周一(白酒糟)黄酒糟蛋白酶法提取工艺研究

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1、浙江大学生物系统工程与食品科学学院硕士学位论文黄酒糟蛋白酶法提取工艺研究姓名：姜健美申请学位级别：硕士专业：食品科学指导教师：应铁进20070510浙江大学硕士学位论文摘要本论文针对黄酒糟组织致密，粗纤维含量高的成分特点，从提高蛋白提取率的角度出发，重点针对黄酒糟蛋白的提取工艺迸行了研究，探索了水洗和纤维素酶解条件，比较了碱法提取和酶法提取的黄酒糟蛋白的各种理化性质差异性。主要研究成果包括：(1)以60℃，1：6科液比水洗30min，可以获得蛋白质含量为35．71％的酒糟。根据几组预实验和纤维素酶的最适反应体系，确定纤维素酶的水解条件为：料液比1

2、：10，加酶量28U／g，pH为5，反应时间30min，温度50"C，此条件下纤维素的降解率为37．25％。(2)通过单因素实验和正交实验，确定了碱性蛋白酶水解黄酒糟蛋白的优化工艺条件为：加酶量为2000U／g，料液比1：8，反应pH值10，反应时间3h，温度为50℃，蛋白提取率为74．42％。(3)通过正交实验确定了碱法提取黄酒糟蛋白的两种优化工艺条件：料液比1：8，pH值11，反应时间3h，温度为50'C，或是科液比1：8，pH值1l，反应时间4h，温度为45℃。在这两个条件下进行提取，蛋白质得率约为67％。(4)对碱性蛋白酶提取酒糟蛋白进行

3、二次正交旋转组合回归分析，检验结果保留了x1、X2、X3、)【4、x12、xIX3、X2X3、x2Ⅺ、X32八个显著项，去除其它几个P值>0．1的不显著项，得到回归方程为：Y=74．19+1．07Xl-0．64X2-1．05Xyl-1．95X4-1．24Xx2+0．92X1X3-2．34X2X3+1．51X2X4'-0．51x32(5)通过SDS—PAGE对预消化蛋白的分子量分布进行了分析，发现碱性蛋白酶水解黄酒糟提取得到的产物主要是分子量小于4．1KDa的小肽物质，具有很好的溶解性；碱法制得的黄酒糟蛋白分子量主要分布在20--35kDa范围内，

4、其溶解性很低。两种方法制得的黄酒糟蛋白，发泡性和乳化性不高，其发泡性分别为43％和27％。乳化性分别为50％和13％。关键词：黄酒糟蛋白纤维素酶碱性蛋白酶二次正交旋转回归浙扛大学硕士学位论文AbstractlnordertomakefIlnuseoftheproteinresoul"eeindeewinegmins(RWO)．theextractiontechnologyofproteinfromRWGwasinvestigated．ThenproteinextractedbyhydrolysisWascomparedwiththeonebyal

5、kalisolutioninsomephysicochemicalproperties．ThemainresultsWerelistedbelow：(1)Theoptimumconditionsofwashingwere：temperature60℃，theratioofstufftowaterWas1：6，washing30minutes．Undertheseconditions，concontrationofproteininwashedgrainsWasabout35．71％．Basedonpre-trialsandoptimumcondi

6、tionsforcclinlase，thede-cellulasetechnologyWasconfirmedasfollows：theratioofstufftowaterwas1：10，enzymedosage【El／[s]=28U／g，pH5，reactiontime30minutes，temperature50"C．(2)11lroughsinglefactorexperimentandOrthogonalexperiment,theconditionsforenzymicextractionofproteinwereoptimized：

7、enzymedosage【E】／【s】=2000U／g,theratioofstufftowaterwas1：8，pH10,reactiontime3h，temperature50℃．Undertheseconditions．theproteinrecoveryWas74．42％．(3)Comparedwithextractionbyaicalase，Orthogonalexperimentresultsshowedtheoptimumconditionsforextractionbyalkalisolution：theratioofstufft

8、owaterWas1：&pH11，reactiontime3h,temperature50。Cortheratioofstufftowa