培养基母液的配制.ppt

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1、任务二培养基母液配制主题二培养基及其制备任务二培养基母液配制知识回顾培养基的成分有哪些？N、P、K微量元素大量元素Ca、Mg、SFe、Mn、Zn、B、Cu、Mo有机添加物糖维生素肌醇氨基酸琼脂或卡拉胶介质和溶媒任务二培养基母液配制中浓度问题及相关计算知识回顾培养基的作用是？相当于土壤，提供离体器官生长所需要的营养、环境和活性物质与土壤相比较，培养基缓冲性能很小，所以要求培养基各成分浓度精确培养基各成分的浓度用什么表示可以既方便又精确地配制培养基呢？质量体积浓度任务二培养基母液配制质量体积浓度：用单位体积（1升或1毫升）溶液中所含的溶质质量数来表示的浓度叫质量-体积浓度，

2、单位常用：g/L或g/mL或mg/mL如：0.9g/L的NaCl溶液——即每一升水中含有0.9克的氯化钠.或微克／毫升表示或ppm、ppb表示。（ppm称为百万分率，lppm就是说百万之一或者是1微克／毫升，ppb称为十亿分率，l ppb就是说十亿分之一或0.001微克／毫升）。表2-1（P20）大量元素20倍浓缩液NH4NO3浓度为33000mg/L表示1L培养基中质量为33000mg，即33g.CuSO4.5H2O0.05mg/L表示1L培养基中质量为0.05mg，即10－5g。培养基配制时先配制母液的必要性？什么是培养基母液？母液：即贮备液，指培养基配制时欲配制液的

3、浓缩液，一般母液配成比所需浓度放大10-100倍。这样不但可以保证各物质成分称量的精准性及配制时的快速移取，而且浓缩液体积小便于低温保藏。母液配制时比所需浓度放大X倍，在配制培养基时按配制培养基的体积（V升）的V/X吸取母液即可。培养基母液配制如何配制母液？培养基母液配制步骤计算称量溶解定容写标签保存按下表进行计算电子天平（百分之一、万分方一）烧杯、药匙蒸馏水、量筒、玻棒、可调式电炉、洗瓶容量瓶（1000ml、500ml、100ml）母液名称、浓缩倍数、配制人员姓名、时间冰箱母液成分浓缩倍数（X）数量（g/L）配制1L培养基吸取母液的毫升数（V/X）母液1（大量元素）NH

4、4NO31016.5100KNO319CaCl.2H2O4.4MgSO4.7H2O3.7KH2PO4.1.7母液2（微量元素）KI1000.08310H3BO40.62MnSO4.4H2O2.23ZnSO4.7H2O0.86Na2.MoO4.2H2O0.025CuSO4.5H2O0.0025CoCl2.6H2O0.0025母液3（铁盐）FeSO4.7H2O1002.7810Na2.EDTA.2H2O3.73母液4（有机物质）肌醇（环已六醇）200205烟酸（维生素B3）0.1盐酸吡哆醇（维生素B6）0.1盐酸硫胺素(维生素B1)0.1甘氨酸0.4培养基母液配制计算母液成分

5、浓缩倍数浓度g/L配制母液毫升数各成分的质量（g）母液1NH4NO31016.51000KNO319CaCl.2H2O4.4MgSO4.7H2O3.7KH2PO4.1.7母液2KI1000.083500H3BO40.62MnSO4.4H2O2.23ZnSO4.7H2O0.86Na2.MoO4.2H2O0.025CuSO4.5H2O0.0025CoCl2.6H2O0.0025母液3（铁盐）FeSO4.7H2O1002.78500Na2.EDTA.2H2O3.73母液4（有机物质）肌醇（环已六醇）20020100烟酸（维生素B3）0.1盐酸吡哆醇（维生素B6）0.1盐酸硫胺素

6、(维生素B1)0.1甘氨酸0.4电子天平的使用方法(1)开机①开机前应检查天平的水平仪，确定天平处于水平状态。天平的水平调整可通过其底部调整螺丝完成。   ②天平接通电源预热至指定时间。(2)校准天平使用前要进行校准工作，校准程序可按说明书进行。用内装校准砝码或外置砝码校准。   当天平较长时间(5d以上)放置不用、天平位置发生移动、测试环境不理想或为获得精确称量等，均应在使用前进行天平的校准工作。(3)称量按下显示屏的开关键，待显示稳定的零点后，将被称量物体置于秤盘上，待数字稳定后，该数字即为被称量物的质量，按动相关的按键可以实现“去皮”，“增重”，“减重”等称量功

7、能。(4)称量结束后，应及时清理秤盘，关好天平门。母液1中CaCl2.2H2O溶解时需加热溶解。母液3FeSO4.7H2O和Na2EDTA需分别加热溶解后混合。加热溶解的成分需冷却至室温后再转移至容量瓶定容。容量瓶的定容方法本课小结培养基母液如何配制？作业：1.培养基配制中所需要的仪器和用具有哪些？2.培养基配制的程序有哪些？3.分组配制培养基母液（母液11000ml；母液2500ml；母液3500ml；母液4100ml。）4.写成实训报告。