘关系则更远一些。硕J：研究牛‘≯ft论文广西两地异撒并殖吸虫分，厂系统发乍研究THEMoLECULARPHYLoGENYSTUDYoNPARAGoNIMUSHETERoTREMUS