免疫检测用纳米胶体金的制备及粒径控制

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1、第07卷第+期稀有金属0""(年#月NG%&07O&+53PQ@8@?6RSQ/T6LS/S@A@)/T8/4:&0""(#################################################################免疫检测用纳米胶体金的制备及粒径控制!贺昕!，熊晓东，梁敬博，李治宇，张曦（北京有色金属研究总院有研亿金新材料股份有限公司，北京!"""##）摘要：利用柠檬酸钠作为还原剂，采用液相还原法制备了适用于免疫检测的胶体金纳米颗粒。用透射电子显微镜和紫外／可见光分光光度计分别对胶体金颗

2、粒的形貌和光学吸收特性进行了检测。结果表明，柠檬酸钠的加入量是影响胶体金颗粒粒径和形貌的主要因素，制备!""$%"&"!’胶体金溶液，!’柠檬酸钠溶液加入量小于($%时，胶体金颗粒的平均直径随柠檬酸钠加入量的增加而减小，当大于($%时，胶体金颗粒的平均直径随柠檬酸钠量的增加而增大。在研究范围内，胶体金颗粒的平均粒径与最大吸收峰波长之间存在直线回归关系。制备的胶体金呈单分散的球形分布，具有较高的生物学活性，适用于胶体金免疫检测。关键词：胶体金；免疫检测；纳米颗粒中图分类号：)*!+,-.文献标识码：/文章编号："0(#12"2

3、,（0""(）"+1"+2!1"+由于胶体金的纳米级尺寸所具有的独特性质，水为经超纯水装置净化处理的二次去离子水，并在使其在医学领域得到广泛的应用。如作为标记物应"-00#$过滤器中过滤。用于分子的电镜和光镜的检测，应用于免疫层析诊!&0仪器断法和快速免疫金渗滤法等［!".］。其中胶体金免疫<=.""0>8型精密称量天平，恒温磁力搅拌器，结合检测技术被成为四大免疫标记技术之一，问世投射电子显微镜为?@A>0"!"，紫外／可见光分光光0"多年来发展十分迅速，在生物医学各研究领域特度计为8BCDEFGH9D*CHCIJI(型。实

4、验中所用的玻璃别是在医学检验中得到了日益广泛的应用。纳米胶仪器先用重铬酸钾硫酸洗液浸泡0+K，并经硅烷化体金颗粒作为该检测技术中的重要物质，其粒径大处理后用高纯水洗净，烘干后备用。小、粒径分布、形貌及颗粒的分散性直接影响着胶!&.胶体金的制备体金溶胶的稳定性和聚沉，从而制约了胶体金免疫胶体金的制备是将!""$%"&"!’氯金酸（3/4>结合检测技术的准确度和应用范围。采用柠檬酸三5%+）溶液加热至沸腾，在高速搅拌的同时迅速加入钠还原氯金酸法是制备胶体金的经典方法之!’柠檬酸钠溶液，在搅拌下恒温回流反应制得，热一［+，(］，本

5、文对柠檬酸三钠的加入量、反应时间、源撤去后需继续搅拌!($9H。搅拌速度等因素对胶体金粒径大小、粒径分布、形!&+透射电镜评价胶体金质量貌及颗粒的分散性等的影响进行考察，同时考察了将胶体金溶液滴在覆有LGF$M;F膜的铜网上，胶体金生物学活性。本文采用透射电子显微镜和紫在室温下放置0+K阴干。在透射电镜下观察胶体金外／可见光分光光度计分别对胶体金颗粒的形貌和颗粒的大小是否均匀一致，有无椭圆形及多角形。光学吸收特性进行了检测，并给出了这两种方法的拍片放大后测量胶体金颗粒直径大小，取多个点计相关性。算胶体金颗粒的平均直径及标准差

6、，前者反映颗粒的大小，后者说明颗粒是否均匀一致。!实验与方法!&(可见光光谱评价胶体金质量!&!试剂利用8BCDEFGH9D*CHCIJI(型紫外／可见光分光3/45%+·.306为自制，纯度"77&(’，配制成光度计对胶体金在可见光范围内（+""",""H$）进"&"!’（质量分数）的溶液；柠檬酸三钠为北京盖利行扫描，记录胶体金在可见光区的吸收光谱，记录精细化学品有限公司，分析纯，配制成!’（质量分最大吸收波长、最小吸收峰波长、峰宽，并对应透数）的溶液；硅烷化试剂为89:$;公司产品；实验用射电镜的观察结果给出吸收光谱与胶

7、体金形貌之间!收稿日期：0""(1"(1!"；修订日期：0""(1"210"基金项目：北京市科技计划项目（3".0+.""."+!"）作者万方数据简介：贺昕（!72,1），男，湖北十堰人，硕士，工程师；研究方向：金属材料!通讯联系人（@>$;9%：UIV4%C$!,.&DG$）46!稀有金属!5卷!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!的关系。溶液为紫红色的、透明的均匀溶液，通过透射电镜可以观察到胶体金是非团聚态的。而当柠檬酸钠加!结果

8、及讨论入量小于!%&时，制得的是紫褐色且浑浊的体系，!"#还原剂加入量对胶体金制备的影响透射电镜观察发现胶体金颗粒呈团聚态（图#）。这在#$$%&$"$#’氯金酸溶液中加入不同量#’是由于还原剂加入量小于理论值时，反应生柠檬酸钠溶液时制备的胶体金最大吸收峰波长，以成的胶体金颗粒成为其继续长