PLGA支架联合BMSCs修复兔膝关节软骨缺损的研究

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1、学校代码１０４５９学号或申请号＠密级公开邳州炎ｆ硕士学位论文ＰＬＧＡ支架联合ＢＭＳＣｓ修复兔膝关节软骨缺损的研究作者姓名：柳超导师姓名：曹靖教授学科门类：基础医学专业名称：人体解剖与组织胚胎学培养院系：基础医学院完成时间：２０１８年１１月Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMaster（doctor）Theexperimentalstudyontheeffectoflactic-co-glyc

2、olicacidstentsincombinationwithBonemarrowmesenchymalstemcellsintherepairofrabbitkneearticularcartilagedefectsBy:ChaoLiuSupervisor:Prof.JingCaoDepartmentofanatomyBasicMedicalCollegeofZhengzhouUniversity2018-11原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研宄所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，

3、本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果ｓ对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。。本声明的法律责任由本人承担＞学位论文作者：日期年／月冷日ｉ－ｉ１ｔ／学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他

4、复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文一。或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第署名单位仍然为郑州大学保密论文在解密后应遵守此规定。ｆ学位论文作者：日期：妒年／＞月分日４务ＡＩPLGA支架联合BMSCs修复兔膝关节软骨缺损的研究硕士学位申请人：柳超推荐导师：曹靖教授郑州大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学河南郑州450001摘要背景与目的：退行性病变骨性关节炎和自身免疫性疾病类风湿性关节炎因软骨病变严重影响了老年患者的生活质量；骨软骨病、骨性关节炎、类风湿关节炎、发育障碍、膝关节感

5、染、骨肿瘤、运动性损伤或其他创伤等也可引起软骨损伤、缺损；导致关节病变。因软骨组织本身血管分布极少，缺失相应的营养物质，所以受损后再生能力比较差。目前，无论是临床药物治疗，还是常规的外科手术以及新兴的微创外科手术，均不能达到良好的修复效果，给患者的生活带来了严重的影响。近年来，组织工程技术不断发展和创新，为临床治疗关节软骨损伤带来新的思路和方法，为关节软骨缺损患者的康复带来的希望。有研究发现如果BMSCs附着在载体上，共同植入软骨缺损处，种子细胞就不容易消失，且能固定在软骨缺损处，较容易形成新的软骨。目前人工合成的生物活性材料支架是组织

6、工程支架研中的热点。国内外已有研究利用复合聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）支架作为修复肌腱、软骨、韧带缺损的载体。有研究指出PLGA支架不仅促进关节软骨缺损再生的效果较好，还具有可塑性强，易吸收，无免疫排斥反应等优点，比较适合作为关节软骨缺损修复的组织工程材料。组织工程技术可能为关节损伤的修复提高新的治疗方向和方法。方法：1.BMSCs的培养及鉴定：3%水合氯醛麻醉后，于兔胫骨处用10ml注射器取骨髓液，培养BMSCs并用苏木伊红染色方法鉴定。2.准备直径为4mm的孔隙率92%PLGA支架。I3.随机将40只新西兰兔分成空白组、PLGA

7、组、PLGA/BMSCs组、BMSCs组4组，空白组为软骨缺损模型组，不做处理。PLGA组在兔膝关节软骨缺损处置入全层PLGA支架，BMSCs组在兔膝关节软骨缺损处注射BMSCs，PLGA/BMSCs组在兔膝关节软骨缺损处置入黏附BMSCs的全层PLGA支架。4.第8周和第16周时取各组兔膝关节缺损处新生组织进行行HE染色和甲苯胺蓝染色，在倒置相差显微镜和扫描电镜下观察兔膝关节缺损处新生组织。5.采用RT-PCR法对第8周和第16周各组兔膝关节缺损处新生组织进行定量检测CollagentypeII，SOX-9和Aggrecan的表达水平

8、。结果：1.术后各组动物膝关节未见炎症反应。第8周取膝关节，肉眼可见PLGA/BMSCs组软骨缺损部位被粉色骨新生组织填充，新生组织表面呈透明软骨样，新生软骨组织表面光滑，未见明显凹陷。术后16周观察PLG