八棱丝瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及其生化性质

《八棱丝瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及其生化性质》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、万方数据ISSN1007—7626中国生物化学与分子生物学报2002年10月!!!!：竺!!!!!!!!!兰』!!堡型堑!!堡!!墅!堡些!坠!!竺!!竺!!!!!墼!!!!!!竺：!!!八棱丝瓜籽核糖体失活蛋白的分离纯化及其生化性质林峻凯”，陈明晃D’，谢捷明”，赵蓉”，叶晓明”，石小莉”，王梓壬(“中田科学院福建特质蛄构研究所，蛄杓化学固睿st点蜜验室，福州350002；21福建医科太学，福州350004)摘要通过盐溶液抽提、硫酸铵分级沉淀、CM一52纤维素阳离子交换层析、反相毛细管液相色谱(re

2、—Vel3Se．phusecapillaryliquidchromatography，RP-CLC)等步骤，从八棱丝瓜籽中分离到2种单链核糖体失活蛋白luffaculin一1和luffaculin．2．在SDS．PAGE和IEF上均显示为单一条带，表观分子量均为28kD，其等电点分别为8．86(1uffaeulin一1)和9．05(1uffaculin。2)．实验表明，它们具有RNAN一糖苷酶活性．蛋白质合成抑制活性测试表明，它们对蛋白质合成具较强的抑制作用．体外抑制肿瘤细胞生长活性检测表明，luff

3、aculin一1和luffaoulin一2对人白血病细胞株K562有较强的毒性，尬∞分别为1．1×lO“mol／L和2．0×10～mol／L．八棱丝瓜籽核糖体失活蛋白具有可以用于或构成免疫毒素治疗癌症的应用前景．关键词“加acutangula(八棱丝瓜)，核糖体失活蛋白，分离纯化，RNAN-糖苷酶中图分类号Q512．2AIPurificationandCharacterizationofTWOLuffaculins．Ribosome-inactivatingProteinsfromSeedsofLuf

4、faacutangulaLINJun．kai”，CHENMing-huan91”，XIEJie—min92’，ZHAORon92’，YEXiao．ruing”．SHIXiao-li”．WANGZi—Rnl’(”n蛳lnstiaae可ResearchOntheStructure0，Matter，CMaeseAcademy0，Scienoes，State研laboratory矿StructuralChemistry．Fmhou350002，Ghina；”FujiaaMedicalUniversity．Fm

5、hou350004，Chiva)AbstractTworibosome．inactivatingproteins(RIPs)luffaculin—landluffaculin一2Welqe；solatedandpu6fiedfromtheseedsofn施acutangulabyextractionwithNaClsolution，ammoniumsulfatefractionalprecipitati-m．CM一52celluloseionexehmtgechromatographyandrevcI

6、'8C-phasecapillaryliquidchromatography(RP—CLC)．neresuItsofSDS．PAGEandIEFshowed出atthetwomPswereahomogeneoussingleband．Themo-IeeularIII／tgSofluffaculin—landluffaculln．2wasestimated10beabout28kDbySDS-PAGE．1uffaeulin．1andluffaculin一2werebasicproteinswithp，o

7、f8．86and9．05byIEFanalysis，respectively．N-glyeosidaseactivi—tiesofIuffaculin。Iandluaaeulin．2againstanimal删AwemalSOconfirmed．1uffaculinscouldinhibitgerminalvesiclebroken-down(GVBD)ofoocytesfromBffogargarizansthatshowedstronginhibitoryactivitiesonpro·teinb

8、iosynthesis．ThecylotoxicitiesofIuffaculin．1and1uffaeulin-2OnhumanIeukemlaK562ceHsweredeter—minedwithIC∞of1．1×10一mol／Land2．0×10～mol／L，respectively．ItispromisingthatluffaculinscantreatSOlllecancer,sormaybeusedasallefficientmoietyof