诊断学-临床常见病原体检测

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时间:2019-05-12

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1、第九章临床常见病原体检测Detectionofclinicalpathogen1、临床各类标本的采集、运送和检查的方法;2、临床常见病原体的种类分布及变迁情况;3、耐药病原体检测的意义。医院感染常见病原体的检查。掌握1、药敏试验的原理和方法2、性传播疾病病原体检查的内容了解熟悉一、临床各类标本的采集运送和检查方法二、病原体耐药性检测三、临床常见病原体检测四、病毒性肝炎检测五、性传播疾病病原体检测六、医院感染常见病原体检测一、临床各类标本的采集运送和检查方法标本采集的基本原则根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位,尽量采集病变明显部位标本。在

2、发病的早期或急性期采集标本,最好在抗生素使用前(如使用过抗生素应在申请单上注明)。采集标本防止污染,并置于无菌容器,加盖密封、立即送检。标本必须贴上标签,与检验申请单同时送检。所有的标本都视为感染性标本,做好安全防护。(一)血液标本的采集血液菌血症、败血症或脓毒血症发热初期发热前2小时发热高峰期成人:10-20婴儿、儿童:524小时内采血2~3次采集频率采血量(ml)采集时间需厌氧同时采集可增加阳性率(二)尿液标本的采集采集量:10-20ml中段尿晨尿注意清洁外生殖器导尿更换新的导尿管穿刺尿考虑厌氧菌感染(三)粪便标本采集自然排便者:挑取脓、血

3、或粘液部分于清洁容器中送检排便困难者:采用直肠拭子采集。怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻,立即接种或将标本置于碱性蛋白胨水或卡-布运送培养液送检。传染性腹泻应连续送检3次。(四)呼吸道标本类型:鼻咽拭子、痰经气管采集的标本。合格痰标本鳞状上皮≤10/LP。上呼吸道存在正常菌群,在采集标本与结果分析时应予考虑!(五)脑脊液与其它无菌体液采集胸水腹水心包液无菌采集是培养成功的首要因素!脑膜炎奈瑟菌肺炎链球菌流感嗜血杆菌不耐冷!(六)眼、耳标本采集采样容器:运送拭子眼部标本:亦可在局部麻醉后取角膜刮屑。耳标本:外耳道疖和中耳道炎用拭子采样,鼓膜穿刺亦可用于

4、新生儿和老年人。(七)泌尿生殖道标本采集女性:外阴糜烂面病灶边缘分泌物、阴道宫颈口分泌物。生殖道疱疹常穿刺抽取疱疹液。盆腔脓肿患者则于直肠子宫凹陷处穿刺取脓液。注:宫颈拭子采样时,用拭子插入宫颈3-4cm,轻轻转动并停留时10-15秒后取出(七)泌尿生殖道标本采集(七)泌尿生殖道标本采集男性:尿道口分泌物:性传播性疾病前列腺液:前列腺炎尿道拭子:在取材前2小时内不应排尿,用男性采样拭子插入尿道3-4cm,轻轻转动并停留时10-15秒后取出(八)创伤、组织和脓肿标本不同部位采集多份标本采集脓液及病灶深部分泌物无菌干燥注射器抽取取脓液后立即排净注射

5、器内空气,针头插入无菌橡皮塞送检。创伤范围大开放性脓肿封闭性脓肿疑为厌氧菌(九)血清用于检测患者特异性抗原抗体病毒肝炎性抗原抗体检测梅毒、艾滋病病毒抗原抗体检测血清学试验标本送检一般要求标本采集后2小时内送达实验室。血培养标本、脑脊液标本延迟送检不应放4℃保存。烈性传染病标本需专人护送。可能贴错条形码这样不对,扭着我腰都酸啦!标本的实验室质量评估标准1、标本信息要全。2、仔细核对标本采集日期和送检日期。延误的标本,一般情况下不接收。通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过24h。而病毒检测的标本可于4℃存放2~3天。3、检查送检容器是否完整,有无

6、破损或渗漏等情况,若有则不予接收。4、标本储存、运送方式不当,不予接收。标本的实验室质量评估标准5、明显被污染的标本不予接收。6、标本量明显不足的标本,不予接收。7、同一天申请做同一实验的重复送检标本(血培养除外),不予接收8、对于烈性传染病标本的采集和运送应严格执行相关规定,要有完善的防护措施,按规定包裹及冷藏,附有详细的采样及送检纪录,由专人护送检查方法(一)直接显微镜检查(二)病原体特异性抗原检查(三)病原体核酸检查(四)病原体的分离培养和鉴定(五)血清学试验(一)直接显微镜检查-不染色标本方法:压滴法、悬滴法、湿片法。意义:是否有生长、

7、活动方式。部分病原体可借此初步诊断,如梅毒螺旋体。(一)直接显微镜检查-染色标本染色标本目的:了解细菌的形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体。方法:革兰染色、墨汁染色、抗酸染色、荧光染色意义:快速诊断的方法之一革兰染色阳性:紫色或紫红色阴性:红色阴性杆菌真菌孢子阳性球菌墨汁染色目的:检查新型隐球菌宽厚荚膜脑脊液标本如不能及时送检,是否可冷藏保存?为什么?(五)脑脊液与其它无菌体液采集胸水腹水心包液无菌采集是培养成功的首要因素!脑膜炎奈瑟菌肺炎链球菌流感嗜血杆菌不耐冷!抗酸染色阳性:菌体呈红色阴性:菌体呈蓝色主要用于分枝杆菌(结核)、奴卡菌鉴别阳性

8、阴性荧光染色用形态学和免疫学相结合的方法可特异性地检测某些病原体的存在阴道加德纳菌沙眼衣原体SARS(severeacuterespiratorysy

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