哈茨木霉液体发酵产厚垣孢子条件的优化

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1、万方数据山西农业科学2014，42(2)：169—173JournalofShanxiAgriculturalSciencesdoi：10．39690．issn．1002—2481．2014．02．18哈茨木霉液体发酵产厚垣孢子条件的优化粟静，罗志威，吕黎，王蕾，丰来(湖南泰谷生物科技股份有限公司，农业部植物营养与生物肥料重点实验室，湖南长沙410205)摘要：在单因素试验结果的基础上，进一步应用Box—Behnken中心组合试验和响应面分析法优化发酵条件。结果表明，最佳发酵条件为：玉米粉1．01％，酵母膏0．47％，(NH。)2s0。0．05％，K：HP040．06％，MgSO。0

2、．05％，pH值5．79，28℃培养。研究结果为哈茨木霉厚垣孢子的大规模发酵生产提供了一定的技术支持。关键词：哈茨木霉；厚垣孢子；响应面法；液体发酵中图分类号：$482．2+92；TQ920．1文献标识码：A文章编号：1002—2481(2014)02--0169—05OptimizationoftheLiquidFermentationConditionsofTrichodermaharzianumChlamydosporesSUJing，LUOZhi-wei，IJYULi，WANGLei，FENGLai(KeyLaboratoryofPlantNutrition&Biologic

3、alFertilizer，MinistryofAgriculture，P．R．China，HunanTaiguBio-TechCo．Ltd，Changsha410205，China)Abstract：Basedonsingle-factorexperiments，weappliedBox-Behnkencentralcompositeexperimentsandresponsesurfaceanalysistooptimizetheliquidfermentationconditions．Theresultsshowedthattheoptimumfermentationcondit

4、ionswerethefoHowing：cornflour1．01％，yeastextract0．47％，(NH4)2S040．05％，K2HP040．06％，MgS040．05％，pH5．79and28oC．ThestudyprovidedatechnicalsupporforlargescalefermentationofTrichodermaharzianumchlamydospores．Keywords：Trichodermaharzianum；chlamydospores；responsesurfacemethod；theliquidfermentation木霉菌(Tric

5、hodermaspp．)属于真菌门半知菌亚门丝孢纲丛梗孢目黏孢菌类，是一类广泛分布于自然界、对多种病原真菌和病原细菌具有拮抗作用的生物防治因子㈣。从1932年Weindling首次发现木霉菌的拮抗特性至今，国内外对木霉菌的生防潜力日益重视咖。在已知的木霉属的9个种中，哈茨木霉的应用最多[51。目前，国内外开发出的商品化哈茨木霉制剂多为分生孢子制剂，厚垣孢子制剂的开发研究不多[61。虽然分生孢子的产孢量大，但其保质期短、田间防效稳定性差，作为生物农药尚不能完全发挥作用，而与分生孢子相比，厚垣孢子具有耐干燥、耐低温、存活时间长等优点，可使孢子易于加工和贮存，有利于在土壤中存活，但木霉菌产

6、厚垣孢子的发酵条件相对严格，难以控制㈣。本研究对一种哈茨木霉液体发酵产厚垣孢子的条件进行优化，旨在为该木霉菌株厚垣孢子制剂的生防应用提供理论基础。1材料和方法1．1材料1．1．1供试菌株哈茨木霉ACCC30371由中国农业微生物菌种保藏管理中心提供，接种在PDA平板培养基上，培养温度28℃，培养时间4d，备用。1．1．2培养基PDA培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，H201000mL，pH值自然。基础培养基：玉米粉7g，酵母膏1g，(NH4)2；s0。2g，K2HPO。0．6g，MgS040．5g，H201000mL，pH值6．0。1．1．3仪器1102C型恒温振荡培

7、养箱(常州诺基仪器有限公司)、SW—CJ一1G型超净工作台(苏州净化设备有限公司)、LRH一150型生化培养箱(上海一恒科学仪器公司)、LabnetP3960移液枪(美国莱伯特公司)、PHS一25型pH计(上海盛磁仪器有限公司)。1．2方法1．2．1供试菌孢子悬液的制备将PDA平板上的收稿13期：2013一lO—16基金项目：新型生物有机药肥生产关键技术产业化(2013NK4009)作者简介：粟静(1987一)．女，湖南长沙人，硕士，主要从事微生物工程和菌