小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定

《小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第!"卷第!期武汉大学学报!医学版":.,;!"<.;!!!##$年%月&’()*+,-./01+,.23/4+151)6’07)89&+0#!##$小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定尹美珍!李世普!袁!琳!戴红莲武汉理工大学生物材料与工程研究中心!武汉!A%##"#摘要!目的$建立一种简便的巨噬细胞分离与培养方法#为骨替代材料降解产物的研究提供巨噬细胞%方法$以无血清Y&[&培养液灌洗小鼠腹腔#=#M)1后吸出灌洗液于含=#^胎牛血清的Y&[&培养液中培养%采用Z[染色和倒置显微镜观察细胞形态&酸性磷酸酶及非特异性酯酶染色测定细胞内酶的表达&墨汁颗粒吞噬实验检测其吞噬功能%结果$获

2、得高纯度的巨噬细胞#具有巨噬细胞的形态特征#良好的吞噬功能#含水解酶类%结论$本法是一种简易而实用的体外分离培养腹腔巨噬细胞的方法%关键词!巨噬细胞&分离培养&鉴定&小鼠中图分类号!b?=%;=_=!文献标识码!E!文章编号!=$"=@??H!!!##$"#!@#!#%@#%4’5.0.)1*3#J8,)1H.)1*3.32:2’3)1&1(.)1*3*&7*8-’+’01)*3’.,7.(0*5/.A’-=:>7’1]/’3#9:4/158#=;">913#X":E*3A,1.3D-’A#3-1).2)%#9-).,)43G4/-4##9-4/H#,#)91*?#4%#9#56*

3、)474-8#9,-%+’(N#1*4’.’/+#56*)4:;<<=<#?*-4)"F-)0.()

4、Q9M.0N4.,.O)*+,.Q7’06+8).1#’1(.*’,,/,+0’1U9M’+1(N4+O.*98.7)7;I’-8,)-$K4’.Q8+)1’(*’,,7S’0’4)O4,9N/0)2)’(M+*0.N4+O’7S)84M.0N4.,.O)**4+0+*8’0)78)*7.284’M+*0.N4+O’)1.0O+1)7M#2+6./0+Q,’N4+O.*98.7)7#+*)(N4.7N4+8+7’!EGC"+1($@+*’8)*+*)(1+N484.,’78’0+7’!$@E<["+*8)6)89;J*3(,8-1*3$K4)7S+7+7)MN,’+1(N0+OM+

5、8)*M’84.(2.07’N@+0+8).1+1(*/,8)6+8).1.2M./7’N’0)8.1’+,M+*0.N4+O’7;!’#B*02-!&+*0.N4+O’&F’N+0+8).1&V(’18)2)*+8).1&&./7’!!巨噬细胞是机体的重要防御细胞%大量研究已经济的小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养方法%证明巨噬细胞具有吞噬与清除异物及分泌生物活性物质等广泛的生物学作用%为了深入研究巨噬细胞K!材料与方法对仿生全降解G+@C材料降解后的无机产物参与生K;K!主要试剂和仪器!Y&[&培养基!X)Q*."#胎命过程中有机物的合成作用#本实验对已有腹腔巨牛血清!Z9*.,.1"

6、#二氧化碳培养箱!美国R.0M+噬细胞分离培养方法加以改良#建立了一种简便而G.;"#倒置显微镜及照相系统!W,9MN/7Vh@H#"%课题来源$湖北省重大科技攻关课题!编号$!##!EB#A$"作者简介$尹美珍#女#=>$>@#工学博士生#主要从事生物材料的研究通讯作者$李世普#男#=>A$@#教授#主要从事生物材料的研究+!#A+武汉大学学报!医学版"第!"卷K;L!小鼠腹腔巨噬细胞的分离#培养!脱颈处死空泡&核大为卵圆形#肾形#马蹄形或不规则形$偏$@?周龄昆明种小鼠!中国预防医学科学院提供"$居于细胞的一端$着色较深!插页A$图!"&"H^酒精浸泡HM)1后$倒立小鼠并腹腔

7、注入无血L;M!培养细胞的鉴定!将培养"天的细胞做%4清Y&[&培养液HM,$仰卧平放并轻揉小鼠腹部的吞噬试验!插页A$图%"$发现培养细胞对墨汁颗!@%M)1$静置H@"M)1后$无菌条件下打开小鼠腹粒有很强的吞噬作用$吞噬率为>H;$?^&酸性磷酸腔$观察肠管变扁且腹腔液为淡黄色时$用注射器抽酶及非特异性酯酶的阳性率也很高$分别为?>;$$^取腹腔液约A@A;HM,$离心洗涤后显微镜下计数$常和?H;=>^!插页A$图A$图H"&规Y&[&培养液!含=#^胎牛血清