农杆菌介导的基因转化研究进展

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1、第17卷第2期甘肃科学学报Vol.17No.22005年6月JournalofGansuSciencesJun.2005农杆菌介导的基因转化研究进展1,2222陈丽梅,潘俊松,何欢乐,蔡润(1.无锡市第3高级中学,江苏无锡214026;2.上海交通大学农业与生物学院,上海201101)摘要:从农杆菌介导的基因转化机理、应用范围、影响转化频率的主要因素、转化特点等方面论述了近几年的研究进展.关键词:农杆菌;基因转化;进展中图分类号:Q943.2文献标识码:A文章编号:1004-0366(2005)02-0061-03ProgressofGeneTra

2、nsformationMediatedbyAgrobacteria1,2222CHENLi-mei,PANJun-song,HEHuan-le,CAIRun(1.No.3SeniorHighSchool,Wuxi214026,China;2.SchoolofAgricultureandBiology,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai201101,China)Abstract:ThegenetransformationmediatedbyAgrobacteriaisanimportantapproachinpla

3、ntimprovement.Here,recentprogressesaredealtwith,includinggenetransformationmechanism,itsareaofapplication,characteristicsoftransformationandthemajorfactorsinfluencingtheratiooftransformation.Keywords:agrobacteria;genetransformation;progress植物基因转化是将体外定向重组的特定外源基根癌农杆菌含有肿瘤诱导质粒(Ti)

4、,Ti质粒上因导入到受体植物细胞内,使受体植物获得新的遗含有可转移DNA(T-DNA)区,毒性区(Vir区),结传特性.20世纪80年代,已在细胞或组织培养、分合转移区(Con区)和复制起始区(Ori区)4部分.其子生物学研究领域取得一系列重大进展的基础上,中与冠瘿瘤生成有关的是Vir区和T-DNA.T-植物基因转化取得了突飞猛进的进展.在植物基因DNA区在农杆菌侵染植物时可以插入植物基因组工程的发展中,研究最清楚和应用最成功的是农杆中,使其携带的基因在植物中表达.T-DNA两端是菌(Agrobacterium)介导的遗传转化,第一批能表达25bp

5、的重复序列,是转移识别的唯一信号,分为左外源基因的转基因植物是由农杆菌介导转化获得边界和右边界,两个边界序列之间是生长素和细胞的,迄今获得的近200种转基因植物中约80%是由分裂素合成基因以及冠瘿碱合成基因.Vir区用于[1]该菌介导完成的.以下对农杆菌介导遗传转化的编码T-DNA加工,转移及整合的功能蛋白,该毒性机理、方法、应用范围及其影响因素等方面做一简要区含有多个位点,如VirA,VirB,VirC,VirD,VirE,评述.VirF,VirG,VirH等,每个位点包括1到11个开放阅读框.当植物收到伤害时,分泌含有酚类化合物的1农杆菌转化系

6、统的转化机理汁液,这些酚类化合物促使农杆菌向植物受伤部位农杆菌是一类革兰氏阴性土壤杆菌,主要有根移动并附着于植物细胞表面,随后VirA的蛋白感癌农杆菌(A.tumefaciens)和发根农杆菌(A.受植物受伤细胞产生的信号(酚类化合物,糖类等),rhizogenes),它们在自然情况下可以通过伤口侵染自身发生磷酸化.磷酸化的VirA蛋白将磷酸基转植物,导致受伤部位产生冠瘿瘤和毛发根.移到VirG蛋白保守的天冬氨酸残基上,使VirG蛋收稿日期:2004-06-0162甘肃科学学报2005年第2期白活化,从而激活其它vir基因的转录;其中,VirD吸附

7、是农杆菌感染植物细胞的最初步骤.基因产物对T-DNA进行剪切,产生T-DNA单链,3.2植物基因型及外植体类型T-DNA单链与VirD2及VirE2结合成T链复合一般认为,基因型的特异性与细胞的生理状态物,T链复合物被转移到农杆菌外,通过植物细胞壁有关,具体来说与细胞受伤后的生理反应(分泌酚类上由VirB蛋白组成的通道进入植物细胞内,VirD2化合物,增强T-DNA的转移),细胞内源激素水平和VirE2上的核定位信号被转运蛋白识别,经过主(影响细胞的生长,分化),细胞壁的结构(影响细菌动运输过程通过核孔进入细胞核内.在VirD2的帮的吸附)等有关.

8、来源于植物的不同外植体及同一外助下,T-DNA以单或多拷贝的形式随机整合到植植体的不同发育阶段对农杆菌的侵染具有不同的敏物

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