长期高脂饲养对大鼠胰岛功能和胰岛细胞凋亡的影响及复方中药的干预作用

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时间:2019-05-20

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1、中文摘要长期高脂饲养对大鼠胰岛功能和胰岛细胞凋亡的影响及玉液汤化裁的干预作用摘要目的:2型糖尿病有明显的遗传异质性,并受到多种环境因素的影响,胰岛素抵抗(IR)和胰岛功能障碍是其发病的中心环节。脂代谢紊乱往往是整个病理进程的早期事件,亦是IR的特征之一:胰岛0细胞因代谢负荷增加而代偿肥大增生,另一方面,肥大的胰岛p细胞易于凋亡,功能易于失调,p细胞凋亡增加会使胰岛素分泌细胞量减少,最终导致胰岛功能衰竭。在临床糖尿病,胰岛细胞凋亡十分显著,近年来研究显示p细胞凋亡亦是2型糖尿病早期事件。对于糖尿病,中

2、医学有肾虚血淤理论解释其病因,并认为糖尿病属于消渴症范畴。本研究在治疗“消渴症”的中药—复方玉液汤的基础上,重新组方,形成复方玉液汤化裁。本方具有益气滋阴,固肾消渴,疏血通络之功效。本研究旨在:1通过长期高脂饲养,观察正常大鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌、胰岛细胞凋亡和p细胞量的变化,探讨脂毒性在糖尿病发病中的意义;2观察复方中药玉液汤化裁对长期高脂饮食大鼠胰岛细胞凋亡、p细胞量及葡萄糖刺激的胰岛素分泌的J&句,探讨复方中药对胰岛脂毒性的保护作用。方法:健康8周龄SD雄性大鼠60只,体重208士20g,由

3、河北医科大学实验动物中心提供。随机分为4组(n=15):普通饲料组(NC,正常对照组,脂肪占热量百分比13%),高脂饲料组(I-IF,脂肪占热量百分比55%),高脂饲料加二中文摘要甲双肌组(MT),高脂饲料加中药组(HM)。分笼饲养,每笼5只,饲养6个月。每组大鼠均于实验开始与结束时称量体重,取血。禁食12h,晨起眼内毗毛细管取血,保存于一200C,用于各项指标的测定。实验结束时行OGT'I,试验,留取胰腺组织保存于中性多聚甲醛中,用于HE染色、免疫组化及胰岛细胞凋亡的测定。1血糖和胰岛素测定:血糖

4、用葡萄糖氧化酶法测定;胰岛素用放免法测定。血脂测定:甘油三脂(triglyceride,TG)、总胆固醇(totalcholesterole,TC)高密度脂蛋白胆固醇(highdensitylipoprotein-cholesterole,HDL-C)用比色法测定,低密度脂蛋白胆固醇(lowerdensitylipoprotein-cholesterole,LDL-C)由Friedewald公式(LDL-C=TC-HDL-TG/2.2)mmol/L求出。2内脏脂肪含量测定:剥离大网膜和附翠脂肪称重,

5、并计算其占体重的百分率。3胰岛细胞形态学检查:胰腺切片用HE染色、免疫组化和TUNEL方法观察胰岛D细胞量和细胞凋亡情况。4统计学处理所有数据用SPSS10.0软件处理,计量资料以均数士标准差(x1s)表示,组间差异用两样本均数的t检验进行比较,多组比较采用单因素方差分析。结果1体重:大鼠不同饲料喂养6个月后,单纯高脂饮食组体重(490士28g)较对照组(428士37g)明显增高,有显著差异(P<0.01),中药干预组和二甲双呱干预组体重(分别为2中文摘要406士32g,403士22g)与正常对照组

6、相比,无显著差异,但明显低于单纯高脂饮食组体重(P<0.01)。高脂饮食组内脏脂肪占体重百分比(5.0士0.7%)较对照组(2.810.2%)明显增高,有显著性差异(P<0.01),中药干预组内脏脂肪占体重百分比(4.5士0.5)和二甲双肌干预组内脏脂肪占体重百分比分(4.7士0.4)与单纯高脂饮食组相比,无显著差异,仍明显高于正常对照组(P<0.01).2OGT结果(n=6):实验结束时,各组间空腹血糖(FBG)无差别。葡萄糖灌胃后30,60,120min各时间点血糖FE组均明显高于NC组(P<0

7、.05-0.01).HM组和M7,组各时间点血糖均明显低于HF组(P<0.05-0.01).3葡萄糖刺激的0细胞胰岛素释放功能:空腹胰岛素水平HF组(26.516.2mlU/L)明显高于NC组(17.712.3rnlU/L)(P<0.01),葡萄糖灌胃后30min胰岛素水平HF组(31.113.3mlU/L)显著低于NC组(45.3士4.8mlU/L),MT组(42.3士3.3mlU/L)和FM组(39.8士4.5nJU/L)(P分别<0.01)。而120min血胰岛素水平HF组(28.5士5.3m

8、IU/L)明显高于NC组(17.2士1.6mlU/L),HM组(21.9士6.2mIU/L)和MT组(17.913.2mIU/L)(P分别<0.05)。4血脂:喂养6个月后,单纯高脂组TG(1.16士0.14mmol/L),TC(3.7210.70mmol/L),LDL(1.1610.40mmol/L)分别与正常v照组TG(0.68士0.18mmol/L),TC(1.68士0.29mmol/L),LDL(0.45士0.1mmol/L)相比均明显升高,差别有显著性(分别

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