《动物分子流行病学》ppt课件

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1、动物分子流行病学（Animalmolecularepidemiology）丁壮教授博士研究生导师吉林大学畜牧兽医学院动物医学系吉林大学预防兽医学国家重点学科SARS思考1、疫病的诊断依据？2、病原诊断与“正常带毒”的关系？3、血清学诊断的实际价值？4、疫苗性质与抗体的关系？新的研究方向1、病原结构学2、病原结构功能学3、病原生态学4、分子诊断学5、抗体学6、？？？一、概论1动物分子流行病学（Animalmolecularepidemiology）应用分子生物学技术和理论，研究引起动物疫病的病原变异规律、结构与功能（发病机理、免疫机理等），进而分析疫病在畜禽群中发生

2、、发展和分布的规律，制定预防、控制和消灭这些疫病的对策与措施的科学。概念的含义：以动物群体为单位；病原在同一/不同动物群体中分布和变异规律，以便了解疫病自然史；不同血清型/基因型同一病原分布及演化，有助于确定疫病的重要性及制定有针对性的特异免疫措施；研究病原生态学；病原结构与功能；新型疫苗研发。2研究动物分子流行病学的意义1、国内外畜禽疫病疫情的流行和泛滥2、国家荣誉和人民利益的需要。3动物分子流行病学的研究范围1、研究一定地区内各种疾病的种类、分布、流行概况；2、研究某种疫病在一定地区分布和流行情况；3、研究并阐明某种传染病在特定时间、地点、环境条件下的流行规律

3、，以便能够有效地预防和控制发生和流行；4、研究某些疫病的病因与发病机理，探索新的防控措施；5、研究某些病原的性质与功能，探索新的诊检防手段；6、研究影响某些疫病流行的外在因素；7、研究各种传播媒介（如野生动物、啮齿动物、节肢动物等）的分布、功能等；8、研究各种病原生态学。举例说明FMDV基因所编码的一个大的聚蛋白可逐级裂解病毒结构蛋白和非结构蛋白，产生的非结构蛋白有L、2A、2BC、3AB、3ABC、3D等；☆其中L蛋白的免疫原性比其他非结构蛋白弱，感染动物不一定能产生抗体，即使产生抗体，维持的时间也比较短。☆病毒感染动物可产生抗2B抗体，但这种抗体在ELISA反

4、应中重复性不好，不能作为检测抗体。☆2C抗体由于消退的比3ABC快，且免疫牛中可检测到2C抗体，因此也不能作为检测指标。☆3D又称病毒感染相关抗原，没有型特异性，检测其抗体是评价动物是否接触过抗原的重要指标，也是国际贸易必检项目。目前认为仅检测3D抗体不能区分感染动物与免疫动物，因为疫苗中往往含有痕量的非结构抗原，经过多次免疫后，在免疫动物体内也能检测到3D抗体。☆3ABC聚蛋白中，3A免疫原性最强，3C免疫原性较弱。许多资料认为3ABC作为感染的标志可信度较大。检测3ABC抗体是确诊感染的重要指标。应用原核表达系统表达的口蹄疫病毒非结构蛋白（NSP）3ABC多肽

5、作为抗原建立了一种可以区分FMDV感染与接种灭活苗免疫牛的间接酶联免疫吸附试验，并通过大量的临床试验确定了血清抗体阳性与阴性效价的临界值。方法的原理为：动物在感染FMDV后既产生结构蛋白抗体，也产生非结构蛋白抗体，而接种纯化灭活病毒后，几乎只产生结构蛋白抗体。经过大量试验结果证明，该ELISA方法灵敏度比VIAAAGID（病毒感染相关抗原琼脂糖凝胶免疫扩散试验）高。意大利的De等(1997)研制出基于3ABC蛋白的间接捕获ELISA技术，并可区分野毒感染和疫苗毒感染。在这套ELISA方法中，应用单抗来捕获在大肠杆菌中表达的3ABCFMDV非结构聚合肽，并将OD值

6、小于0.２的样品判为阴性。用此ELISA技术监测了大量的经过免疫的和感染的动物，所有的经过攻毒试验的动物其ELISA试验的OD值都大于0.2，超过99％的经过疫苗免疫的动物ELISA结果为阴性（即小于0.2），显示出该方法良好的敏感性。后经特异性试验结果证实，该方法的特异性大于99.5％。针对3ABC抗原的抗体最早可于免疫后8d测出，并且抗体测出时间可长达至少1年。此ELISA方法安全、经济。鉴于其优良特点，可参与FMD根除运动和防控计划。APMV-1是确切报道的能够在多种禽类唯一具有广泛致病性的血清型。20世纪二十年代—鸡、火鸡六十年代—鹦鹉、笼养鸟七十年代—鸽

7、、鹌鹑八十年代—鸵鸟、孔雀、企鹅九十年代—鹅21世纪初—鸭（福建）、猪（上海、江苏、浙江等）—人（IsolationofAvianParamyxovirus1fromaPatientwithaLethalCaseofPneumoniaJournalofvirology,Nov.2007,p.12709~12714鹅副粘病毒病流行态势1、副粘病毒的动物感染谱增宽2、副粘病毒侵犯人类越来越明显NDV（新城疫病毒）研究背景4动物分子流行病学研究的重要意义1、有利于查明一定地区内各种疫病的种类、分布和流行规律；2、有利于查明某种疫病在一定地区的分布和流行情况；3、有利于阐

8、明某种传染