HPV的检测及其临床应用

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1、HPV的检测及其临床应用张萌HPV与宫颈癌的相关性年轻性活跃的女性HPV感染率最高,感染高峰年龄为18~28岁多属于一过性感染,通过自身免疫将HPV消灭只有持续感染HPV的妇女,才成为子宫颈癌高发人群HPV感染到发展成为子宫颈癌需要9~25年时间30%发展成为CIN1,10%发展成为CIN2,10%进一步发展成为CIN3,1%发展成为子宫颈癌HPV结构与亚型共价双链环状DNA病毒,电镜下观察外形呈20面体对称型3个部分组成:早期区(E区),晚期区(L区)及上游调控区(非编码区)按HPV在诱发生殖道恶性肿瘤中的危险性

2、不同分为高危型和低危型两组。高危型:呈持续性,不易自然缓解,CIN2、CIN3及宫颈癌;低危型:自然缓解率较高,湿疣病变和CIN1国外:16和18型感染为主我国:16,58型为主临床常用的HPV检测方法病理学检查细胞学检查免疫组化检测聚合酶链反应(PCR)技术DNA芯片分型检测杂交捕获DNA分析病理学检查鳞状上皮疣状乳头状增生表皮角化不全棘层不规则增厚基底层增生上皮脚延长中表层出现灶状分布的挖空细胞等。细胞学检查挖空细胞、角化不良及湿疣外底层细胞细胞学诊断HPV感染敏感性较差免疫组化检测检测HPV的衣壳抗原来进一步

3、明确HPV感染所得阳性反应定位明确,判断可靠必须在HPV-DNA复制成熟后才有衣壳装备敏感性较低聚合酶链反应(PCR)技术设计与HPV-DNA互补的一对特异性核苷酸引物,以HPV-DNA为模板以指数增长的速率进行体外扩增敏感性最高,可对HPV进行分型,测定病毒载量,发现新基因型,对基因进行序列分析缺点为样品间易交叉污染导致假阳性DNA芯片分型检测一种微量分析技术,以玻片作为DNA载体,固定了22型HPV-DNA探针(包括15种高危型HPV及7种低危型HPV)及一个β球蛋白的对照探针可同时对HPV进行检测及分型可对多

4、个型别的混合感染同时进行监控杂交捕获DNA分析标本中的HPV-DNA与液相中的RNA探针结合,形成特异性的RNA-DNA杂交体,被微孔板内的特异抗体所捕获,然后被所加的发光底物检测,其发光的强度与标本中的DNA量成比例,因而可对HPV进行半定量检测效率高,适于大量人群检测,临床上操作简便高危型HPV检测的临床应用宫颈癌及癌前病变筛查ASC-US的分流管理宫颈病变治疗后的随访宫颈癌及癌前病变筛查高危型HPV-DNA检测可用于30岁以上妇女的宫颈癌筛查。若细胞学和高危型HPV-DNA均阴性,进展为CIN3的危险性极低,

5、可延长筛查时间的间隔。ASC-US的分流管理对于意义不明的非典型鳞状细胞(ASC-US)美国ASCCP推荐以下3种进一步评估的方法:①立即阴道镜检查;②重复细胞学检查;③高危型HPV-DNA(hc22)分流管理宫颈病变治疗后的随访在行锥切术前及子宫切除术时均应用hc-2系统进行高危型HPV-DNA检测小结持续性高危型HPV感染是CIN进展的必要条件HPV-DNA的病毒载量与HPV的持续感染及宫颈病变进展也密切相关高危型HPV-DNA以及病毒载量的检测对宫颈癌的筛查和防治都有着非常重要的意义谢谢!

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