实验二培养基的制备

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1、实验二培养基的制备一、目的要求1.掌握培养基制备的原则；2.掌握培养基的制备方法。二、实验原理1、培养基的概念？培养基是指由人工方法配合而成的营养基质，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存菌种用的混合营养物制品。2、必须具备五个条件:含有细菌生长所需的物质：如：水分、养分（氮源、碳源、矿物质）等适宜的酸碱性：多数为pH7.2-7.6，有的为pH5.6-6.8。不含抑制细菌生长的物质；均质透明：便于观察细菌生长性状和引起培养基的变化，严格灭菌，保证无菌。配好立即高压灭菌，并保证新鲜。3、培养基的分类根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区

2、分：天然培养基合成培养基半合成培养基。根据培养基的物理状态来区分：固体培养基液体培养基半固体培养基根据培养基的用途来区分：增菌培养基选择培养基鉴别培养基中国农业出版社陈天寿主编一些物质在培养基中的应用原理1.细菌生长的基础营养物质：N源：蛋白胨（peptone）、酵母浸出物牛肉浸膏C源无机盐类水一些物质在培养基中的应用原理2.具有抑菌作用的物质抑制G-菌的：葡萄糖、亚硫酸铋和煌绿抑制G+菌的：结晶紫、胆盐抑制肠道非致病菌的：胆盐一些物质在培养基中的应用原理3.具有生化反应作用的硫羟代乙酸钠（硫乙醇酸钠）、半胱氨酸、葡萄糖、肝块、肉渣、还原铁等还

3、原剂生化反应一些物质在培养基中的应用原理4.具有缓冲作用的磷酸盐碳酸盐一些物质在培养基中的应用原理5.具有PH指示作用的中性红指示液变色范围pH6.8～8.0（红→黄）孔雀绿指示液变色范围pH0.0～2.0（黄→绿）；11.0～13.5(绿→无色)石蕊指示液变色范围pH4.5～8.0（红→蓝）甲基红指示液变色范围pH4.2～6.3（红→黄）刚果红指示液变色范围pH3.0～5.0（蓝→红）亮绿指示液变色范围pH0.0～2.6（黄→绿）结晶紫指示液pH值0.15（黄）～0.32（绿），pH值1.0（绿）～1.5（蓝），pH值2.0（蓝）～3.0（紫

4、）。溴甲酚紫指示液变色范围pH5.2～6.8（黄→紫）溴麝香草酚蓝指示液变色范围pH6.0～7.6（黄→蓝）一些物质在培养基中的应用原理6.其它硫酸亚铁色氨酸脲酶培养特性（一）体外培养的要求营养、温度、PH、气体、培养时间（二）培养性状1.液体培养基需氧菌：菌膜兼性厌氧菌：均匀浑浊厌氧菌：沉淀2.固体培养基菌落特点:大小、颜色、边缘、湿润程度3.色素脂溶性：菌体有颜色（如金黄色葡萄球菌）水溶性：菌体和培养基都有颜色（如绿脓杆菌）4、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基pH的调正培养基

5、的过滤培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存同一种培养基的配方在不同文献中常存在某些差别。因此应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。4、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基pH的调正培养基的过滤培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存每次制备培养基均应有记录:包括名称、配方及其来源、pH值、消毒的温度和时间、制备的日期和制备者等，以防发生混乱。4、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基的制备记录培养基成分的称取培养

6、基各成份的混合和溶化培养基pH的调正培养基的过滤培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存必须精确称取，并注意防止错乱。可将配方置于傍侧，每称好一种成分即在配方上做出记号,最后还应进行一次检查。4、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基pH的调正培养基的过滤培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存可先用温水加热并随时搅动、以防焦化。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化，直至煮沸。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，最后必须加以补足。4、培养基制

7、备的基本方法培养基配方的选定培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基pH的调正培养基的过滤培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存经加热煮沸，培养基各成分完全溶解,待冷却接近室温时,应进行pH的调正。4、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基pH的调正培养基的过滤培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存培养基必须均质透明。通常采用过滤以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法。4、培养基制备的基本方法培养基配方的选定培养基的制备记录培养基

8、成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基pH的调正培养基的过滤培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存应按使用的目的和要求，分装于适当容器