细胞及分子生物学

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1、38细胞及分子生物学•总学时:54+18=72实验6次•共讲课16周,中间1周期中考试,最后1周期末复习第一部分绪论•1细胞生物学的研究对象•2主要研究内容•3该学科的发展简史•4该学科的主要特点•5主要研究方法•6生命进化的几种形式•7真核细胞与原核细胞的主要区别•8真核细胞的主要结构体系1.1细胞生物学的主要研究对象–细胞生命活动规律•细胞内基因组的表达•基因表达的产物如何装配成基本的结构体系及各种细胞器•基因表达产物如何调节细胞的生命活动1.2主要研究内容–结构质膜、内膜系统、细胞核、细胞骨架–功能物质运输

2、、信号传递蛋白质分选和运输细胞周期,细胞分化,细胞衰亡1.3细胞生物学的发展简史•细胞的发现1665年胡克•细胞学说的建立1838-1839施旺和施莱登•细胞生物学的经典时期19世纪后25年–细胞器的发现,细胞分裂现象,原生质理论•实验细胞学阶段–细胞遗传学,细胞生理,细胞生化•细胞超微结构学的发展•分子生物学的发展•分子细胞生物学:分子、细胞、细胞超微结构水平1.4该学科的主要特点•与人类的生命活动关系密切38•实验性的科学•不断发展的学科,当今生命科学发展的基础和瓶颈1.5主要研究方法(一)•细胞形态结构的观

3、察–显微镜电子显微镜•细胞组分分析方法–离心技术细胞器、亚细胞结构等–显色技术DNA、RNA、多糖等•细胞内特异蛋白的定位与定性–免疫荧光、免疫电镜、免疫印迹等技术•细胞内核酸的定位与定性–原位杂交、SOUTHERN杂交,NORTHERN杂交1.5主要研究方法(二)•同位素技术的应用–生物大分子在细胞内的合成动态–各种杂交技术上•定量细胞化学分析技术–显微分光光度测定技术流式细胞仪•细胞工程的有关技术–细胞培养、细胞融合、单克隆抗体技术、细胞拆合、显微操作技术、繁殖生物学技术等1.6生命进化的几个阶段•非细胞形态

4、病毒–生物大分子---细胞---病毒•原核生物真细菌细菌蓝藻•古核生物古细菌(生长在极端特殊环境中的细菌)如:产甲烷的细菌类、硫氧化菌、盐生菌等•真核生物–单细胞酵母–多细胞生物高等动植物细胞的基本知识•细胞膜•遗传信息载体DNA与RNA•核糖体•酶•支原体可能是最小、最简单的细胞381.8真核细胞的基本结构体系•生物膜系统•遗传信息表达结构系统•细胞骨架系统第二部分 质膜及细胞表面•1 细胞膜概述•2 结构模型•3 组成组分及主要特点•4 细胞表面的特化结构•5 细胞连接•6 细胞外被及细胞外基质•7 物质运输

5、•8 信号传递•9 总结质膜的功能1.细胞膜的概述•位于细胞最外层的由脂质和蛋白质组成的生物膜•是最重要的细胞器之一•与细胞基本的生命活动有关•进化上•质膜的形成是非细胞生命与细胞生命的一个重要分界点•细胞内膜系统的发展是细胞生物由低级到高级发展的反映2.质膜(plasmamembrane)的结构模型•红细胞在质膜研究中的作用•蛋白质-脂类-蛋白质的三明治式DavsonDanielli1925•单位膜模型1959Robertson图2-2、2-3•流动镶嵌模型1972SingerNicolson•极性头部和非极性

6、尾部的磷脂双分子层•蛋白质分子镶嵌脂双分子层或结合在其表面•细胞膜是一个相对稳定的动态结构3.质膜的组成组分•膜脂–磷脂>50%1个极性头部和两个非极性尾;脂肪酸链多为偶数;还具有不饱和脂肪酸–糖脂<5%如:决定红细胞的ABO血型物质38–胆固醇<1/3调节流动性,增加稳定性–特点:流动性(温度,脂肪酸链的长短和饱和程度)不对称性(同一膜脂分子在脂双分子层中分布不均匀,糖脂更是如此)•膜蛋白–内在膜蛋白,外在膜蛋白主要区别–特点:流动性(patching,capping),不对称性(分布不对称,有方向性)膜蛋白以

7、不同方式镶嵌在脂双分子层中,分布也具有不对称性膜蛋白的流动性成斑现象光脱色恢复技术研究膜脂与膜蛋白流动性的基本技术研究膜常用的试剂或方法•去垢剂(detergent)–离子型去垢剂SDS作用剧烈,易使蛋白变性–非离子型去垢剂TritonX-100作用温和,可得到有生物活性的膜蛋白•脂质体(liposome)–根据磷脂分子在水相中形成稳定的脂双层膜的特性制备人工膜.–应用:•研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质的实验材料•用于基因转移•用于诊断和临床治疗4.细胞表面的特化结构•膜骨架•鞭毛,纤毛•微绒毛•细胞的变形足•放

8、在细胞骨架一章讲5.细胞外被与细胞外基质•细胞外被cellcoat或glycocalyx–质膜外表面粘多糖物质,与质膜中的蛋白质和脂类以共价键相连,形成糖蛋白和糖脂,是组成细胞质膜的正常结构组分–功能:保护膜蛋白,参与细胞识别38•细胞外基质extracellularmatrix–特点:细胞外空间,分泌蛋白和多糖,网络结构–功能:抗张力,弹力,支持,提供信号,参与形态建成

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