肾上腺色腙使用石墨烯量子点荧光探针的测定

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1、肾上腺色腙使用石墨烯量子点荧光探针的测定本文档格式为WORD,感谢你的阅读。最新最全的学术论文期刊文献年终总结年终报告工作总结个人总结述职报告实习报告单位总结演讲稿肾上腺色腙使用石墨烯量子点荧光探针的测定  近年来,碳纳米发光材料的低毒性和强荧光性质受到了越来越密切的关注,以下是关于肾上腺色腙使用石墨烯量子点荧光探针研究的文献。  1引言  石墨烯量子点作为碳量子点的一种,一般尺寸小于10nm,因此比一维的石墨烯量子带和二维的石墨烯量子片表现出更强的量子限域效应和边界效应[3],在生物、医药和材料等方面展现出更加诱人的应用前景[4-5].石墨烯量子点的合成方法研究颇多,如电化学氧化法[6

2、]、机械剥离法、氧化石墨还原法、化学气相沉淀法、电弧法[7]、有机合成等。目前量子点在金属离子的识别和检测领域研究较多,但在药物分子分析领域的研究还很少。  肾上腺色腙又称安络血或卡巴克络(Carba-zochrome,CBZC),临床主要用于脑、肺、肾、肠毛细管损伤出血及血小板减少症状[8].目前肾上腺色腙的测定方法主要有近红外光谱法[9]、分光光度法[10]、高效液相色谱法[11]、化学发光法[12]及荧光分析方法[13]等。  本文采用自上而下的方法高温裂解柠檬酸合成了具有优良荧光特性的GQDs,并对其进行修饰,发现GQDs发出很强的蓝色荧光。肾上腺色腙对GQDs荧光强度有明显的猝

3、灭作用,据此建立了一种测定肾上腺色腙的新方法,并对其作用机理进行了研究。  2实验  2.1仪器及试剂  2.1.1仪器  F-4500型荧光分光光度计(日本日立公司);8453型紫外-可见分光光度计(美国安捷伦公司);FLSP920瞬态稳态荧光光谱仪(英国爱丁堡公司);IRPrestige-21型傅里叶变换红外光谱仪(日本Shimaozu公司).  2.1.2试剂  浓度为1.0×10-3mol/LCBZC标准溶液;浓度为10mg/mL的NaOH溶液;Tris-HCl缓冲液(pH=7.40);柠檬酸。所用试剂均为分析纯,水为UP超纯水。  CBZC标准溶液的配制:准确称取肾上腺色腙标准

4、品(中国药品生物制品检定所)0.0236g,用蒸馏水溶解并定容至100mL,放置冰箱中待用。  2.2实验方法  2.2.1GQDs的合成  在文献[1]的基础上,另外引入了PEG进行修饰,采用自上而下的方法裂解柠檬酸合成GQDs.具体方法为:准确称取1.0000g柠檬酸和0.5000gPEG2000放入小烧杯中,用电热套直接加热,柠檬酸开始裂解。5min后,柠檬酸熔解为无色液体;继续加热,溶液由无色变为亮黄色。  将溶液转移到30.00mL的NaOH溶液中(10mg/mL),连续搅拌,反应完全后转移、稀释至250mL容量瓶中,放置在冰箱里待用。GQDs的浓度以柠檬酸的量计算。该合成方法

5、具有简单、快速的优点。  2.2.2荧光光谱图的测定  移取3.00mLGQDs于25mL比色管中,加入3.00mLTris-HCl缓冲溶液,再加入适量肾上腺色腙溶液,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。室温下反应20min后,于F-4500型荧光分光光度计测定荧光光谱图,测定体系荧光强度(F)和试剂空白(F0),计算ΔF和CBZC浓度之间的关系。激发波长和发射波长为λex/λem=367/462nm,狭缝宽度均为5nm. 3结果与讨论  3.1GQDs的特性  3.1.1GQDs的荧光光谱、紫外-可见吸收光谱和荧光寿命图1为GQDs的荧光光谱和紫外-可见吸收谱。从图中可看出修饰前后量子点的最大吸

6、收波长并无变化。在462nm处出现最大荧光发射峰,与文献报道的GQDs的荧光特性也相吻合;但修饰后的量子点荧光强度明显增大,荧光量子产率增加,且发射峰的半峰宽较窄,说明该量子点单一、均匀。  我们于FLSP920瞬态稳态荧光光谱仪上测定了该GQDs的荧光衰减曲线,拟合结果如图2所示。根据加权平均计算法[14],得出GQDs的荧光寿命为1.87ns,荧光寿命较短,据推测可能是激子(电子与空穴对)的重组合发光[15].χ2接近于1,说明实验数据在可信范围内。  3.1.2GQDs的结构表征  量子点的光致发光是其非常重要的特性之一。量子点具有宽而连续的激发谱,可实现一元激发和多元激发,为实现

7、生物分子的多组分同时检测提供了可能。目前很多实验发现,量子点的发射峰强度和位置与激发波长有关。本实验于F-4500型荧光分光光度计上检测不同激发波长下的GQDs荧光强度,所有测试均在298K下进行。改变激发波长,发射峰位置和强度也随之发生变化,如图3所示。当激发波长由340nm增加到400nm时,发射波长由444nm红移至488nm,同时荧光强度先增大后减小。当激发波长为367nm时,荧光强度达到最大。  图4为GQDs的红外光谱图

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