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1、60中国油脂1999年第24卷第6期磷脂的酶法改性技术进展123谷利伟,曹宪荣,赵金兰(11无锡轻工大学食品学院,214036江苏省无锡市惠河路170号;21锦州市六陆油脂有限公司,121007辽宁省锦州市;31福建天香实业股份有限公司,350304福清;第一作者:男,27岁,博士生)摘要:着重论述了磷脂酶A1、A2、C、D的来源、特性和它们在磷脂改性中的应用。关键词:磷脂酶;磷脂;改性磷脂是生物膜的重要构成部分,是某些膜系酶脂酶A1从蛇毒或动物的胰脏中提取,微生物中也的辅基或激活剂。商品磷脂主要从水化油脚中提取,曾发现磷脂酶A1存在,但主要是与细胞膜结合的,大豆
2、毛油的水化油脚中约含磷脂33%,全世界每年难以大规模生产。最近Kim.M等人用新的筛选方大豆磷脂的产量达10万t。天然磷脂是多种成分的法从500株分离自污泥的微生物中发现38株产A混合物,大豆磷脂的主要成分是磷脂酰胆碱(PC),型磷脂酶,其中一株高产磷酶A1。高产菌株的发现磷脂酰乙醇胺(PE)和少量的磷脂酰丝氨酸(PS),磷有望使磷脂酶A[4]1实现商品化生产。脂酰肌醇(PI)和磷脂酸(PA)等。天然磷脂的HLB具有1,3位专一性的脂肪酶也可以选择性地水值小,亲水性差,在水相中不易分散;以乙酰化、羟基解磷脂上Sn21位酰基,这种酶有商品出售,可以代化等化学方法改性
3、可以改善磷脂的乳化性,提高其替磷脂酶A1使用。在水饱和的正己烷体系中以亲水性,但化学方法改性破坏了磷脂的天然结构,安NOVO公司的LipozymeIM20(Rhizomucomiehei)[1]全性不好,不符合某些国家的食品添加剂标准。水解磷脂得到Sn22酰基溶血磷脂的得率为80%。磷脂的生理活性与其脂肪酸的组成和极性末端以Mucojavanicus脂肪酶在混和胶束体系中水解磷的组成密切相关,某些稀有和有特定结构的磷脂有脂,可以接近定量地得到Sn22酰基溶血磷脂酰乙醇很高的药用价值。这些特殊结构的磷脂在自然界中胺和溶血磷脂酰胆碱,但最终产品很难从混和胶束含量极少,
4、难以用化学方法合成,但容易用酶改性法[5]体系中分离出来。Sn22—亚油酰—溶血磷脂酰肌获得;酶改性生成的磷脂保持天然构型,除非生产高醇有杀灭真菌的作用,称为溶真菌素(Lysofungin),[2]纯度的磷脂,一般不需要分离步骤。制法是使用1,3位专一性的Rhizopusarrhizus脂用于磷脂改性的酶有专一性较宽的酯酶和磷酸肪酶在pH615的缓冲液中催化水解大豆磷脂酰肌酯酶,但最有意义的是专一性较强的磷脂酶,包括磷醇,除去Sn21位结合的硬脂酸或棕榈酸,保留Sn22脂酶A1,A2,C,D等。磷脂酶能催化磷脂的各种水解位上的亚油酸生成单一溶血磷脂,再以pH815
5、的50反应,并在一定酰基的受体和供体存在下催化酯化mmol浓度的TAPS缓冲液处理使Sn22位的亚油反应和酯交换反应,能对磷脂的结构进行各种改变酸转移到Sn21位上即生成溶真菌素,最终产品有较或修饰,得到不同结构和同途的磷脂。动、植物体内好的得率。有多种内源性磷脂酶,将磷脂降解为甘二酯、磷酸胆1,3位专一性的脂肪酶在有机溶剂中可以直接碱和磷酸肌醇等活性物质。最初的磷脂酶A1,A2和催化磷脂与脂肪酸或油脂的酯交换反应,生成新的磷脂酶D等是从蛇毒、动物的胰脏中提取,来源有磷脂。多不饱和脂肪酸EPA和DHA等利于脑发育限;微生物磷脂酶的研究发现为磷脂酶的应用提供和心血管
6、疾病,人体从磷脂中消化吸收多不饱和脂了方便的来源。磷脂酶和磷脂的酶法改性是目前一[3]肪酸的速度大于从甘油三酯中吸收的速度;而且结个很活跃的研究领域。合在磷脂中的多不饱和脂肪酸氧化稳定性好。使用1磷脂酶A1和1,3位专一性的脂肪酶酶催化鱼油与磷脂进行酯交换可将多不饱和脂肪酸专一性水解天然磷脂Sn21位酰基的酶称为磷结合到磷脂中:使用115%WöW的LipozymeIM20脂酶A1,目前尚无商品酶制剂生产,少量试剂级磷催化磷脂酰胆碱与含EPA45%的鱼油脂肪酸进行酯交换反应,磷脂与脂肪酸的最适比例是1∶2,正收稿日期:1999—03—17己烷为最佳溶剂,Sn21位上
7、EPA的最终结合率为1999年第24卷第6期中国油脂61[6]1717%。反应混合物难以分离。Sn222DHA或EPA磷脂具有抗炎、抗癌和抑制也可用酶催化溶血磷脂与一定的脂肪酰供体直胆固醇合成等生理活性,自然界含量很少,可以设想[7][9]接酯化,由于Sn22酰基溶血磷脂的Sn22位脂肪用磷脂酶A2催化的方法从天然磷脂合成。在含微酸容易转移到热力学稳定的Sn21位上,反应要在低量水的微乳化体系中使用猪胰磷脂酶A2催化Sn21温条件下进行,避免使用强酸,时间宜短。酰基溶血磷脂酰胆碱与EPA或DHA进行酯化反2磷脂酶A2应,产物得率为30%,在正戊烷或异辛烷中的酯化磷
8、脂酶A2(
