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1、主要内容荧光的产生荧光效率与化学结构的关系荧光光度法的定量依据荧光光度计应用磷光分析法化学发光分析第三章分子发光分析法§1荧光的产生荧光:以辐射驰豫的形式回到基态时的发射光在分子荧光分析中，常以紫外光及可见光区的辐射作为激发能，所发生的荧光则多在可见光区问题：分子荧光光谱是连续光谱吗?分子荧光的波长比吸收的入射光的波长要长吗?Stock荧光Stock荧光共振荧光l激发=l荧光§3.2荧光效率与分子结构的关系一.荧光效率(荧光量子产率)φF越大，化合物的荧光越强。有分析应用价值的荧光化合物,其荧光量子产率通常在0.1～1之间φF=发射的光子数吸收的光子数kfkf+Σk≤1kf：辐射跃
2、迁的速率常数Σk：各种非辐射跃迁过程的速率常数之和=二.荧光与有机化合物结构的关系从分子结构来说,绝大多数能发荧光的物质为含有低能的π→π*跃迁能级的芳香环或杂环化合物1.共轭效应π电子的共轭程度越大，就越容易被激发,分子的荧光效率越大,而且其最大荧光波长也会相应地“红移”——向长波长方向移动例：如下的导电性高分子材料2.刚性结构和共平面效应给电子取代基,产生n-π共轭效应,加强荧光。3.取代基的影响得电子取代基,会使荧光减弱,如硝基苯无荧光。4.金属螯合物的形成近几年来,发现了8-羟基喹啉铝络合物有一个新的应用:作为小分子发光材料,用于有机电致发光器件中透明电极金属电极正孔传输材
3、料电子传输材料发光材料缓冲层光基本原理：电致发光2.1英寸手提电话显示屏国际新闻2002-07-20电视荧光屏可以卷起来起初是变得越来越宽，然后是越来越扁，现在？它已变成可卷起来的软塑料了。没错，全靠英国剑桥显示器技术公司（CDT）通过一种发光塑胶聚合物（LEP）制造廉价彩色显示屏的新技术，人们未来可购买可卷起来的电视荧光屏了。该公司总裁法伊夫说：“这其实就像‘印制’电视机，把它们印在薄薄的、差不多像纸张的塑胶上。”有了“卷式电视荧光屏”，意味着人们可随时卷起他们的电视机荧光屏，如同卷起幻灯屏。不过，这类电视荧光屏的价格与目前较笨重的电视机的价格相若。有关技术源自1989年所发现的
4、一种发光塑胶聚合物PPV（P-phenylenevinylene），它加电后会发出绿黄色的光。公司之后10年在这个基础上研发出会发出蓝光和红光的聚合物，以形成图像和制成彩色显示屏，不久后可用于移动电话、掌上电脑等设备，而“卷式电视荧光屏”也由此诞生。发光聚合物荧光屏的市场料将从2000年的多达2500万美元（约4500万新元）增至2005年的超过30亿美元，而该公司的这类发光聚合物荧光屏将占据其中大部分。Pyrene-embeddedPPynanoparticles—HTL/EMLnanohybridsAdvancedmaterials,2003,15:977-9805.化学环境对
5、荧光的影响温度：温度越低，φF越大溶剂：极性越强，φF越大pH值的影响荧光的猝灭荧光物质的分子与溶剂分子或其它溶质分子相互作用，引起其荧光强度降低，消失或荧光强度与浓度不呈线性关系的现象原因：碰撞猝灭剂分子与荧光物质发生化学反应溶解氧的存在:氧化荧光物质自猝灭:高浓度时发生(自碰撞失活)§3.3荧光的定量分析荧光分析光度法的定量依据IF∝C荧光物质的荧光强度应正比于其吸收的激发光的光强。即:IF=k(I0–I)⑴根据比尔定律：I=I0×10-ebc⑵⑵代⑴,得：IF=kI0(1-10-ebc)⑶将⑶式的指数项按Taylor级数展开,若ebc<0.05(即A<0.05),可得：IF=
6、2.3kI0ebc当I0、b一定时,IF=k’c定量分析方法工作曲线法标准加入法测定条件的选择线性范围防止自猝灭现象的发生。A<0.05,IF∝c选择合适的激发波长和荧光波长§4荧光分光光度计问题：与紫外-可见光分光光度计相比,它在构造上有哪两点不同?为什么要这样?光源要求强度大,适用波长范围宽。目前常用氙弧200-800nm范围内连续发光。样品池低荧光材料。如石英检测器荧光的强度通常较弱,故要用高灵敏度的检测器。如光电倍增管单色器两个单色器均采用光栅来分光§3.5应用荧光法灵敏度高(why?)、取样量少无机、有机、生化、医药和临床检验等领域都得到了越来越广泛的应用无机化合物简单无
7、机化合物常无荧光或荧光强度很弱,故不能用自身的荧光来分析M+R→MR能与有机试剂反应生荧光络合物的元素达60多种。其中Be、Al、B、Ga、Se及某些稀土元素的分析首推荧光法。有机化合物脂肪族与其它有机试剂作用后生成荧光性化合物，再进行测定。芳香族具有共轭π电子,多能自身发荧光。可直接测定被测物自身的荧光进行分析。如蛋白质、各种酶与辅酶、维生素等在医学检验、药物分析、生物化学、毒性分析中的应用荧光探针法测定蛋白质原理：Mn+与含有－OH或C＝O的有机染料(发荧光的分子
