《医学分子诊断》ppt课件

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1、传染性疾病的诊断1病原微生物病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体。病原微生物有朊毒体、寄生虫（原虫、蠕虫、医学昆虫）、真菌、细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒等。2传染性疾病诊断的意义传染病是人类主要的疾病,近30年的新发传染病中，60%为病毒引起的保护机体健康、有效治疗控制疾病流行和蔓延提高人口质量，优生优育（监控垂直传播的病毒和检测导致胎儿畸形的病毒）34致病微生物的分子诊断策略完整病原体核酸蛋白在体内留下的痕迹以病毒为例分子诊断5标本的采集根据临床诊断、流行病学分析和病毒的致病性

2、等，确定采集合适的标本血液——病毒的抗体脑脊液——神经系统感染鼻拭子、咽拭子——呼吸道感染粪便——肠道感染疱疹液、尿液、眼泪、精液、阴道分泌液等6致病性机制不明的病毒感染，采集多部位的标本采集标本必须快速、低温，以保证检测的准确性7完整病原体的分离与培养实验室诊断,流行病学研究分离病原体——“诊断的金标准”，在诊断病原体中占重要地位8由于病毒是严格的细胞内寄生物，所以，病毒分离必须涉及“活细胞”——细胞、动物和鸡胚动物接种是最原始的病毒培养方法：根据病毒种类不同，选择敏感动物及接种部位——嗜神经性病毒（狂犬病毒）接种于小鼠脑

3、内；痘病毒接种于家兔角膜9实验动物10鸡胚培养鸡胚对多种病毒敏感：一般采用孵化9～14天的鸡胚，根据病毒种类不同，将病毒标本接种于鸡胚的不同部位——羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊等111213细胞培养(cellculture)法是将离体活组织块或分散的组织细胞加以培养的技术总称，然后加入病毒进行培养、分离鉴定，是病毒分离和培养中最常用、最基本的方法14细胞培养瓶细胞培养板培养基1516细胞病变效应（CPE）17形成合胞体18红细胞吸附(hemadsorption,HAd)流感或副流感病毒等感染细胞后，由于细胞膜上出现了血

4、凝素(HA)，具有吸附脊椎动物(豚鼠、鸡、猴等)红细胞的能力，这一现象称红细胞吸附，常用来测定具有HA的粘病毒与副粘病毒的增殖19红细胞红细胞吸附20优点在选择了正确宿主细胞时，敏感性很高发现多种不同的病毒特异性较高缺点费时费力，时间3-21天敏感性的高低受到宿主细胞的影响有些病毒不能在体外培养，因而会造成假阴性的结果有些病毒因长时间培养而失去了临床应用价值21完整病原毒的电镜检测实验室快速诊断方法重要检测方法之一依靠病毒的形态来诊断22优点快速（30分钟—2小时—2天）发现新病毒适用于一些难以培养或迄今尚不能培养的病毒缺点

5、仪器昂贵，需要专业人员敏感性低，病毒浓度低时假阳性、假阴性率高特异性低，一般仅能确定到“科”不能批量检测23痘病毒科虹病毒科多DNA病毒科24疱疹病毒科多瘤病毒科乳头瘤病毒科25杆状病毒科非洲猪瘟病毒科腺病毒科26细小病毒科嗜肝DNA病毒科逆转录病毒科27正粘病毒科布尼亚病毒科沙粒病毒科28病毒感染的诊断方法采集标本电镜检查病毒颗粒病毒组分的检测病毒的分离和培养抗体的检测抗原核酸29病原体的分子诊断核酸检测:核酸分子杂交、PCR、生物芯片等病毒蛋白(抗原)检测：ELISA、化学发光免疫、免疫层析等抗体：ELISA、化学发光、

6、免疫层析等30临床常用的传染性疾病诊断试剂优生优育系列：TORCH肝炎系列：甲、乙、丙、丁、戊、庚型病毒性肝炎性病系列：梅毒、胞疹病毒、衣原体、支原体、淋病和艾滋呼吸道传染病系列：流感、SARS等31血液传染病筛查系列《献血者健康检查要求》对献血者所捐献血液进行严格的初、复检两次检测。1.ABO血型正反定型、Rh血型：正反定型相符，血清中无意外抗体2.血红蛋白测定：硫酸铜法：男≥1.052，女≥1.050；相当于男≥120g/L，女≥110g/L3.丙氨酸氨基转移酶（ALT）：ALT速率法≤40单位4.乙型肝炎病毒表面抗原（

7、HBsAg）：阴性5.丙型肝炎病毒抗体（HCV抗体）：阴性6.艾滋病病毒抗体（HIV抗体）：阴性7.梅毒试验：阴性32快速灵敏监控机体对病毒的免疫状态大批量筛查抗体检测的优点有33优生优育系列检测试剂盒TORCH系列弓形虫(Toxophasma）风疹病毒（Rubella.Virus）巨细胞病毒（Cytomegalo.Virus）单纯疱疹病毒I/II（Herpes.Virus）34TORCH系列结果分析结果中的IgM抗体：阳性结果提示近期有感染，结合其他情况，终止妊娠。结果中的IgG抗体：阳性结果提示过往感染，具有一定的保护性

8、。35乙型肝炎病毒的检测现状全球约有3.5亿人感染乙型肝炎病毒，中国有1.2亿人感染，其中每年约有1-2%会出现肝硬化或肝癌而死亡36HBV病毒颗粒感染肝细胞及DNA复制过程37诊断乙肝的指标生化指标：ALT免疫学指标：“两对半”乙肝表面抗原（HBsAg）（携带者指标）乙肝表面抗体（Ant