瓦里安系列10-瓦里安制备色谱系统概述

《瓦里安系列10-瓦里安制备色谱系统概述》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、美国瓦里安公司制备色谱系统概述制备液相的重要作用临床前/临床试验g产品量Kg化学合成/结构鉴定/活性测试mg瓦里安液相色谱系统具有30年生产从分析、少量制备到生产规模制备液相经验的专业公司，在全球范围内已安装400多套大型制备色谱系统半制备液相色谱中试规模制备色谱工业规模制备色谱分析液相色谱制备色谱技术制备色谱的目的是收集更多的被纯化的产品，而不是用于分析化合物的组分含量，产量从几毫克到几公斤制备色谱技术是得到高纯物的最好的分离方法之一分析液相制备液相强调:回收样品过程控制文件证据的提供负荷最大化-体积过载-浓度过载自动收集强

2、调:定性和定量分析数据处理谱图处理分辨率的最大化少量多次进样(自动进样器)制备液相与分析液相的区别制备色谱规模划分生产规模制备色谱柱直径100-600mm中试规模制备色谱柱直径41-150mm小量制备，色谱柱直径10-50mmmg-g级g-100g级100g-kg级制备液相色谱技术应用领域有机合成实验室(PrepLC/HPLC)恒容系统/硅胶(正相色谱)肽类纯化梯度系统（HPGorLPG）–TFA/ACN/C18制药工业梯度系统（HPGorLPG）–C18/IEX天然产物纯化梯度系统（HPGorLPG）–BUFFER/ACN/

3、C18制备色谱中的重要问题产品的纯度处理量(每单位时间所纯化的样品量)回收率生产时间方法开发与放大纯化成本制备色谱分离参数之间的关系速度上样量分离度上样量色谱柱规格填料性质样品性质制备色谱方法开发分析HPLC传统制备色谱颗粒10µ40-150µ长度25cm65cm柱直径4.6mm25mm流速1ml/min20ml/min操作时间20min210min消耗溶剂20ml4200ml需要方法开发传统的开发方法高通量放大－样品相对简单，对产量要求高x41.4mmoverloaded4.6mmoverloaded4.6mmxx线性放大模

4、式范例：poly-L-lysine分析和制备分离结果1.分析液相分离(4x250mm色谱柱)2.制备液相分离(50x250mm色谱柱)方法可预测性产率可预测性时间可预测性成本可预测性4.641.4mmmm线性放大－－样品复杂，对产量要求不高线性放大因子（linearscale-upfactor）即为分析色谱柱和制备色谱柱截面积之比线性放大因子：(41.4mm/2)2/(4.6mm/2)2=81πr2prep/πr2analytical=r2prep/r2analytical可变参数不可变参数流速填料种类样品进样体积样品浓度样品

5、管尺寸梯度方式样品收集体积温度检测器流动池尺寸柱长度管路内径柱背压死体积操作时间溶剂消耗回收率样品处理量收集样品的纯度线形放大过程中的可变与不可变参数为什么要进行线性放大？只需开发一次方法（分析柱上的分离方法）该方法可直接线性放大到任何尺寸直径的制备柱上大大减少方法开发过程的时间和成本减少样品的损失（有时制备时的样品是非常珍贵的）获得最多的被纯化样品线性放大是制备色谱最快速高效的方法开发过程合理简单的放大方法Step1在小直径的分析柱上，进行方法优化，寻找最佳分离条件Step2线性增加系统中所有可放大的参数，但不要改变任何“不

6、可变”参数Step3进行制备分离线性放大的3个步骤从分析到制备放大应用实例仪器设备VARIANSD-1溶剂传输系统（二元梯度）200ML/MIN泵头ProStar320UV/VIS检测器一、经验型放大二、完全线性放大从分析到制备放大应用实例—经验型放大分析柱5um4.6mm*100mm流速：1.0ml/min制备柱12um50mm*200mm流速：80ml/min结论：根据经验进行制备放大,制备结果无法预测,耗费时间、溶剂，增加成本，使制备过程复杂化从分析到制备放大应用实例—线性放大制备柱VarianDynamaxMicros

7、orb100-5C185um250*21.4mm(柱长*内径)R0080220C5甲醇/水=70/30分析柱产品名VarianDynamax填料Microsorb100-5C185um柱尺寸250*4.6mm(柱长*内径)PartNo.R0080200C5流动相:甲醇/水=70/30线性放大结果....分析柱:5um250*4.6mm流速:1ml/min制备柱:5um250*21.4mm流速:21.6ml/min线性放大系数:21.6结论：制备分离结果与分析完全一致，极大简化了制备放大的过程，制备结果更准确线性放大结果....

8、4.6mmx25cm0.65ml/min20µlinjected147mmx25cm675ml/min20mlinjected结论：即使放大1000倍，制备分离效果与分析柱分离效果完全一致，既保证了高效分离制备同时又简化制备过程方法开发，极大地降低成本。线性放大系数:1000