晚期糖基化终产物对人肝细胞株LO2增殖和凋亡的影响

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1、第30卷第2期暨南大学学报(医学版)V01.30No.22009年4月JournalofJinanUniversity(MedicineEdition)Apt.2009晚期糖基化终产物对人肝细胞株LO2增殖和凋亡的影响李海成,何金花,王明,刘誉(暨南大学医学院生物化学教研室,广东广州510632)[摘要]目的:研究晚期糖基化终产物(AGEs)对人正常肝细胞株LO2的作用。方法:以体外培养的L02细胞株为研究对象,采用MTr法测定不同质量浓度(0、3.75、7.5、15、30、60L)AGEs对LO2生长的抑制作用,应

2、用流式细胞仪分析细胞的凋亡情况,RT.PCR分析不同质量浓度AGEs处理LO2后其IL·113,TNF—,HMGB1的基因转录水平变化。结果:当L02细胞在AGEs质量浓度分别为3.75、7.5、l5、3O、60g/L保温48h后,细胞的增殖均受到显著性抑制,且抑制作用具有剂量依赖性。流式细胞仪分析发现AGEs促使LO2发生凋亡,凋亡率亦随AGEs浓度增高而增加。RT.PCR方法检测显示,AGEs使LO2细胞中IL-113,TNF·,HMGBI的基因mRNA的表达水平增高。结论:AGEs可抑制人正常肝细胞株LO2的增

3、殖和诱导其凋亡,并能上调IL-113,TNF—d和HMGB1基因的表达。[关键词]人肝细胞株;晚期糖基化终产物;小牛血清白蛋白;细胞凋亡;毒性[中图分类号]R318.14[文献标识码]A[文章编号]1000—9965(2009)O2—0143—06EfectsofadvancedglycationendproductsonproliferationandapoptosisofhumanhepticalcelllineLO2LIHai—cheng,HEJin—hua,WANGMing,LIUYu(Departmento

4、fBiochemistry,MedicalCollege,JinanUniversity,Guangzhou510632,China)[Abstract]Aim:Toinvestigatethebiologicaleffectsofadvancedglycationendproducts(AGEs)onhumannormalhepticalcelllineL02.Methods:Pr0liferativeinhibitionofLO2byAGEsatdiferentcon—centrations(0,3.75,7.5

5、,l5,30,60g/L)wasaccessedbyusingM,rrassay.Cellapoptosiswasaria—lyzedbyflowcytometry.ThemRNAlevelsofIL—lB,TNF一andHMGB1weredeterminedbyRT.PCR.Results:AGEsat3.75,7.5,15,3O,6OLsignificantlyinhibitedproliferationofLO2afterincubationwithAGEsfor48h.andtl1einhibitionsho

6、weddose—dependentfashionsaswel1.AGEswerealsofoundtobeabletocauseapoptosisinL02cells.FlowcytometryanalysisshowedthatAGEsincreasedthepropor.tionofapoptoticcells,whileRT.PCRdemonstratedthatthemRNAlevelsofIL.113。TNF.ctandHMGB1inLO2ceUswereup—regulatedbyAGEs.Conclus

7、ion:AGEsinhibitproliferation.induceapoptosisandup.regulatethegeneexpressionofIL—lB,TNF一0IandHMGB1inLO2cells.[Keywords]humanhepticalcellline;advancedglycationendproducts;bovineserumalbumin;apoptosis;toxicity[收稿13期]2008一l1一o6[基金项目]广州市科技计划项目(2002J1一C0361);暨南大学引进人才

8、启动基金资助项目(51204004)[作者简介]李海成(1982一),男,硕士研究生,研究方向:多基因疾病的分子生物学研究通讯作者:刘誉,男,教授,硕士生导师,Tel:020—85220256;E·mail:xyuliu07@126.COrn暨南大学学报(医学版)第3O卷生物大分子如蛋白质、脂质与核酸可在没有酶(2)AGEs的体外制备按参考文献

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