仪器分析紫外-可见分光光度法

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1、第一章紫外-可见分光光度法掌握紫外-可见分光光度法的基本原理及其方法应用；熟悉紫外-可见分光光度计的结构；教学目标（一）、知识目标熟练操作各种型号的紫外-可见分光光度计；能应用紫外-可见分光光度法进行样品的定性、定量分析。（二）、能力目标利用物质对紫外-可见光的选择性吸收，用紫外-可见分光光度计测定物质对紫外-可见光的吸收程度并进行定性、定量分析。紫外-可见分光光度法简介1、光的波粒二象性波动性粒子性一、光的基本性质波长：两个相邻波峰或波谷间的距离（nm）频率：单位时间里通过一固定点处波的数目

2、（S-1）光的波动性光以波的形式传播，可用波长、频率来表示。=c/c=3×1010cm/s返回△E=h=hc/h为普朗克常数6.63×10-34J.s光的粒子性光由光子组成，具有能量。E越大，越小。E越小，越大。根据E=hc/可知能量小大紫、蓝、青、绿、黄、橙、红可见光波长范围400-760nm波谱分区书上P5光谱分区能量小200nm400nm760nm大波长光谱区域紫外光区可见光区中红外分析方法紫外可见分光光度法25um红外光谱法紫、蓝、青、绿、黄、橙、红2.5um各种可见光的波长

3、颜色波段（nm）紫蓝青蓝青绿黄绿黄橙红400~450450~480480~490490~500500~560560~580580~600600~650650~7602、单色光、复合光与光的互补复合光：由不同波长的单色光按一定比例组成的光，如白光。单色光：具有单一波长的光。若两种光可组成白光，则它们为互补光。光的互补：互补光示意图物质对光的吸收过程（P7）二、溶液对光的选择性吸收物质对光的吸收具有选择性完全吸收完全透过吸收黄色光光谱示意表观现象示意复合光溶液对光的吸收与溶液颜色的关系1）若溶液透明、

4、均匀，人眼看到的溶液颜色是由透射光的波长决定的。2）当入色光为白光（复合光），溶液吸收的光与透射的光互补。光的互补：蓝黄结论：溶液的颜色（透射光）吸收光颜色波段（nm）黄绿黄橙红紫红紫蓝青蓝青紫蓝青蓝青绿黄绿黄橙红400~450450~480480~490490~500500~560560~580580~600600~650650~760溶液颜色与吸收光颜色和波段的关系三、紫外-可见分光光度法的基本原理朗伯—比耳定律（光吸收定律）布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和

5、1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A∝b1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。A∝c二者的结合称为朗伯—比耳定律。T--透过率A--吸光度b--液层厚度（光程长度）c--被测物浓度k--吸光系数吸光度A：表征物质对光吸收程度的量。A=lgI0/It=-lgT=kbc1、朗伯—比耳定律注意k的符号与c的对应关系关于K：K的物理意义：单位厚度、单位浓度溶液对一定波长光的吸光度。与溶液性质、温度和入射光波长有关。K越大，吸收能力越强，灵敏度越高。K

6、与浓度单位之间的变化关系（P9）c的单位K的单位名称符号mol/LL/（mol·cm）摩尔吸光系数εg/LL/（g·cm）质量吸光系数α摩尔吸光系数ε吸光物质的特征常数；在最大吸收波长λmax处，常以εmax表示。在温度和介质条件一定时，ε仅与吸光物质的结构与性质有关，可作为定性鉴定的参数；不随浓度c和光程长度b的改变而改变：ε＝A/bc。ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。吸光能力与测定灵敏度的度量；εmax越大表明该物质的吸光能力越强，测定的灵敏度越

7、高。ε>105：超高灵敏ε=(6～10)×104：灵敏ε<104：不灵敏例：用1,10-二氮菲光度法测定铁，已知Fe2+浓度为0.5584mg/L，比色皿厚度2厘米，在=508nm测得配合物吸光度A=0.22，求。已知MFe=55.84g/mol（1.1×104L.mol-1.cm-1）2、应用朗伯—比耳定律时应注意的问题入射光为平行单色光，且垂直照射；吸光质点之间无相互作用；吸光度具有加和性（A总=A1+A2+…）。吸收曲线（吸收光谱）标准（工作）曲线3、朗伯—比耳定律的应用绘制方法：在c、

8、b固定的情况下,测定某一浓度的标准溶液在各个波长下的吸光度，作A-λ图。吸收曲线吸光度随波长变化的曲线（P6）吸光度AXXX的吸收曲线4005006000.1000.2000.3000.400λ(nm)0.000图例：吸收曲线的绘制练习试验溶液：λ（nm）480490500505510A0.1930.2250.3380.3850.405λ（nm）515520525530540A0.3900.3070.3270.2820.143XXX的吸收曲线实验数据表吸收曲线的特点同一物质不同的物