基于强阳离子交换色谱分离的磷酸化肽段富集策略

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1、!""#年$月色谱&’()!%*’)!!"#$%!""#!"#$%&%’()*$+,(-!"*(.+/(0*+1"2&’()&’’#基于强阳离子交换色谱分离的磷酸化肽段富集策略&,!&&&&&&隋少卉,-王京兰,-卢-庄,-蔡-耘,-张养军,-蔚文峰,-钱小红(&)蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京&"!!"%;!)防化指挥工程学院,北京&"!!"()摘要:为了在短时间内获得相对含量高的磷酸化肽段,以标准磷酸化蛋白质为模型对强阳离子交换色谱(:7B)分离磷酸化肽段体系的缓冲溶液和梯度设置进行了研

2、究,并用酵母酶切肽段混合物考察了该路线在较复杂的样品中的应用。实验结果表明优化后的体系能够在$"-.4内分离出磷酸肽段,而且非磷酸化肽段的干扰很少,这样便相对提高了磷酸化肽段在质谱仪中的响应强度,重要的是该体系可以对复杂样品进行很好的分离。这说明:7B用于规模化磷酸化肽段富集的策略是可行的。本研究为磷酸化蛋白质组学规模化分析提供了实用技术。关键词:磷酸化;位点;强阳离子交换色谱;富集;蛋白质组学中图分类号:C%(#--文献标识码:D--文章编号:&"""+#*&$(!""#)"!+"&’(+"(--栏目类别:研究论文!"#$%"#%&%’()&

3、&*+(,"-&*’$’+.’&/01.$&)#*$’+#*/,.’(#*&2,".*/&,"+#-.’#/+.%"0&,!&&&:EF:%"’%A.,GD*HI.4J("4,KEL%A"4J,7DFMA4,&&&LND*HM"4J@A4,MEG24O24J,PFD*B."’%’4J(!!"#$#%&%’($)*+$#*+’*,-+*#%*./01,2%/3/45-+*#%*.%6%1%$+078%4#%+,2%/3/45941#/#:#%*,6$;/$#/*4<%;/0/4%,2%/3/45!"##"$,87/4$;#!941#/#:#%*,

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