食品安全快速检测技术

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1、《食品安全快速检测技术》蔬菜上农药残毒快速检测方法—生化法1、范围本方法规定了蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测方法。本方法适用于叶菜、菜花和部分果菜、菜豆等蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的检测。2、原理根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制乙酰胆碱酶的活性原理，如果蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低，酶的活性就不被抑制，实验中加入的底物就被酶水解或少部分水解，水解产物与加入的显色剂反应产生颜色。反之，如果蔬菜的提取液中含有一定量的有机磷或氨基甲酸酯类农药，酶的活性就被抑制，实验中加入的底物就不能被酶水解，从而不显色或颜色变化

2、很小，用分光光度计测定吸光值随时间的变化，计算出抑制率，就可以判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。3、试剂本方法全部使用蒸馏水，试剂为分析纯。3.1专用酶（胆碱酯酶），每瓶用8mL缓冲液（3.4）溶解。（酶粉冷冻保存）用时溶解，溶解后分装成3—4个小瓶，暂时不用的酶保存在冰箱的冷冻层内，使用时解冻，解冻后的酶贮存在0℃—5℃冰箱的冷藏层内，拿出冰箱使用时，装酶的容器内放一些冰块，以保障酶一直在低温状态下，解冻的酶一周内用完。如用后还需重新冷冻，反复解冻不要超过2次，否则会影响酶的活性。3.2底物（碘化硫代乙酰胆碱），用10mL缓冲液（3.4）溶解。

3、（0℃—5℃下保存）3.3显色剂（二硫代二硝基苯甲酸），用10ml缓冲液（3.4）溶解。（0℃—5℃下保存）3.4缓冲液（磷酸氢二钠+磷酸二氢钾，pH=8），用1000mL蒸馏水溶解。（室温保存）4、仪器与设备4.1分光光度计，TU-1800；4.2天子天平，感量0.01g，JY3002；4.3恒温水浴祸；4.4往复振荡器；4.5移液枪，20—100μL；4.6比色池，1cm；4.7具塞锥形瓶，100mL；4.8具塞试管，5mL；4.9量筒，50mL。5、操作步骤5.1样品制备将蔬菜用四分法取可食部分，切碎，混匀。5.2提取步骤将混匀的蔬菜称取2g（非叶菜类取4

4、g），精确至0.01g，放入100mL具塞锥形瓶（4.7）中，加入20mL，缓冲液(3.4)，振荡2min，，倒出提取液，静止3min—5min，于5mL具塞试管中加入50μL的酶（3.1）、3mL样品提取液和50μL显色剂（3.3），盖好试管塞，在微型振荡器上振荡0.5min，放入已调好温度（37℃—38℃）的水浴锅内，恒温15min后拿出，加入50μL底物（3.2），在微型振荡器上振荡0.5min，混匀后倒入比色池中，于412nm波长下比色。三分钟后再比色一遍，记录两次比色的数据，同时做空白试验。6结果计算Ac—AsX=Ac式中X——抑制率，%Ac——空白三

5、分钟后与三分钟前吸光值之差。As——样本三分钟后与三分钟前吸光值之差。7检测结果判断标准抑制率≥50%—70%时，蔬菜上可能存在有机磷或氨基甲酸酯类农药残留。抑制率≥70%时，蔬菜中肯定存在有机磷或氨基84甲酸酯类农药残留。8、注意事项8.1空白三分钟前后吸光值差值在0.4—0.8之间为好，如果空白低于0.4，可适当加大酶的使用量。8.2保证检测结果的准确，一定要注意操作的规范化。8.3如果抑制率出现负值，造成的主要原因是操作中出现的系统误差，如操作人员操作不熟练。另外，同一种蔬菜，由于不同次重复取样部位不同，较小的负值误差(-10%以下)，是在允许范围内，这种

6、情况下样本无农药检出。我国食品安全检测技术的现状及进展据了解，美国FDA的多残留检测方法可同时检测食品中360多种农药残留物，德国的方法可检测325种，加拿大的方法可检测251种，而我国最新研制的仪器，却只能检测180种农药残留。技术手段的不足，直接导致了对一些问题食品检验的困难。例如，食用河豚鱼中毒死亡人数占食物中毒总死亡人数的33%，但我国目前并没有检验河豚鱼毒素TTX的快速检测方法。食品的危险性评估是世界卫生组织（WTO）和国际食品法典委员会（CAC）用于制定食品安全法律、标准和评估食品安全技术措施的重要手段，但我国目前还没有一套健全的危险性评估体系--技

7、术装备不足和食品安全“家底不清”，严重制约了我国的食品安全。而食品安全中的技术作用越来越受到社会的关注。食品安全离不开科技中国疾病预防控制中心食品营养与安全所教授吴永宁告诉记者，法律法规是对食品安全进行监管，对制售不安全食品行为进行制裁的手段。那么如何知道一种食品是否安全，不安全食品的危害在哪里，等等，这些问题是法律所解决不了的，它有赖于科技手段的应用。在保证食品安全方面，科技是不可或缺的。发现食品中的不安全因素，然后再去了解什么情况下它会对人体造成危害，应采取什么有效措施去控制它，这都需要借助科技手段来完成。谈食品安全是不能离开科技水平的。吴永宁说，食品安全是

8、和经济发展相一致的。首先