实验1 培养基母液的配制

《实验1 培养基母液的配制》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、实验1培养基母液的配制实验目的二、实验用具o．5二尝二二·揣二二二：蕊；乳誓1004、50n尢、25毗)、细口瓶(1阗0址)。药勺、小玻璃棒。三、实验药品按培养基配方准备四、培养基母液的配制…(一)大量元素母液的配制无机盐中大量元素母液，按照培养基配方的尸苎，把各种化合物扩大10倍，用感量为0．01g的扭力天平，分别用50mL苎杯称量，用重蒸馏水溶解。以佃配方为例(表1)。溶解时在每只烧杯中加A30-40n正重蒸馏水，置于酒精灯上，加热使其溶解(注意温度不可过高，甲～70、)。溶解后，在10叩证量筒中，混合定容于1阗0n厶重蒸馏水中。苎混苎定容时，必须最后加入氯化钙，因为氯化钙与

2、磷酸二氢钾，形成磷酸三苎：磷酸钙之类不溶于水的沉淀。将配好的混合液，倒人细口瓶中，贴好标签保存于冰箱中。配制培养基时，每配1咖n止培养基取此液1mn尢。…，(二)微量元素母液的配制无机盐中微量元素母液，按照培养基配方用§的1m倍，用感量为0．0叩1g的电光分析天平，分别用50毗烧杯称量，用苎苎苎水溶解，以肥配方为例(表2)。溶解时，在每只烧杯中加入重蒸痴汞A毫升(切勿加多)。在酒精灯上缓缓加热以增加溶解速度。待全部溶解后，混合定容于100mL容量瓶中保存于冰箱中，配制培养基时，每配制1000毗培养基取此液1mLoKN％~-hN03Ca02'2H20Mg,~)4'7H20KH：P0

3、3化合物名称MnS04．4H20ZnS04．7H20CuS04．5H20~3B03Na2M004．2HzOⅪCOCl2．6H20定容于1000mL重蒸馏水中，最后加入Caf：12·2H20每升培养取此液100吐(三)铁盐母液的配制铁盐不是都需要单独配成母液，如柠檬酸铁，只需和大量元素一起配成母液即可。目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物，必须单独配成母液。这种螯合物使用起来方便，又比较稳定，不易发生沉淀。这种母液的配制方法是：用感量为0．01g扭力天平称取5；57g硫酸亚铁(FeS04．7U20)和7．45g乙二胺四乙酸二钠(Na：—EDTA)，分别用蒸馏水溶解。定

4、容于1000mL蒸馏水中，常温保存。配制培养基时，每配制1000血叔此液5mL。·(四)激素及其他有机物母液的配制激素类、维生素类及用量较小的有机物类，为了使用方便和准确，也应配制成母液。母液的浓度，根据培养基配方的需要量灵活确定。经常使用的母液浓度为0．2-2吨／mL，但也有例外。如肌醇用量较大，可配制成10—20吨／mL的母液浓度。这类物质的称量，必须用感量为0．0001g的电光分析天平。咖5m栅I船1m96431溶解各种有机化合物所用的溶剂不同，必须注意。例如配制生长素类，如2,4-D、萘乙酸、吲哚乙酸等，应先用少量1—2mL95％酒精溶解，然后用重蒸馏水定容；’配制细胞分

5、裂素时，先用少量的mHCl或mNaOH溶解，然后再用重蒸馏水定容；配制叶酸时，应先用少量稀氨水溶解，然后再用重蒸馏水定容。··配制母液必须用重蒸馏水，配制后存放于冰箱中，可保存几个月。当发现母液中出现沉淀或霉团时，则不能继续使用。烟酸甘氨酸肌醇2．4-D1nag／mL2nag／mL20nag／mL1mg／mL1nag／mL0．5mg／mL20g／L8g／L5．8KT0．5nag／mL，表3按MS配方需要量和母液浓度计算各种母液吸取量并填入下表名称rvtsiE~-二：笔1000mL~二二之，二二二，*gcff~素微量元素铁盐维生素B1维生素B6烟酸甘氨酸／llti$2,4-D盯蔗糖

6、琼脂0．4nag／L0．5mg／L0．Smg／L2mg／L100mg／L0．5mg／L1mg／L20g／L8g／L10倍液100倍液5mL／L1mg／mL1mg／mL1mg／mL2mg／mL20mg／mL1rag／mi,0．5mS／吐KN03(硝酸钾)Ca(N03)2·4H20(硝酸钙)KCl(氯化钠)MgS04·7H20(硫酸镁)NaaS04(硫酸钠)NaH2P04·21420(磷酸二氢钠)MnS04·4H20(硫酸锰)Na2M004·2H20(钼酸钠)CuS04·5U20(硫酸铜)Pe(C6U507)·3H20(柠檬酸铁)烟酸甘氨酸盐酸吡哆素(维生素B6)盐酸硫铵素(维生素B

7、1)泛酸钙蔗糖NH4N03(硝酸铵)KN03(硝酸钾)KH2P04(磷酸二氢钾)MgS04·7H20(硫酸镁)CaCl2(氯化钙)xFeS04·7H20(硫酸亚铁)xNq皿U＼(乙二胺四乙酸牛内)MnS04·4H20(硫酸锰)ZnS04．9H20(硫酸锌)HaB03(硼酸)Ⅺ(碘化钾)Na2M004·2H20(钼酸钠)CuS04·5H20(硫酸铜)CoC小6H20(氯化钴)．甘氨酸盐酸硫胺素(维生素B1)盐酸吡哆素(维生素B6)烟酸肌—肌醇蔗糖琼脂0．05·0．05101．257