H2SCSE系统在肺缺血再灌注损伤中作用

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1、温州医学院硕士学位论文H2S／OSE系统在肺缺血一再灌注损伤中的作用中文摘要目的：探讨胱硫醚一Y一裂解酶(cystanthionine—Y—splittingenzyme，CSE)与硫化氢(Hydrogensulfid，H2S)系统在肺缺血一再灌注损伤中的作用。方法：健康SD大鼠随机分成4组，假手术对照组(sham组)，肺缺血一再灌注组(LIR组)，肺缺血一再灌注+硫氢化钠组(LIR+NaHS组)，肺缺血一再灌注+炔丙基甘氨酸组(LIR+PPG组)，每组10只。麻醉后左侧开胸，游离肺门，穿过阻断带，复制在体原

2、位单肺缺血一再灌注模型。sham组左肺门过阻断带后不阻断肺门；LIR组左肺门过阻断带后阻断左肺门缺血30min，松开阻断带再灌注120min；LIR+NaHS组手术前5天每天腹腔注射NaHS(28llmol／kg，溶于0．5mL生理盐水)；手术前15min再次注射；其余同LIR组。LIR+PPG组手术前5天每天腹腔注射PPG(30mg／kg，溶于0．5mL生理盐水)；手术前15min再次注射；其余同LIR组。各组实验结束后抽血检测H2S浓度，丙二醛(MDA)含量，髓过氧化物酶(MP0)、超氧化物歧化酶(SOD

3、)、一氧化氮合酶(NOS)活力和一氧化氮(N0)含量；同时取肺组织测肺系数，检测组织H2S含量及CSE酶活力；RT--PCR法检测肺组织CSEmRNA的表达；光镜观察肺组织形态学改变及计数肺泡损伤数；应用免疫组化观察肺组织bcl--2，bax蛋白的表达强度；TUNEL检测肺组织细胞凋亡；电镜观察细胞超微结构的改变。结果：1．LIR组大鼠血浆和肺组织H：S含量均低于Sham组(尺0．01)；LIR+NaHS组显著高于LIR组(P

4、著高于LIR+PPG组(尺0．01)。2．各组大鼠肺组织CSE活性的变化同血浆、肺组织H。S含量的变化相似。在LIR组低于Sham组(P

5、量和MPO活性显著增高(P

6、O均显著降低(尸<0．01)6．bcl-2、bax蛋白表达的免疫组化染色，LIR组较Sham组明显增强，其吸光度值比较有显著差异(均PqO．01)，同时bcl-2／bax的比值降低(均Pd)．01)。与LIR组比较，LIR+NaHS组bcl-2蛋白表达增强，吸光度值增高，bax表达减弱，吸光度值降低，bcl-2／bax的比值增高(P(O．05)：而LIR+PPG组bcl一2表达减弱，吸光度值降低，bax表达增强，吸光度值增高，bcl-2／bax的比值降低(P

7、测示LIR组凋亡指数显著高于Sham组(P

8、细胞渗出减少，肺泡较完整；LIR+PPG组肺不张伴肺气肿，肺间质水肿明显，炎症细胞大量浸润，肺泡内可见较多红细胞渗出，损伤基本与LIR组相似，部分比LIR组严重。10．电镜观察：Sham组II型肺泡上皮细胞(ATII细胞)超微结构基本正常；LIR组肺内毛细血管内皮细胞肿胀，ATII细胞表面微绒毛减少，线粒体肿胀，板层小体稀少，出现较多空泡。肺泡隔水肿，肺泡隔及毛细血管内炎症细胞附壁，以中性粒细胞为主