红细胞渗透脆性的测定.docx

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1、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯医料推荐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯红细胞渗透脆性的测定[目的与原理]掌握定胞渗透脆性的方法,定不同胞渗透脆性并理解胞外液渗透持胞正常形与功能的重要性。正常情况下,物胞内的渗透与血的渗透相等,哺乳物相当于0.9%NaC1溶液的渗透,的等渗溶液0.85%~1.0%NaC1溶液。将⋯[目的与原理]掌握定胞渗透脆性的方法,定不同胞渗透脆性并理解胞外液渗透持胞正常形与功能的重要性。正常情况下,物胞内的渗透与血的渗透相等,哺乳物相当于0.9%NaC1溶液的渗透,的等渗溶液0.85%~1.0%NaC1溶液。将胞置于等渗溶液中,其形和容可保持不

2、。若将胞浮于低渗的NaC1溶液中,水分入胞使之膨甚至破裂溶解,但胞低渗溶液具有一定的抵抗力,其抵抗力大小与胞膜脆性有关。通常用不同度的NaC1溶液来定胞膜的渗透脆性,胞膜渗透脆性大的,低渗NaC1溶液的抵抗力小,NaC1溶液的渗透稍有降低,此胞便生破裂而溶血。反之,脆性小的NaC1溶液的抵抗力大,Nac1溶液的渗透降到很低才使些胞破裂溶血。刚能引起一部分胞溶解的低渗NaCl的度可以代表最小抵抗;使全部胞溶解的NaCl度最大抵抗。通常就以抵抗表示胞的渗透脆性。在成熟的胞,其膜的渗透脆性小,而衰老的胞膜的渗透脆性大。[象]、或草。[试剂与器材]5毫升无菌注射器,消毒棉球,中管,小管,管架,

3、滴管,1%NaCl,蒸水,75%酒精,碘酒,凹瓷,1%肝素或10%草酸溶液,3.8%枸酸。[步]1、取小管10支,号后,按下表制成不同度的NaCl溶液。管号123456789101%NaCl(ml)0.900.650.600.550.50.450.400.350.300.25蒸水(ml)0.10.350.400.450.50.550.60.650.700.75NaCl溶液度0.90.650.600.550.50.450.400.350.300.25(%)2、用湿抗凝的注射器从尾静脉采1毫升血,立即向每一管中各加一滴血,将管在两掌心中迅速搓,使血液与管内NaCl溶液混匀(切勿用力震),室

4、温下放置2小后察果。多余血液注入盛有0.1毫升3.8%枸酸的管内。加以混合,以重复使用。3、察果:开始溶血和完全溶血的两管NaCl溶液度。按下列准判断有无溶血、不完全溶血或完全溶血。(1)上清液无色,管底混色或有沉淀的胞,表示没有溶血。(2)上清液呈淡色,管底混色表示只有部分胞破裂溶解,不完全溶血。开始出部分溶血的NaCl溶液度,即胞的最小抵抗,也是胞的最大脆性。1⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯医料推荐⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯(3)管内液体完全变成透明的红色,管底无细胞沉积,为完全溶血。引起红细胞完全溶解的最低NaCl溶液浓度,即为红细胞的最大抵抗值,即红

5、细胞的最小脆性。[方法评估]该方法筒单实用,但应严格控制血量(血液和NaCl溶液之比约为1:25)和防止血标本在体外溶血,否则易影响试验的准确度。本试验敏感性较差,需结合其他实验室检查结果进行分析。[应用意义]渗透脆性指标对于掌握细胞膜的特性、形态和生理功能具有一定意义,如膜的特性、流动性、结构、组成成分等的改变,均使膜的脆性发生改变。[注意事项]1、配制1.0%NaCl溶液,称量必须准确。2、取血时一定要避免溶血。3、滴加血液时要靠近液面,使血滴轻轻滴入溶液以免血滴冲击力太大,使红细胞破损而造成溶血的假象。.4、加入血滴后,轻轻摇匀溶液,切勿剧烈振荡。5、应在光线明亮处观察结果。如对

6、完全溶血管有疑问,可用离心机离心后,取试管底部液体一滴,在显微镜下观察是否有红细胞存在。2

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