植物组织培养组织培养

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1、植物组织培养植物组织培养：指在自然环境中将从植物体上分离出的器官、组织、细胞在人为的无菌条件下，将其置于含有培养基的容器中，使其能生长发育的一种技术。细胞全能性：任何一个完整的植物细胞，都具有形成一个完整植株的全部遗传信息。脱分化：由一个成熟细胞转变为分生状态的过程。主要仪器酸度计灭菌装置超净工作台摇床等手提式灭菌锅超净工作台酸度计显微镜显微镜培养基及其配制主要内容：培养基的成分培养基的配制1、培养基母液的配制2、培养基的配制培养基的成分大量元素微量元素氨基酸和有机附加物植物激素（植物生长调节剂）维生素类凝固

2、剂大量元素（以MS培养基为例）序号化学式化学名称用量mg/l1KNO3硝酸钾19002NH4NO3硝酸铵16503KH2PO4磷酸二氢钾1704MgSO4.7H2O硫酸镁3705CaCL2.2H2O二氯化钙440微量元素（以MS培养基为例）序号化学名称化学式用量（mg/l)1碘化钾KI0.832硼酸H3BO36.23硫酸锰MnSO4.4H2O22.34硫酸锌ZnSO4.7H2O8.65钼酸钠Na2MoO4.2H2O0.256硫酸铜CuSO4.5H2O0.0257氯化钾CoCL2.6H2O0.025氨基酸和有机附加物（以MS培养

3、基为例）序号化学名称化学式用量(mg/l)1肌醇C6H12O6.2H2O1002甘氨酸NH2.CH2.COOH23盐酸硫胺素C12H17CLN4OS.HCL0.14盐酸吡哆醇C8H11O3N.HCL0.55烟酸NC5H4COOH0.5植物激素（植物生长调节剂）1、生长素类：IAA，IBA，2，4-D，NAA等。2、细胞分裂素类：KT，6-BA，ZT等。3、赤霉素类；GA1-GA4，GA7，GA9-GA16，GA24，GA25等4、脱落酸：ABA5、乙烯6、PH值：5.6-5.8培养基的配制母液（储备液）的配制与保存培养基配制M

4、S培养基配方大量元素：配制20×母液备注：为避免沉淀，钙盐可单独配制成分1×（mg/L）20×（g/L）NH4NO3165033KNO3190038KH2PO41703.4MgSO4.7H2O3707.4CaCl2.2H2O4408.8微量元素：配制100×母液成分1×（mg/L）100×（mg/L）KI0.8383H3BO36.2620MnSO4·4H2O22.32230ZnSO4·7H2O8.6860Na2MoO4·2H2O0.2525CuSO4·5H2O0.0252.5CoCl2·6H2O0.0252.5铁盐：配制50×

5、母液备注：将EDTA和FeSO4分别加热溶解，再混合。成分1×（mg/L）50×（g/L）FeSO4·7H2O27.81.39Na2-EDTA37.31.86有机物：配制1000×母液备注：肌醇用时直接称取，不需配制母液。成分1×（mg/L）1000×（g/L）烟酸0.50.5盐酸吡哆醇（VB1）0.50.5烟酸硫胺素（VB6）0.10.1甘氨酸2.02.0肌醇100植物生长物质：配制1mg/ml母液备注：加少量稀酸/碱，搅拌（涡旋）溶解，加蒸馏水稀释、定容。成分溶剂1×（mg/L）母液(g/100ml)2,4-DNaOH1.

6、00.16-BAHCl0.04－100.1培养基的灭菌高温高压蒸汽灭菌：121℃，1.1Kg/c㎡，15-20分钟，时间过长，培养基成分易变性失效。过滤灭菌：在高温高压下易分解的培养基和激素类。外植体的接种和培养愈伤组织和芽的产生小苗的产生完整植株的获得移栽其他植物组织培养的应用快速无性繁殖培育新品种药用植物有效成分生产