大型海藻脆江蓠与龙须菜多糖抗炎抗肿瘤活性研究

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1、暨南大学硕士学位论文题名（中英对照）：大型海藻脆江蓠与龙须菜多糖抗炎抗肿瘤活性研究Anti-inflammatoryandAnticancerActivityofPolysaccharidesfromtheSeaweedsGracilariachouaeandG.lemaneiformis作者姓名：吴飞燕指导教师姓名杨宇峰王一飞及学位、职称：教授教授学科、专业名称：生物工程学位类型：（学术学位/专业学位）论文提交日期：论文答辩日期：答辩委员会主席：论文评阅人：学位授予单位和日期：摘要脆江篱和龙须菜多糖具有多种生物活性和极高的开发利用价值

2、。本研究以大型海藻脆江篱和龙须菜为材料，利用生化技术提取分离获得其多糖，研究了两种大型海藻多糖的抗炎、抗肿瘤活性，以期为大型海藻的高值化利用提供科学依据。主要结果如下：1.采用CCK-8试剂盒(CellCountingKit)、实时定量基因扩增荧光检测系统(QuantitativeReal-time-PCR,qPCR)等方法评价了脆江蓠和龙须菜多糖的体外抗炎效果，研究发现，脆江蓠多糖能显著降低RAW264.7、THP-1细胞中脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS）诱导的炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达

3、量。龙须菜多糖能显著降低RAW264.7、THP-1细胞中LPS诱导的炎症因子IL-6和TNF-αmRNA表达量。两种大型海藻多糖体外抗炎效果显著。2.采用3%葡聚糖硫酸钠（DextranSulfateSodiumSalt,DSS）诱导的小鼠肠炎模型评价了两种大型海藻多糖的体内抗炎效果。研究发现，脆江蓠多糖给药浓度为250mg/kg时，能缓解小鼠疾病严重程度；龙须菜多糖给药量为250mg/kg能减轻小鼠疾病严重程度、结肠缩短程度和结肠组织损伤程度。脆江蓠、龙须菜多糖有一定的体内抗炎效果。3.脆江蓠多糖能降低食管癌细胞株的存活率。采用CC

4、K-8试剂盒，qPCR评价脆江蓠、龙须菜多糖的抗癌活性。结果表明，脆江蓠多糖能降低食管癌细胞存活率，与5-Fu联用能显著降低食管癌ECA109细胞株的存活率；但龙须菜多糖的抗食管癌活性不明显。4.采用蛋白质免疫印迹（Westernblot）、荧光显微镜等方法研究了脆江蓠多糖增敏5-Fu抗食管癌的作用机制。发现脆江蓠多糖通过抑制肿瘤细胞内溶酶体的功能，抑制了肿瘤细胞自噬，导致细胞代谢紊乱，进而发生凋亡。脆江蓠多糖通过抑制自噬促凋亡实现抗食管癌作用。综上所述，脆江蓠、龙须菜多糖具有体外抗炎活性。龙须菜多糖能缓解肠道炎症、保护肠道，有望开发作

5、为肠道保健品和抗炎药应用于功能食品和生物医药领域。脆江蓠多糖具有抑制肿瘤细胞自噬促凋亡的作用，有助于解决化疗药物耐药问题，有望开发作为化疗药物增敏剂、抗肿瘤辅助材料或功能食品，应用于食品和医药领域。关键词：脆江蓠；龙须菜；多糖；抗炎；抗癌IAbstractSeaweedsGracilariachouaeandG.lemaneiformisarewidelycultivatedseaweedinChina.Polysaccharidesfromseaweedshavebiologicalactivityanddisplayexcellen

6、tbiologicalcharacteristics.Theyareidealmaterialforfunctionalfoodsandmedicalmaterials.Inthisstudy,weextractedandseparatedthepolysaccharidesfromthetwoseaweeds,andthenstudiedtheiranti-inflammatoryandanti-tumoractivitiestoprovidescientificbasisforthemedicaluseofseaweeds.Them

7、ainresultsareasfollows:1.Theanti-inflammatoryeffectsofpolysaccharideswereevaluatedwithCellCountingKit(CCK-8)andQuantitativeReal-time-PCR(qPCR).TheresultsshowedthatG.chouaepolysaccharidescansignificantlyreducethemRNAexpressionofinflammatorycytokinesIL-1β,IL-6,andTNF-αinRA

8、W264.7andTHP-1cellsstimulatedbyLPS.G.lemaneiformispolysaccharidescouldsignificantlyreducedthemRNAexpres