山羊肥大细胞组织化学异质性

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1、128动物医学进展1999年第20卷第3期(总第107期)山羊肥大细胞组织化学异质性高登慧,许乐仁,姚红艳(贵州大学动物科学系,贵阳550025)中图分类号:Q96;S852.16+5;S858.27文献标识码:A文章编号:1007-5038(1999)03-0128-03摘要:用甲苯胺蓝和阿尔辛蓝组织化学细胞(CTMC)之间在组织化学特性、形态学上存在明显差异[4]。但牛和绵羊的MMC和CTMC之方法,对山羊肥大细胞的组织化学特性及[5]形态学结构进行研究。结果表明,山羊组织间的差异性并不明显。迄今为止,对山羊肥大细胞的组织化学与形态学特征未见报道。本文对

2、山采用Carnoy氏液固定,甲苯胺蓝和阿尔辛羊肥大细胞进行了组织化学与形态学的初步分蓝染色对所有的肥大细胞均可获得的染色析研究。反应。但对中性福尔马林固定的组织仅有1材料与方法少量的肥大细胞着染。用Carnoy氏液固定1.1动物组织采集及切片阿尔辛蓝染色,可使更多的粘膜肥大细胞从5头健康成年山羊中取空肠、舌及胸腺。着色。在山羊粘膜肥大细胞和结缔组织肥每种样品分为2份,一份固定于Carnoy氏液(600大细胞之间存在着组织化学及形态学异质mL/L无水乙醇,300mL/L氯仿,100mL/L冰性。醋酸)固定24h,另一份用40mL/L中性缓冲福关键词:肥大细胞;

3、组织化学;异质性;山羊尔马林溶液(NBF)固定1～2d,常规石腊切片(6肥大细胞(MastCell,MC)作为一种重要的Lm),供组织化学染色。机体免疫细胞与人类及动物某些变态反应性疾1.2组织化学染色病、寄生虫感染、某些非特异性炎症及肿瘤性疾Carnoy氏液或NBF液固定的组织切片,经病有密切关系。肥大细胞可分为两个亚群,即粘0.5mol/L盐酸冲洗后,分别采用0.5mol/L盐膜肥大细胞(MMC)和结缔组织肥大细胞酸(pH0.5)配制的5g/L(pH0.5)的甲苯胺蓝(CTMC)。前者主要分布在肠粘膜固有膜及肺脏(Toluidineblue)或1g/L(

4、pH0.5)的阿尔辛蓝内,后者则分布于肠粘膜下结缔组织及其他器官(Alcianblue)染色30min后,再用盐酸配制的2.的结缔组织内。两种亚群的肥大细胞虽然起源相5g/L藏红O(SafraninO)复染30s,吸干,梯度同,来自于骨髓干细胞,其分化成熟过程及其生酒精脱水,二甲苯透明,树胶封片。[1]理功能却有较大差异。肥大细胞异质性的存在1.3计数及统计分析及其在免疫学中的意义已成为肥大细胞生物学[2,3]采用网形接目测微器(1/2mm,武汉光学仪研究的焦点,但仅见于啮齿动物和人类。近年器厂制),每个标本切片随机计数5个视野,每个来,许乐仁等对猪、牛、绵

5、羊等动物肥大细胞的组视野下计数100个小方格(25Lm2)内MC数,计织化学及形态学特征进行了比较系统地研究,发算出单位面积(mm2)肥大细胞平均数,进行统计现猪的粘膜肥大细胞(MMC)和结缔组织肥大分析。收稿日期:1999-05-072结果基金项目:国家自然科学基金资助项目(39270364,39560065)2.1组织化学染色作者简介:高登慧,女,贵州省贵阳市人,贵州大学生物2.1.1用Carnoy氏液和NBF液固定的组织切技术学院动物科学系副教授,主要从事动物组织学与胚胎学教学和科研工作。片中,阿尔辛蓝(AB)染色所有的山羊肥大细胞群体显示出阳性染色反

6、应(表1)。空肠粘膜固有层高登慧等:山羊肥大细胞组织化学异质性129内粘膜肥大细胞(MMC)、肠粘膜下结缔组织及色。TB染色对两种固定液显示出不同的染色反舌内结缔组织肥大细胞(CTMC)以及胸腺髓质内应。从表1可知,用Carnoy液固定组织切片,TB的肥大细胞(TMMC)均染成天蓝色。Carnoy氏染色,MMC、CTMC、TMMC均呈阳性反应,但肥液固定的MMC、CTMC、TMMC染色较深,细胞大细胞淡染,着色程度明显低于AB染色。NBF轮廓清晰,着染力强。NBF固定的肥大细胞则染液固定,TB染色仅有少量MMC染成淡蓝紫色,色较淡,细胞界限不清楚,着染力弱。

7、且细胞轮廓不甚清楚着染力弱,CTMC、TMMC上述两种固定液固定,甲苯胺蓝(TB)染色的均未被染色,呈现阴性反应。组织切片,MMC、CTMC、TMMC均被染成蓝紫表1AB和TB对山羊肥大细胞的染色效果Carnoy,s液NBF液肥大细胞群体TBABTBABMMC+++++++CTMC+++-+TMMC++++-+注:¹+:着染力弱;º++:着染力中等;»+++:着染力强;¼-:未被染色;½AB:阿尔辛蓝;¾TB:甲苯胺蓝;¿MMC:粘膜肥大细胞;ÀCTMC:结缔组织;Á肥大细胞;bkTMMC:胸腺髓质肥大细胞。2.1.2在同种固定液中,两种不同染色,所显示(1

8、07±16)/mm2,(83±12)/mm2,差异不