木霉厚垣孢子的产生、萌发和保存条件研究

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1、Y959083四川农业大学硕士学位论文木霉厚垣孢子的产生、萌发和保存条件研究邹勇指导教师————卫』业毽__垩n生——一学科专业—————擅盐量里当L——一研究方向——垄擅疆乜垃酣塑墓苴世瘟蛊一2006年6月摘要对实验室保存的六个木霉菌株进行了分类鉴定，1"-33和T．13是黄绿木霉(Trichodermaaureoviride)，T-6和T-22是哈茨木霉(7=harzianum)，T034是长枝木霉(7=longibrachiatum)，T-l是康氏木霉(z=koningii)。对这6个菌株在同一培养条件(100ml三角瓶装入50mlPD培养液，每瓶接种2个活化2d的5

2、mm直径的菌片，pH自然，30℃，120r／min)下不同培养时间厚垣孢子的产量进行了比较，发现T-33菌株产孢速度快、产孢量最高(2x106个／m1)。用该菌株作为目标菌株，系统研究了产生厚垣孢子的发酵、萌发和贮存条件，及其对辣椒种子萌发的促进作用和对辣椒猝倒病的防病作用。木霉"I"-33菌株产生厚垣孢子的发酵条件研究表明，．；l乏用燕麦粉培养液、30℃、120r／min振荡培养、250ml三角瓶装入80ml培养液、接种5片活化2d的5mm直径的菌片，碳氮源选择蔗糖和硫酸铵，C／N为20／1，是适合T一3：；菌株产孢的最佳单因素条件(碳氮源实验基于Czapek培养基)；用

3、这些最佳单因素组合(不包括碳氮源和C／N结果)培养木霉T-33绘制了产孢曲线，发现在培养第10d得到最大的厚垣孢子产量3．05x107个／ml。选取对产孢量影响较大的温度、pH和振荡速度等因素进行正交实验，得到的最佳产孢条件为30"12、pH4和140r／min，在这样的条件下产孢量达到3．37x107个／ml。采用琼胶玻片萌发法测定了不同时『日J、光照、孢子成熟度、温度、pH、相对湿度和液体基质对厚垣孢子萌发的影响。结果表明，厚垣孢子在琼胶破片上萌发很快，12h就已经全部萌发；不同光照、孢子成熟度和液体基质对厚垣孢子萌发有一定影响，8h后的各个处理的萌发率均在80％以上；

4、不同温度、pH和湿度处理对孢子的萌发影响很大，其中30"C、p114和RHl00％最适合孢子萌发，其萌发率分别达到99．4％、98．63％和68．89％。厚垣孢子的保存实验表明，在每克孢予粉以及绝子粉与滑石粉的混合物中木霉厚垣孢子的数量随保存时间的延长而不断降低，孢子萌发率也有一定程度降低。4"12保存8个月后纯厚垣孢子粉中孢子含量为2-I×108个，g，仍有68．01％的萌发率；而常温(25'12)保存加了滑石粉的厚垣孢子含量降低到3x107个／g，萌发率仅有38．04％。总的来说，木霉的厚垣孢子表现出了很长的贮存期。木霉"1"-33菌株产生厚垣孢子的发酵滤液对辣椒种子发

5、芽有很大的影响。低浓度的发酵滤液(1％～20％)促进了种子发芽，高浓度的(50％～100％)则抑制了发芽。盆栽防治试验表明，木霉麸皮培养物和厚垣孢子均能促进辣椒种子出苗，并能很好的控制猝倒病的发生。代森锰锌则抑SlIT辣椒出茁，对猝倒病的控制作用也较差，原因值得进一步研究。关键词：木霉；厚垣孢子；液体发酵；辣椒：瓜果腐霉；生物防治AbstractSixstrainsofTrichodermainthelaboratorywereidentified．Theresultshowedthat．1"-33andT-I3，T-6andT-22，T-34，T-1wereTrichod

6、ermaaureoviride，Zharzianum，7=hmgibrachiatumandT．koningiirespectively．Chlamydosporeproductionsindifferentculturetimewerecomparedunderthesamecondition．ChlamydosporesporulationofT-33wasfast．TheyieldofchlamydosporeWashi【ghest．Thefermentation。germination，storagetimeandeffectsonseedgerminationan

7、ddamping—offofcapsicumwerestudiedwiththeT-33．Theresearchontheconditionsofchlamydosporeproductionfortheliquidfermentationshowedthat，thebettersinglefactorswereoatliquidmedia，30℃，120r／minsurgeculture，sucroseascarbonsource，(NH4)2S04asnitrogensourceandtheratioof20t