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1、PCNA及PTEN在子宫内膜异位症中的表达及意义作者：余繁荣,胡玉红,陈凤云,卢北燕,杨微单位：佳木斯大学附属第一医院妇产科，黑龙江佳木斯154003【关键词】PCNA;PTEN;免疫组织化学;异位内膜;在位内膜子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是妇科常见病和多发病，其发病率有逐渐上升的趋势，其虽是良性病变，但具有恶性病变的生物学行为。近年来，细胞的增殖与凋亡失衡学说已成为人们研究的热点。PCNA是一种细胞周期增生核抗原,能客观的反映细胞的增殖能力,是目前应用比较广泛的细胞增殖标记之一。PTEN是一种抑癌基因,在细
2、胞增殖周期中，主要参与细胞周期的调控，发挥抑制细胞过度增殖和促进凋亡的作用。本实验通过检测PCNA及PTEN在EMS组织中的表达，探讨EMS的发病机制及二者在EMS发展中的相关性。 1资料与方法 1.1一般资料 2007—12～2009—11在佳木斯大学附属第一医院行手术治疗的EMS患者的异位内膜48例，EMS患者的在位内膜36例,通过开腹手术取得异位病灶组织及其在位内膜。取正常的子宫内膜组织30例作为对照内膜。患者年龄28～55岁,平均(32.8±5.6)岁,月经周期规律,无其他内科疾病
3、，术前半年均未使用激素类药物治疗。所有诊断均经术后病理证实,内膜分期依据月经周期的时间结合病理切片确定。 1.2试剂 鼠抗人PCNA单克隆抗体、兔抗人PTEN多克隆抗体、S-P试剂盒、DAB显色剂均购自福州迈新生物技术开发有限公司。 1.3方法 采用免疫组化染色(SP法)：标本经10%甲醛固定，石蜡包埋,5μm厚连续切片,实验步骤严格按试剂盒说明书进行。 1.4结果判定标准 光学显微镜下PCNA和PTEN的染色阳性信号均为细胞内出现棕黄色或棕褐色颗粒,在10×40高倍视野下,随机选10个视野,依阳性细胞
4、数占观察同类细胞数的百分比分为4级。无阳性细胞为阴性(-),阳性细胞数≤50%为弱阳性(+),阳性细胞数>50%为阳性(++),阳性细胞数≥75%为强阳性(+++)。 1.5 统计学方法 SPSS13统计软件分析，采用χ2检验、Fisher’s精确检验及Spearman等级相关分析,P<0.05为有统计学意义。 2结果 2.1PCNA与PTEN在异位子宫内膜与正常内膜中的表达 见表1。PCNA、PTEN主要表达分别定位于子宫内膜细胞的胞核与胞浆中。在子宫内膜异位症的异位内膜，在位
5、内膜及正常内膜的阳性表达依次减弱，分别为93.8%,63.9%，26.7%，两两之间的差异有统计学意义(P<0.05)。PTEN在异位内膜中的阳性表达率明显降低为10.4%，在正常内膜中的阳性表达率为76.7%，在位内膜中的阳性表达介于两者之间为47.2%，有统计学意义(P<0.05)。表1PCNA与PTEN在异位子宫内膜与对照子宫内膜中的表达 *与异位内膜的比较P<0.05**与在位内膜的比较P<0.05. 2.2PCNA与PTEN子宫内膜中增生期及分泌期的表达 见表2。PCNA在子宫内膜的增生期的表
6、达显著高于分泌期的表达，而PTEN在子宫内膜中的表达分泌期高于增生期，两者在EMS患者的异位内膜的增生期及分泌期中的表达均无统计学意义(P>0.05)而在EMS患者的在位内膜及正常内膜的增生期与分泌期中的表达有统计学意义(P<0.05)。表2PCNA与PTEN子宫内膜中增生期及分泌期的表达 3讨论 细胞内的增殖和凋亡过程几乎涉及所有的病理生理过程,二者的失衡可导致细胞异常增殖。EMS的异位内膜的持续存在不仅与其内膜细胞的凋亡能力降低有关，也与异位细胞增殖能力改变有关[1]。PCNA是DNA复制时所必需的调节蛋白，其表
7、达在G1期开始增高,S期达到高峰,G2期和M期明显下降[2]。PCNA的阳性程度可直接反应出DNA复制的活跃程度，反映了细胞的增殖情况。本研究发现，EMS在位内膜PCNA表达百分数明显高于正常内膜，而异位内膜PCNA表达百分数又高于在位内膜。说明EMS的发生与细胞增殖活性增强有关。本实验的结果与Nakayama等[3]研究一致，显示:EMS异位内膜中PCNA阳性细胞数量明显高于在位内膜。PCNA在EMS中的异位内膜的增生期和分泌期的阳性表达率分别为96.4%,90.0%,其差异无统计学意义(P>0.05)，在在位内膜的增生期与
8、分泌期的表达差异有统计学意义(χ2=5.063,P>0.05)，PCNA在正常子宫内膜组织中的增生期和分泌期的阳性表达率分别为44.4%，0%,其差别有统计学意义(P<0.01)，此结果与FujishitaA等[4
