实验三影响血液凝固的因素红细胞脆性的测定血红蛋白的测定

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1、实验三影响血液凝固的因素红细胞脆性的测定血红蛋白的测定影响血液凝固的因素1实验目的以凝血时间为指标，了解影响凝血的因素，加深对生理止血过程的理解。2实验原理血液凝固是一个酶解激活过程，有多种凝血因子参与。根据凝血过程起动时凝血因子来源不同，可将凝血分为内源性激活途径和外源性激活途径。3实验对象：家兔4方法与步骤4.1家兔的麻醉、保定与手术33%乙醇溶液，6mL/kg，耳缘静脉注射。4.2颈动脉采血4.3试管准备4.4记录凝血时间5实验结果表1血液凝固及其影响因素试管号实验处理凝血时间（秒）1空白2液体石蜡4滴3棉花少许4冰水环境5肝素4滴6草酸钾

2、4滴7脑组织浸液4滴5号管加CaCl24滴6号管加CaCl24滴6注意事项6.1采血过程要尽量快，以减少计时误差，对比实验的采血时间要紧接着进行。6.2每支试管口径大小及采血量要相对一致，不可相差太大。6.3判断凝血的标准要一致，一般以倾斜试管达45°时试管内血液不见流动为准。红细胞脆性的测定1实验目的学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外液渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要性。2实验原理正常红细胞悬浮于等渗的血浆中，著置于高渗溶液内，则红细胞会因失水而皱缩；反之，置于低渗溶液内，则水进入红细胞，使红细胞膨胀。如环境渗透压继续下降，红细胞会

3、因继续膨胀而破裂，释放血红蛋白，称之为溶血。红细胞膜对低渗溶液有一定的抵抗力，这一特征称为红细胞的渗透脆性。3实验对象：动物种类不限4方法与步骤4.1溶液配置表2不同浓度NaCl溶液配制管号123456789101%NaCl（mL）9.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸馏水(mL)1.03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl浓度（%）0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.254.2制备抗凝血：柠檬酸钠作抗凝剂。4.3加抗凝血：每只试管加1滴。4.4观察结果①未溶

4、血试管：液体下层有大量红细胞下沉，上层为无色透明，表明无红细胞破裂。②不完全溶血试管：液体下层有红细胞下沉，上层出现透明淡红色，表明部分红细胞已经破裂，称为不完全溶血。②完全溶血试管：液体完全变成透明红色，管底无红细胞下沉。5实验结果表2家兔Hb含量及RBC脆性测定分组Hb测定（g/L）RBC脆性测定（NaCl%）最小抵抗力最大抵抗力实验组对照组1230.60～0.550.40～0.356注意事项6.1试管要干净；6.2配液要准确；6.3加血量要一致；6.4轻轻混匀，减少溶血机会；6.5静置时间不少于30min。血红蛋白的测定1实验目的掌握比色法

5、测定动物血红蛋白含量的方法。2实验原理血红蛋白的颜色与氧结合量有关，当用一定的氧化剂将其氧化时，可使其转变为稳定、棕色的高铁血红蛋白，而且颜色与血红蛋白的浓度成正比。因此，可与标准色板进行对比，求出血红蛋白的浓度，即每升血液中含血红蛋白的克数（g.L-1）。3实验对象：动物种类不限4方法与步骤：使用沙里氏血红蛋白计测定。比色法是用HCl使血红蛋白酸化形成粽色的高铁血红蛋白，然后和标准比色板进行比色。（1）血红蛋白计由标准比色箱和测定管组成。测定管两侧有刻度，一侧为血红蛋白量的绝对值，以每100mL血液中所含血红蛋白的克数表示；另一侧为相对值，以％

6、（即相当于正常平均值的百分数）来表示。（2）测定方法①血红蛋白吸管清洁：自来水→蒸馏水→无水乙醇。②将0.1N盐酸加入测定管中至刻度“2”处。③用血红蛋白吸管吸取20μL血液，将血液吹入盐酸中，并利用上层盐酸将吸管反复洗涤多次（避免起泡）。④酸化10min后，逐滴加入蒸馏水，边加边混匀并与标准比色板比较，至二者颜色相同为止。⑤读数即为每100mL血液中血红蛋白的克数。【注意事项】（1）血红蛋白吸管和比色管要清洁；（2）吸取血液要准确，避免起泡；（3）滴加蒸馏水要准确；（4）酸化时间不能少于10min；（5）在自然光下比色。3实验结果3.1家兔Hb

7、含量及RBC脆性测定：见表1。表1家兔Hb含量及RBC脆性测定分组Hb测定含量（g/L）RBC脆性测定（NaCl%）最小抵抗最大抵抗实验组对照组1230.60～0.550.40～0.353.2不同因素对血液凝固时间的影响表2血液凝固及其影响因素试管号实验处理凝血时间（秒）1空白2液体石蜡4滴3棉花少许4冰水环境5肝素4滴6草酸钾4滴7脑组织浸液4滴5号管加CaCl24滴6号管加CaCl24滴4分析与探讨4.1本次实验家兔Hb测定结果比对照高（或低、或基本一致），从操作过程方面说明原因：……。4.2本次实验家兔RBC脆性测定结果，最小抵抗比对照组高

8、（或低、或基本一致），最大抵抗……，从操作过程方面说明原因：……。4.3家兔凝血时间测定结果表明，××处理能加快（抑制或不凝）血液凝固，