产气荚膜梭状芽孢杆菌检验

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1、第十节产气荚膜梭菌检验食品卫生微生物学检验产气荚膜梭菌检验MicrobiologicalexaminationoffoodhygieneExaminationofClostridiumperfringens魏氏梭菌目录1、概述2、生物学特性（菌体形态学特征、培养特性和抵抗力）3、毒素与分型4、培养基和试剂5、检验程序6、说明www.amozeshonline.com/.../09/uuoeoeoeuoeuuu.html1、概述产气荚膜梭状芽孢杆菌又称魏/卫氏梭菌分布：自然界广泛存在(创伤感染）。易污染食品：动物性食品原料食品加热后未及时冷却，所含耐高温而残余

2、的产气荚膜梭菌芽孢会迅速发芽，大量繁殖，菌数可达数10万/g，食用前又未加热，则有可能引起产气荚膜梭菌食物中毒。食品中产气荚膜梭菌检验的主要目标是检验食品被该菌污染的程度，其重点项目是活菌数测定及证实试验。2、生物学特性1)形态与染色G+(陈旧培养物阴性菌）无鞭毛可形成荚膜和芽胞的大杆菌大小：为(1－2)μmX(2－10)μm。芽孢：卵圆形位于菌体中央或近端，直径大于菌体的直径，有的菌株难形成芽胞。荚膜：在人和动物活体组织内，或在含血清的培养基内生长时可形成荚膜。Clostridiumperfringenswww.biol.vt.edu/research/m

3、icimm/index.phphttp://oregonstate.edu/research/Images/SarkerSlide.jpghttp://course.tjac.edu.cn/shouyiweishengwu/图片资料/产气荚膜梭菌.jpgwww.uni-ulm.de/.../Diagnostik/Erreger/c_keim.htm2)培养特性*不严格的厌氧*普通营养琼脂上可生长，若加入葡萄糖、血液则生长更好。*适宜生长温度为37—47℃。*生长和繁殖速度极快，在适宜条件下8min/代。*在45℃高温下可进行快速分离纯培养，每培养3—4h传种

4、1次，较易分离纯化。ClostridiumPerfringensToxindtirp.dtra.mil/.../agents/AgentsBW_toxins.asp肝片肉汤培养：－－大量产气，培养5h-6h变浑浊；牛奶培养基中生长：－－能够分解乳糖产酸，将酪蛋白凝固产生大量气体，冲散酪蛋白，使其成海绵状。庖肉培养基中培养：－－产生大量气体，肉渣或肉块略带粉红，但不消化。普通琼脂平板上培养：－－15h－24h形成S型菌落，在营养不足或琼脂浓度高的平板上可形成锯齿状带放射条纹的R型菌落。www.msu.edu/course/fsc/441/resulex10.h

5、tmlat45C，ClostridiumperfringensisvirtuallytheonlyorganismthatwillproducetheStormyFermentation。鲜血琼脂平板生长：－－菌落周围出现双层溶血环，内层溶血完全，外层溶血不完全，好似靶状，菌落本身略带灰黄色至浅灰褐色，与空气接触30min后，有时可能逐渐变为灰绿色、甚至鲜绿色，这是本菌的特征之一。ClostridiumperfringensbacteriaonabloodagarplateCourtesyGlennSonger,TheUniversity.ofArizona

6、CollegeofAgricultureandLifeSciences.：www.genomenewsnetwork.org/articles/01_02/Clos...Clostridiumperfringensshowsdouble-zonehemolysisonbloodagar.Notethesmallareaofbetahemolysis(completelysisofredbloodcells)surroundedbyalargerzoneofalphahemolysis(partialhemolysis).Theplateissittingon

7、ablacklabbenchwww.cat.cc.md.us/.../labmanua/lab16/bloodcp.htmlClostridiumperfringensGrowingonBloodAgarwww.genomenewsnetwork.org/articles/01_02/Clos...www.cat.cc.md.us/.../labmanua/lab16/bloodcp.html菌落周围出现乳光浑浊带，此反应能被本菌的α抗毒素抑制。*由于发酵乳糖，菌落周围的培养基颜色发生变化*本菌不消化牛奶，不分解游离脂肪，菌落周围不出现透明环及虹彩层（肉毒梭

8、菌可形成）。www.sat.affrc.go.jp/