总蛋白(TP) 双缩脲终点法

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1、项目总蛋白（TP）方法双缩脲终点法目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3.试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4.仪器5.操作6.计算7.操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8.参考值9.临床意义附录A:参数1.检测原理蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的，肽键在碱性溶液中，能与铜离子作用产生紫红色络合物，在540nm有吸收峰，并与蛋白含量成正比。通过与同样处理的标准蛋白比较可求出血

2、清总蛋白含量。碱性蛋白质+铜离子------------紫红色络合物2．标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从

3、肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂：血浆使用0.1mg/ml肝素或EDTANa2（1.8mg/mL）作为抗凝剂。2.4标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。3．试剂3.1试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TP试剂盒，为液体单一试剂，各组分如下：组成浓度氢氧化钠200mmol/L硫酸铜12mmol/L酒石酸钾钠64mmol/L碘化钾6.0

4、mmol/L标准液：70g/L总蛋白3.2校准血清：使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为浅兰色，当试剂变色，按照试剂失效处理。多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可

5、冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。试剂盒配备的水标准液在2-8℃储存至标签所示失效日期，开瓶后2-8℃储存避免污染，可稳定2个月。4．仪器KONELAB30型号仪器。性能：波长540nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5．操作样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6．计算A测定C=————×CoA标准式中：c——测定总蛋白浓度，g/L；A测定——标本管吸光度；A标准——标准管吸光度；CO—

6、—校准血清总蛋白浓度，g/L；7．操作性能7.1精密度：批内CV≤2.8%，批间CV≤3.3%。7.2准确度：检测结果的相对不准确度≤±10%。7.3灵敏度：本试剂最低检测限为0.7g/L。7.4可报告范围：血清与试剂用量之比为1:50时，测定上限为100.0g/L。7.5特异性：测量值在给定值的95%-105％范围内。7.6干扰：内源性干扰物为Hb1000mg/ml、TG2000mg/ml、BIL25mg/ml、VitC300mg/ml对测试结果无明显影响。8．参考值60.0～85.0g/L。9．临床意义总

7、蛋白测定试剂盒用于定量测定人体血清中总蛋白的含量。蛋白质是血清的主要成分，分白蛋白和球蛋白两类，在机体中具有重要的生理功能。蛋白质对于维持渗透压及保持水份平衡极为重要，并可维持血液的酸碱度。血清总蛋白增加常见于严重腹泻、呕吐、肾上腺皮质功能减退；营养不良、消耗增加和肝脏疾病等亦可导致总蛋白水平下降。附录A:参数