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《小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养和鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、#249#第21卷第3期医学研究生学报Vo.l21No.32008年3月JournalofMedicalPostgraduatesMar.2008#论著#小鼠肺泡Ò型上皮细胞的分离、培养和鉴定安江洪,钱莘,敖绪军,卓文磊,陈正堂(第三军医大学附属新桥医院解放军肿瘤研究所,重庆400037)摘要:目的:建立一套可靠的小鼠Ò型肺泡上皮细胞(AECÒ)分离、纯化和培养技术,为进一步研究小鼠支气管肺泡干细胞(BASC)的增殖、分化及其在肺腺癌发生中的作用奠定基础。方法:采用分散酶消化小鼠肺组织块,经免疫黏
2、附法纯化小鼠AECÒ,并进行原代培养。用SP-C和CCSP免疫荧光染色和透射电镜对所分离的细胞进行鉴定。结果:该方法所获得细胞产量大、纯度高。AECÒ比例约为(80?2.6)%(n=5),Clara细胞约(6.7?1.2)%(n=5),并能维持培养3~5d。透射电镜观察AECÒ,细胞内可见板层小体。结论:该方法是一种可靠的小鼠AECÒ的分离、纯化和培养技术,可满足一般的实验要求。关键词:肺泡Ò型上皮细胞;原代细胞培养;小鼠支气管肺泡干细胞中图分类号:Q813.1文献标识码:A文章编号:1008-8
3、199(2008)03-0249-03*Isolation,purificationandprimarycultureofTypeÒalveolarepithelialcellsfromthemouseANJiang-hong,QIANShen,AOXu-jun,ZHUOWen-le,iCHENZheng-tang(PLAInstituteofCancerResearch,XinqiaoHospital,theThirdMilitaryMedicalUniversity,PLA,Chongqing
4、400037,China)Abstract:Objective:Todevelopareliablemethodfortheisolation,purificationandprimarycultureofTypeÒalveolarepithelialcells(AECÒ)fromthemouselung,andtopreparethegroundforfurtherstudiesontheproliferationanddifferentiationofbronchiolar-alveolars
5、temcells(BASC)andtheirroleintheinitiationoflungadenocarcinoma.Methods:Thelungtissueofthemousewasdigestedwithdis-pase,AECÒisolatedandpurifiedbyimmuno-adherence,andthentheprimarilyculturedAECÒident-ifiedbySP-CandCCSPstainingandelectronmicrography.Result
6、s:ExcellentyieldsofhighlypurifiedculturableAECÒwereobtained,withAECÒandclaracellsaccountingfor(80?2.6)%(n=5)and(6.7?1.2)%(n=5)respectivelyandremainingthusfor3-5daysintheconditionedmedium.Lame-llarbodieswererevealedinthepurifiedAECÒbyultrastructuralexa
7、minationundertheelectronmicro-scope.Conclusion:Thismethodisreliablefortheisolation,purificationandprimarycultureofAECÒfromthemouselungandcanservetheneedsinthestudyofthebiologicalfunctionofAECÒinvitro.*收稿日期:2007-06-25;修订日期:2007-08-09基金项目:国家自然科学基金资助项目(批
8、准号:N030672076)作者简介:安江洪(1974-),男,贵州印江人,主治医师,医学博士研究生,主要从事肿瘤学专业。通讯作者:陈正堂(1957-),男,安徽安庆人,主任医师,教授,医学博士,博士研究生导师,从事肿瘤学专业。#250#医学研究生学报2008年3月第21卷Keywords:TypeÒalveolarepithelialcel;lPrimaryculture;Bronchiolar-alveolarstemcell后吸管充分吹打使细胞脱落,不锈钢筛网过滤细胞0引言悬
