福建引种的主要相思树种遗传分析及其杂交试验的初步研究

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1、独创性声明本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果t并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果．与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位‘毕业’论文作者亲笔签名：林磊勃L日期：如口l争易闫J2日论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论

2、文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书．口不保密，本论文属于不保密．i学位(毕业)论文作者亲笔签名指导教师亲笔：林莠匀L日期：如一诈f：闰，2d日期：Jm7‘月心日福建引种的主要相思树种遗传分析及其杂交试验的初步研究摘要本论文对福建引种的20种相思树种(Acaciaspp．)进行IiAPD遗传分析并对其中的19种相思树种进行ISSR遗传分析，并通过扫描电子显微镜观察其中的10种相思树种的花粉亚显微结构，在以上结论的基础上，进行相思树种间的杂交育种试验以及利用ISSR技术对其中

3、一个杂交组合的1代子代进行亲缘间的分子鉴定。研究结果如下：．，1．建立了相思树种RAPD分析的技术体系：20ul的反应体系中，含13．72ulddH：O、2．0唧01／LBuffer(含Mg”)、1．2mol／LdNTP、0．28mol／LTaq、1．2mmol／LPrimer、1．6ulDNA模板的量。反应程序为94"C预热2min，然后执行38个扩增循环，每个循环中，94"(2变性30sec。38"C复性lmin，72"C延伸90sec，72℃延伸7min．2．从100个RAPD随机引物中筛选出稳定产物，扩增带清晰，特异性强

4、的14个有效引物。14个有效引物在20种相思树种中共扩增193条DNA谱带，多态性条带百分比平均为96．89％．‘3．对llAPD数据进行聚类可知，流苏相思和珍珠叶相思最先聚在一起，其次是露珠荆相思和粉荚荆相思，它们的相异系数分别为0．15，0．22，对应的遗传距离也是0．15，0．22，马杂4相思最后聚合，处在聚类图的外围；，当取值水平在D=O．43上，其结合线将20种相思树种划分为1个大类群、1个小类、2个独立的个类，即：第一大类为纹荚相思、流苏相思、珍珠叶相思、黑木相思、灰木相思、直杆大叶相思、薄荚相思、台湾相思、厚荚相思

5、、马占相思、马杂l相思、象耳相思、多花相思；第二类包括露珠荆相思、粉荚荆相思、银荆相思、夹竹桃叶相思、榕叶荆相思；第三类有卷荚相思；第四类仅有马杂4相思．4．建立了相思树种ISSR分析的技术体系：lOul的反应体系中，含7．15ulddH：0、0．75咖oI几Buffer(含^lg’、0．Immol／LdNTP、0．1mmol／LTaq、0．9田ol／LPrimer、1．OulDNA模板的量。反应程序为94"C预热2min，然后执行35个扩增循环，每个循环中，94％2变性60sec，复性(温度根据引物不同来确定)lmin，72℃

6、延伸120sec，72℃延伸7min．5．在19种相思树种中，从50条ISSR引物中筛选出9条能扩增出清晰带型并具福建引种的士要相思树种遗传分析及其杂交试验的初步研究多态性的引物，共扩增出93个DNA片段，其中91个片段呈现多态性，占总扩增片段的97．8％．6．从ISSR聚类图上可以看出，露珠荆相思和粉荚荆相思最先聚在一起，相异系数为0．20，对应的遗传距离也是0．20，然后它们与银荆相思再聚在一起；其次是马占相思和马杂1相思聚在一起，相异系数为0．27，对应的遗传距离也是0．27；卷荚相思最后聚合，处在聚类图的外围，当取值水平

7、在O=O．50上，其结合线将19种相思树种划分为2个大类群、2个独立的个类，即：第一大类为流苏相思、珍珠叶相思、直杆大叶相思、露珠荆相思、粉荚荆相思、银荆相思、夹竹桃叶相思、榕叶荆相思；第二大类包括多花相思、黑木相思、灰木相思、薄荚相思、台湾相思、厚荚相思、马占相思、马杂1相思、象耳相思；第三类有卷荚相思；第四类仅有纹荚相思。ISSR分析所获得的分类结果与RAPD所获得结果相近，但并不完全相同。7．利用扫描电子显微镜对10种相思树种的花粉形态进行了观察和比较研究，结果表明，研究的10种相思花粉形态高度一致，均为16合体，花粉排列

8、由中央8粒花粉排上下两层，每层各为4粒，周缘为单层的8粒花粉，界限清楚，16合体呈扁球形，侧面观为椭圆形。单粒花粉为长方形或近长方形，相思树种的花粉可能为无孔沟类。8．通过套袋授粉对相思树种进行杂交育种试验，获得7个杂交组合有荚果，其中在马杂4相思×厚荚相思组合