液体碱性蛋白酶稳定性的研究[1]

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1、《食品与发酵工业》
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∃%∀飞∃∀扭&∋(∀)∀#∗+&%∋∃+,−−./(0.液体碱性蛋白酶稳定性的研究王普虞炳钧曹一岚张时良1浙江工业大学轻工业工程系,杭州,2,33,45摘要对影响液体碱性蛋白酶活力稳定性的多种因素进行了考察,优选出提高酶活稳定性的添加剂。通过正交试验,得到添加复合稳定剂的较佳配方,可使。液体碱性蛋白酶稳定性达到67,839一−2标准关键,液体酶,酶的稳定性词碱性蛋白酶,<碱性蛋白酶主要用于洗涤剂工业常以碱性蛋白酶活力测定按照;7=49一83固,。体制剂的形式添加到洗衣粉中以增强其标准测定洗

2、涤去污能力。随着洗涤剂工业的发展,许多三、实验方法,且因,液体洗涤剂亦开始添加蛋白酶其使用鉴于:.>下酶的失活速率较慢为缩短,‘,:,去污效果好而深受用户欢迎仁二,,方便由此试验时间研究中采用升温试验方法即通过。,对液体酶制剂有了新的需求但由于液体酶考察酶液在43>下的失活情况来判断添加,因而。稳定性问题尚未很好解决影响了国内各种稳定剂对提高酶活稳定性的效果液体加酶洗涤剂的生产和开发。为此,中国发结果与讨论酵工业协会技术委员会也把液体浓缩酶的稳,定性改进和提高作为酶制剂行业技术进步、。一影响液体酶稳定性的单因素试验的重点攻

3、关内容之一闭本研究中对影响液0,ΕΑ值对酶活稳定性的影响体碱性蛋白酶稳定性的某些因素进行了考,,ΕΑ值对酶稳定性有较大的影响在过察得出了可使液体酶稳定性达到;7)839、,。酸过碱的条件下蛋白酶极易失活且即使在一−2标准要求的较佳配方,酶最适作用ΕΑ下由于蛋白酶会发生自溶,,作用因而也较易失活故最适作用ΕΑ并不材料与方法.。,是酶最稳定的ΕΑ压习此外工业生产的酶液、,一主要实验材料及仪器中通常还含有各种杂酶通过改变ΕΑ有可<,浓缩酶液1.一9万∗?闹5:=3−地衣芽能使杂酶的活性降低或加快其失活从而利,抱杆菌变异株碱性蛋白

4、酶浓缩液由浙江海于碱性蛋白酶的稳定。试验中考察了在不添宁金潮实业总公司发酵分厂提供。加任何稳定剂的情况下,ΕΑ对液体酶稳定性=:,分光光度计<上海第二分析仪器厂。的影响,结果如图,所示。Δ<,≅ΑΒΧ智能酸度计杭州万达仪器仪由图,可知酶液ΕΑ对酶活保留率有。,0表厂很大的影响酶活力较稳定的ΕΑ范围是.。00<。9.。电热恒温水浴锅北京长安科学仪器厂一其中当ΕΑ为9。时酶活稳定性最0二、分析方法好,酶活保留率达84=Φ。!∀∃∀刀∃∀&!(∀∀∗%∃+0《食品与发酵工业》
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&∋)#+&∋,−−./(+!金属离子对酶活

5、稳定性的影响,8303据报道某些金属离子能与球蛋白的敏次
铃阳李胆遨,感部位6尤其是其肤链的弯曲部位7相结合9303,使有活性的构象不致松开则酶蛋白的整个0433,因。结构更为坚固而增强酶的稳定性同时还,:303能对球蛋白表面的多余负电荷起屏蔽作用消除带电基团的不利影响而利于酶的稳定。!∀#!∀∃·∀%∀·&∋(某些金属离子的存在有时还会对酶起激活作8#9。<、<、?<、:+<、用试验中分别就:;=>龟1?<、,<、∋Α,<、?<图%)(对液体碱性蛋白酶稳定性的影响≅∋ΑΒ.等金属离子的影响进,。∗.,%注初始酶活%∃+

6、,−/01234保温++5行了考察结果如表所示表2不同金属离子对酶活稳定性的影响金:;<=十?压对照添加浓度6Ε32/27∀!%∀!%∀!∀%∀!∀%∀!∀%∀!∀∀%∀!∀∀%∀!∀∀%酶活保留率%Γ%!+Η#!∀%%Η!−∃+!#%Γ−!+Η!#∃+!+#!Η#,!,6Φ7注∗初始酶活%Η%−./Ε2,)(#!&,+−4保温Γ35后,升温至34继续保温%∃5。,1,<、二<、<、、、Ι由表%可知?:龟:;离子对酶多元醇6甘油丙二醇乙二醇多元醇,、、一、的稳定作用比较明显

7、并显示出对酶有激活ϑ等7聚乙二醇6∋研7增稠剂Κ海藻酸钠,、,,6即酶活较初始活力有所上升7.?十作用4等能与水分子结合降低水的活度使酶蛋白,<,、,<、,<∋Α离子的存在对酶的稳定不利=#受水分子的影响减少8Λ并且加人这些物质,,、。+<、<压+<离子的影响则不明显因此小龟:;后酶液粘度增大使酶液体系更加均一稳,,。。1由于?<可提高液体酶的稳定性82!司离子可作为蛋白酶的酶活稳定剂?定故选用得当,影响、、、Ι加人后酶液体系易产生沉淀或混浊外研究中分别对甘油丙二醇乙二醇多元醇,。ϑ、∋子和海藻酸钠进行了单项添加试验,观质

8、量故不宜选用且结!Γ多元醇及增稠剂对酶活稳定性的影响果如表+所示。表+多元醉及增稠剂对酶活稳定性的影响添加剂甘油一ϑ∋曰二乙二醇丙二醇多元醇海藻酸钠对照加量6Φ7+!∀+!∀+!∀Γ!∀%!∀%!∀酶活保留率6Φ7−#!Γ−!,−Η!,#+!#−+!#!,−∀!%注∗初始酶活++∀#,./1Μ2,)(#