黄芩提取物抗单增李斯特菌感染的作用的研究

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1、分类号：Ｓ８５９．７单位代码：１０１８３研究生学号：２０１５８５Ｋ００１密级：公开吉林大学硕士学位论文专业学位（）黄芩提取物抗单增李斯特菌感染的作用的研究ＴｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＳｃｕｔｅｌｌａｒｉａｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓｅｘｔｒａｃｔｏｎＬｉｓｔｅｒｉａＭｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ作者姓名：魏滋鸿类别：兽医硕士领域（方向）：兽医指导教师：邓旭明教授培养单位：动物医学学院２０１８年１２月Theinhibitionof

2、ScutellariabaicalensisextractonListeriaMonocytogenesinfection作者姓名：魏滋鸿领域（方向）：兽医指导教师：邓旭明教授类别：兽医硕士答辩日期：2018年12月6日未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用（但纯学术性使用不在此限）。否则，应承担侵权的法律责任。吉林大学硕士学位论文原创性声明本

3、人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担Ｄ学位论文作者签名：曰期：年仏月／＞日中文摘要黄芩提取物抗单增李斯特菌感染的作用的研究单核细胞增多性李斯特菌（Listeriamonocytogenes;L.monocytogenes），简称单增李斯特菌，是六种

4、常见李斯特菌中感染性最强的一种，是临床上常见李斯特菌病的主要病原体，为兼性厌氧的机会致病菌，有较强的运动能力。单增李斯特菌广泛存在于自然环境当中，常见于人类及动物的粪便、不同地区的土壤、水生环境以及各类植物和动物来源的食物（如奶酪、牛奶、鸡蛋、香肠、蔬菜等），可机会性的感染老人，孕妇，小孩等免疫力低下人群，相关感染性疾病具有较高的死亡率。随着抗生素不断地滥用和乱用，细菌耐药性逐渐成为了临床感染疾病治疗中的重要难题，单增李斯特菌作为常见的革兰氏阳性致病菌也被视为人类和动物健康的重要威胁。近年来，随着抗毒力策略的

5、不断发展，细菌毒力因子在侵袭过程中作用越来越受到人们的关注。同其它革兰氏阳性菌一样，单增李斯特菌在侵袭过程中会表达多种毒力因子用于菌体的生存和增殖。当菌体被宿主细胞吞噬后，会被困于细胞吞噬泡中最终被溶酶体降解，而此时单增李斯特菌会大量表达适应吞噬泡中酸性环境的李斯特菌溶血素（listeriolysinO;LLO），用于协助菌体逃逸至细胞质中，进而完成增殖过程。已有研究表明，当单增李斯特菌敲除LLO编码基因后，菌体不再具备从吞噬泡中逃逸的能力，且会几乎完全丧失对模型动物的致病能力。因此LLO是单增李斯特菌感染疾

6、病的潜在治疗靶点。本研究通过溶血实验、生长曲线和蛋白免疫印迹实验发现黄芩提取物在较低浓度范围内（8-64μg/ml）即可显著抑制培养物上清的溶血活性，但药物在这一浓度范围不影响细菌生长，也不影响细菌成孔毒素LLO的表达，而是直接中和LLO介导的成孔活性。体外细胞感染试验中，黄芩提取物处理下，降低细胞内细菌增殖，细菌介导的细胞毒性作用也显著下降。体内动物感染试验发现黄芩提取物治疗后可降低靶组织内细菌菌落定植，对细菌感染所致的动物死亡具有一定的抑制作用。I黄芩具有抗肿瘤，杀菌，抗炎和清除自由基等生物学活性，是我国

7、中医药宝库中最常用的药物之一。本研究为黄芩提取物抑制LLO溶血活性的机制研究提供了重要的实验依据，也为单增李斯特菌感染疾病的治疗研究提供了重要的理论基础和物质基础。关键词：黄芩提取物，李斯特菌溶血素，单增李斯特菌，抗毒力，抗感染IIAbstractTheinhibitionofScutellariabaicalensisextractonListeriaMonocytogenesinfectionListeriamonocytogenes(L.monocytogenes),isthemostinfectiou

8、spathogenofthesixkindsofcommonListeriamonocytogenes.Itisafacultativeanaerobicopportunisticpathogenwithstrongathleticability,anditisthemainpathogenofListeriamonocytogenesinfections.Listeriamonocytogenes