毕业论文--间接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验检测抗核抗体的比较

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1、间接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验检测抗核抗体的比较间接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验检测抗核抗体的比较摘要:目的:应用间接免疫荧光法(IndirectImmunofluorescenceAssay,IFA)和酶联免疫吸附试验(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay,ELISA)对临床上怀疑自身免疫疾病的患者血清中的抗核抗体进行检测并比较。方法:IFA参考厂家给的说明书,用荧光显微镜可以看到不同的核型,若荧光模型比较特异为阳性,血清稀释度不同,则抗体的滴度不同;ELISA参照试剂厂家的说明书,若测试结果S/CO>40AU/ml,

2、则为阳性。结果:在收集的256例疑似自身免疫疾病的患者中,有78例IFA检测结果为阳性,178例阴性,IFA检测阳性率为30.47%;115例ELISA检测结果为阳性,141例阴性,ELISA检测阳性率为44.92%,用c2检验可知,P<0.05,检测结果不同的样本有53例。结论:IFA和ELISA检测ANA的结果具有统计学意义,ELISA比IFA敏感度高。关键词:抗核抗体;间接荧光免疫;酶联免疫吸附试验Comparisonofindirectimmunofluorescenceandenzyme-linkedimmunosorbentassay

3、todetectanti-nuclearantibodiesAbstract:ObjectiveTocompareantinuclearantibodytestsfordetectingserumclinicallysuspectedautoimmunediseaseswithIFAandELISA.MethendIFAwasfollowedtheopratinginstructionsandobservedfluorescentmodelsunderthefluorescencemicroscope.Thepositiveresultisapp

4、earing specificfluorescent ,thenaccordingtothedilutionofserumsamplesdeterminesantinuclearantibodytiter;MethendELISAwasalsofollowedtheopratinginstructions,thepositiveresultisasamplevalueover40AU/ml.Results256samplesserawerecollectedfromthesuspectedpatientswithautoimmunedisease

5、.Amongthesesamples,therewere78IFApositiveand178IFAnegativesamples;thepositiveratewas30.47%.Therewere115ELISApositiveand141ELISAnegativesamples;thepositiveratewas44.92%.53sampleshavedifferences(P<0.05).ConclusionThereissignificantdifferencebetweenIFAandELISAintestingtheANA;the

6、sensitivityofELISAishigherthanIFA.Keywords:AntinuclearAntibody;IndirectImmunofluorescenceAssay;EnzymeLinkedImmunosorbentAssay5间接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验检测抗核抗体的比较抗核抗体(antinuclearantibody,ANA)现代是指抗细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称[1]。ANA主要是IgG,没有种属特异性、没有器官特异性[2],在对自身免疫疾病的进一步诊断中有重要意义,对于一些风湿病的诊断很有价值。ANA在自

7、身免疫性疾病(autoimmunedisease,AID)中表现的阳性程度不同,例如在未治疗的系统性红斑狼疮(SLE)、混合性结缔组织病(MCTD)患者中,阳性率可达95%,而且滴度会比较高,正常老年人可能会存在低滴度的ANA,所以不一定ANA阳性患者就被诊断为有自身免疫性疾病。因此在诊断和鉴别很多自身免疫疾病时,ANA检测被认为是重要的筛查实验,对自身免疫性疾病诊断、鉴别、预后有重要意义[3]。ANA是自身免疫性疾病(AID)重要的血清学标志,IFA是检测ANA的金标准,是筛查自身抗体的主要方法[4]。IFA检测ANA时,底物的选择很重要,每种

8、底物所含的抗原量不相同,例如分别以人喉癌上皮细胞(简称HEP-2细胞)和猴肝作为底物时,片子上会产生不同的效果。常用的靶细胞为小鼠肝细胞

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