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时间:2019-07-31
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1、磺胺嘧啶钠在家兔体内的药物代谢动力学【实验目的】测定磺胺嘧啶钠(SD-NA)单次快速静脉注射后在家兔体内不同时间的血药浓度,并求算动力学参数。【实验原理】SD-NA+NaNO2重氮盐+麝香草酚偶氮化合物注意:加亚硝酸钠和加麝香草酚的顺序不要颠倒!【实验器材】磺胺嘧啶钠注射液,三氯醋酸,麝香草酚之氢氧化钠溶液,亚硝酸钠溶液,试管架,普通干燥试管,小漏斗,10ml、5ml、1ml注射器,10ml、5ml移液管,滤纸,三棱针,721分光光度计。【实验动物】家兔2~3kgNaOH三氯醋酸(橙红色)【实验方法】1.标记试管:取1
2、0ml试管18支,分为3排,每排6只,分别标记0~5号。2.加三氯醋酸:在第1排的试管各加7.8ml。3.固定动物:家兔称重,装入兔盒,固定其头部。被毛,一侧给药,一侧取血。4.给药前取血:0.2ml,取血前用枸橼酸钠润洗注射器!使三棱针垂直于耳缘静脉刺破血管,血液自然流出,用1ml注射器吸取血液0.2ml;注入加有三氯醋酸的第1排0号试管,充分摇匀,静置。5.给药:SD-NA2ml/kg(0.4g/kg),耳缘静脉,单次快速,计时。6.给药后取血:药后5min、10min、15min、30min、45min,同4法取血
3、。7.过滤:待0~5号试管液体分层后,分别过滤到对应编号的第2排试管。【实验方法】8.显色:取滤液4.5ml放入第3排的试管,依次加亚硝酸钠0.5ml,摇匀后加入麝香草酚之氢氧化钠1ml,摇匀后显橙红色。9.比色:用蒸馏水调零,于525nm处检测0~5号管的光密度。1~5号管的实际OD值为:1~5号OD值减去0号管OD值。10.查标准曲线读出各管的血药浓度。横坐标为1~5号管的实际OD值,纵坐标为各管的血药浓度。11.计算,由t、C用统计学方法算出a、b、r值,代入方程lgC=a+bt,求算药动学参数。lgCt=lgC0
4、+-ket/2.303由lgC对t做直线回归,得方程:lgC=a+bta=lgC0b==-ke/2.303r相关系数K=-2.303bC0=10a(g/L)t1/2=0.693/K(min)Vd=X0/C0(L)CL=Vd·K(L/min)AUC=C0/K(g.min/L)【实验结果】1.绘制表格表1SD-NA药动学参数测定结果给药前5min10min15min30min45minOD(值)血药浓度对数浓度2.绘制曲线:以时间为横坐标,浓度/对数浓度为纵坐标,绘制SD-NA的药时曲线,确定其药物代谢动力学类型。3.写出方
5、程以lgC对t做直线回归,得方程:lgC=a+bt,r=?4.计算药动学参数【讨论】【结论】【注意事项】1.防止污染!2.取血量及各种试剂的量要准确!3.试管中加入血液及试剂要立即摇匀!家兔捉持、称重、固定给药前采血0.2ml(枸橼酸钠润洗注射器)另一侧单次快速ivSD-Na2ml/kg给药后5、10、15、30、45min采血0.2ml取上清过滤至第二排试管比色:(525nm)蒸馏水调零第一排试管加入三氯醋酸7.8ml+血样0.2ml,混匀,静置分层显色:至第三排试管加亚硝酸钠0.5ml取出滤液4.5ml混匀,加入麝香
6、草酚NaOH1ml1-5号减去0号OD值,查标准曲线得血药浓度
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