前列腺素E合成酶在小鼠卵巢中的表达与调节

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1、东北农业大学硕士学位论文前列腺素E合成酶在小鼠卵巢中的表达与调节姓名：孙童申请学位级别：硕士专业：基础兽医学指导教师：杨增明2003.6.1塑型矍耋!垒些墼奎!：垦塑墨皇墼耋篁量塑至摘要前列腺素E合成酶(prostaglandinEsynthase，PGES)是PGE2生物合成过程的末端限速酶，催化环氧合酶的产物PGH2转化成PGE2。根据PGES在细胞内的定位和对谷胱甘肽的依赖性，分为膜相关的谷胱甘肽依赖型的PGES(mPGEs)和可溶性谷胱甘肽依赖的PGES(cPGES)。已经证实，PGES在小鼠胚胎着床和蜕膜化过程，以及牛的排卵过程中

2、起很重要的作用。本实验利用免疫组织化学以及原位杂交的方法，比较系统地研究了小鼠排卵、黄体形成和退化过程中，mPGES和cPGES在卵巢中的表达规律。f促性腺激素诱导的小鼠排卵模型中，mPGESmRNA在初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞上均有表达。在PMSG注射3h时，mPGESmRNA表达达到高峰。注射hCG3h后，卵丘颗粒细胞上有mPGESmRNA的表达，但卵泡壁颗粒细胞上只能检测到mPGESmRNA的微弱表达。在有腔卵泡中，mPGESmRNA主要表达于包括卵丘细胞在内的颗粒细胞上。mPGES蛋白在21天未注射促性腺激素的小鼠卵巢初级卵泡和次

3、级卵泡中的免疫染色较强，仅在PMSG处理12小时后，才有比较微弱的下降趋势。在hCG注射后3小时，mPGES的表达呈现峰值，随后，蛋白的表达下降。cPGESmRNA在初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞上均有较强的的表达。PMSG注射48h时，cPGESmRNA的表达下降，而且这种表达的下降一直持续到hCG注射后1lh。在hCG处理3小时后，cPGESmRNA在卵丘细胞中的表达也较强。在各级卵泡的卵母细胞质中有很强的cPGES免疫染色，仅在PMSG注射48小时，在卵母细胞质中的cPGES免疫染色有所下降。在PMSG处理后的卵泡颗粒细胞中，几乎检测不

4、到cPGES免疫染色。但经hCG处理后3小时，cPGES免疫染色明显上调，直到hCG处理后1l小时(即排卵时)，cPGES免疫染色才有所减弱。在hCG注射后第2～3天形成的黄体细胞中，有较强的mPGESmRNA表达。在黄体细胞中的mPGESmRNA表达随后有所下降，但其下降趋势不很明显。mPGES蛋白在hCG处理后第l～3天新形成的黄体中有较微弱的表达，但从第9天开始有所升高。cPGESmRNA在hCG处理后第1天的黄体细胞中表达较强。在第2～3天的黄体细胞中，cPGESmRNA表达达到最高。在黄体细胞中的cPGES免疫染色与mPGES免疫

5、染色相似。这些结果表明，mPGES和cPGES可能在小鼠卵泡发育，排卵以及黄体形成和退化过程中起～定的作用。关键词：mPGEScPGESj小鼠卵巢姊卵，颗粒细胞、黄体，j⋯t’7芒’L7尹L、、、奎!!垒些奎耋蝥兰竺圭兰堡竺三ExpressionandregulationofprostaglandinEsynthaseinmouseovaryAbstractProstaglandinEsynthase(PGES)istheterminalrate-limitingenzymeforPGE2synthesis，whichcatalyzesth

6、econversionofPGH2intoPGE2．ThereexiststwoisoformsofPGESglutathione—dependentmembrane-associatedPGES(mPGES)andglutathione-dependentcytosolicPGES(cPGES)．PGEShasbeenprovedtobeimportantformouseimplantationanddecidualization，andforovulationinbovine．TheaimofthisstudyWastoinvestig

7、atetheexpressionofmPGESandcPGESinmouseovaryduringthesexualmaturation，ovulation，andformationandregressionofcorpusluteumbyimmunohistochemistryandinsituhybridizationmPGESmRNAwasexpressedingranulosacellsofprimaryandsecondaryfolliclesduringovulationinducedbygonadotropin．Ahighle

8、velofmPGESmRNAWasseen3hafterPMSGtreatmentmPGESmRNAsignalswerealsoseen3hafterhCGtreatment．