《组培应用》PPT课件

《《组培应用》PPT课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、植物组织培养应用组培快繁脱毒超低温保存人工种子组培快繁组培快繁组织培养快速繁殖（rapidpropogation），又称离体快繁（invitrorapidpropagation），是指将植物材料放在试管内，给予人工培养基合适的条件，以达到高速增殖的目的，所以也称为快速无性繁殖（rapidclonalpropagation）。为什么要快繁？有些植物由于收种困难或种子的发芽率很低；栽种时耗种量大，繁殖系数低，如，贝母、番红花；组培方法获得无毒苗；节省土地，10万株苗/30平米；1快繁体系的建立1）无菌株系材料的

2、选择选择适当的外植体对于快速繁殖能否成功非常重要，对于快速繁殖的药用植物品种，一般应选择生产上大量推广使用的具有优良性状或能预见未来有商业开发前景的品种。选用接种外植体时，应采摘具有本品种特征，且生长健壮的植株幼嫩部位，比较好的是茎尖。茎尖形态已基本形成，生长速度快，遗传性状稳定，但是茎尖往往受到材料来源的限制；带顶芽或腋芽的幼嫩茎段或枝条也可以作为外植体。取材时应该考虑的问题a，外植体大小外植体的大小通常由培养的目的决定。快繁：带腋芽的茎段或枝条，0.5cm左右，过小易死亡，过大不容易诱导分化出芽而且易污

3、染；脱毒：需要使用顶端分生组织，外植体越小感染病毒机会越小，但培养难度加大，反之亦然。b，植株的生理状态一般取芽已膨大但芽鳞还未张开时最为合适，此时芽生长旺盛，并有芽鳞片的保护，不易污染；对于某些需要低温、高温或特殊处理才能打破休眠的块茎、鳞茎、球茎，常常需要处理后才能剥取茎尖进行培养。c，芽在植株上的部位芽：顶芽、侧芽、腋芽在一些草本植物（如菊花，香石竹）中，使用顶芽或上部的芽做分生组织成功率常常比侧芽或基部的芽要高。木本植物中常用腋芽做材料，性状稳定，再生所需时间短，再生植株健壮，适应强d，取材植株的年

4、龄供体植株的年龄对不定芽和愈伤组织的形成影响明显；幼龄株：繁殖系数高；老龄株：繁殖系数下降多年生木本植物随树龄增加，分生组织、茎尖和芽的培养困难很多。材料除菌接种材料表面清洗杀菌剂消毒：升汞/次氯酸钠消毒后在无菌条件下切成合适大小的小段，接种到培养基上。芽的增殖芽增殖的4种方式1通过顶芽或腋芽直接产生丛生芽；2诱导不定芽增殖分化；3诱导不定体胚的产生4先诱导愈伤组织，然后增殖愈伤分化成株壮苗与生根壮苗培养：不加或少加激素，促使幼苗健壮；生根培养：基本培养基加低浓度或不加细胞分裂素，高浓度生长素。细胞分裂素/

5、生长素高有利于芽生长；细胞分裂素/生长素低有利于根生长；驯化、移栽a，保持水分；b，选择合适的种植介质：疏松通气、保水，容易灭菌，如蛭石、沙子、谷壳、锯末等。c，防止菌类滋生：使用杀菌剂d，光照温度：试管苗从异养到自养，光照不能太弱适宜温度18~25度。脱毒植物的脱毒培养在植物生产中，病毒病是危害植物产量和质量的重要因素。以无性繁殖方式为主的植物品种，在自然环境中长期经受各种病毒病的重复传播，导致结果：光合作用减弱；生长势变弱；品种退化；产量降低，减产30%以上。常见病毒病，黑斑病、花叶病、皱缩病病毒的诊断

6、局部症状：病毒沿侵染点周围产生斑点，分褪绿斑、坏死斑、环状斑；系统症状：病毒侵染寄主后能够在整个植株中运输并产生危害，在叶片、茎、果等组织中产生危害。植物受病毒危害后的外部症状植株变小：矮缩、矮化、丛簇和扭曲，有时病毒侵染后不表现明显性状，称为潜伏侵染。植株矮化常减小叶片大小、叶间距以及叶片数减小，也可能引起果实种子变小。叶片症状：花叶症状，病毒侵染后叶片不均匀褪绿；黄化症状，侵染病毒后叶片变黄；环斑及蚀纹，叶片出现单环纹或双环纹环斑，叶片上出现不规则纹线症状称为蚀纹。发育异常畸形，叶片扭曲、皱缩、卷叶坏死

7、，整个组织、器官或植株死亡如何应对病毒病对于病毒病，目前并无有效防治措施；利用茎尖分生组织脱毒培养，可以获得脱毒苗，恢复植物固有的优良性状。脱毒苗再通过克隆繁殖可以获得大量脱毒的优良种，供生产上使用。脱毒技术1热处理脱毒利用病毒和寄主植物对高温的忍耐程度差异，使植物的生长速度超过病毒的扩散速度，得到一小部分不含病毒的分生组织，进行无毒个体培养。热处理脱毒的原理：将植物置于高于正常温度环境中，组织内部病毒部分或全部钝化，但寄主植物细胞很少或不受到伤害。高温钝化病毒主要表现在：高温可断裂病毒RNA；病毒内部酶裂

8、解，造成病毒颗粒破坏；辅助酶钝化，如RNA聚合酶钝化导致RNA合成受阻；高温下蛋白质结构发生变化，病毒不能正确组装；热处理脱毒处理温度的时间因物种和器官的生理状态而异，一般35~40小时，短则几十分钟，长可达数月。热处理方法热水处理：热水处理对休眠芽效果比较好热空气处理：对活跃生长的茎尖效果好，既能消除病毒，也能使寄主植物有较高的存活机率。把旺盛生长的植物转移到35~40度的热疗室处理一定时间，热处理后要立刻把茎