分子遗传学-山西农业大学

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1、复性(退火):变性后的两条单链缓慢的冷却,重新形成双链。成核作用:互补两条链中心部分的互补碱基对先连接起来,其余部分想拉拉链一样慢慢形成双链超螺旋:有正超螺旋和负超螺旋两种解链温度(熔点Tm):是A260的升高达到极大值一半时的温度,即是变性温度范围的中点单一顺序:也叫非重复顺序,有一次或几次拷贝,原核生物偶大量单一顺序且都编码。重复顺序:短片段的重复顺序有三种:正向重复(顺向重复),反向重复,回文顺序。基因组:原核生物中指遗传物质的总量核型:真核细胞中全套染色体,具种的特异性C值:在原核细胞或染色体中DN

2、A的量,真核细胞中单倍体DNA的量基因簇:由一组相同或相关的基因排列在一起基因家族:由一个祖先基因经过重复和变异产生的一组同源基因假基因:指在基因家族中因突变而失去功能的基因,不能编码有生物活性的蛋白间隔序列:基因间不能编码的部分(有转录间隔区和不转录间隔区)间插序列:基因内部不编码的序列,即内含子C值矛盾:C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象DNA复制:亲代双链DNA分子在DNA聚合酶的作用下,分别以各单链为模板,聚合与自身碱基可以互补配对的游离的dNTP,合成出两条与亲代DNA分子完全相同的子代DN

3、A分子的过程。DNA的半保留复制:复制过程中以双螺旋DNA的其中一条链为模板合成其互补链,新生的互补链与母链构成子代DNA分子。快停突变:把细菌培养温度提高12~15℃复制迅速停止,快停突变涉及的产物和链的延伸有关。慢停突变:将细菌培养温度提高,DNA合成并不立即停下来,延续一段时间后才会停止,慢停突变表明突变的基因和复制起始有关。DNA拓扑异构酶:是可以切断DNA链又能重新连接DNA的一种酶半不连续复制:任何一种DNA聚合酶合成方向都是从5'向3'方向延伸,而DNA模板链是反向平行的双链,这样在一条链上,

4、DNA合成方向和复制移动方向相同(前导链),而在另一条模板上却是相反的(后滞链),后滞链上的复制为半不连续复制。复制体:由解旋酶、引发酶和DNAPolⅢ全酶组成的复合体。回环模型:DNA合成时,沿着复制叉的移动。后随链模板形成了一个回环,使环中RNA引物和冈崎片段的合成方向与前导链一致,以适应双链在同一复制体上进行复制。起始地带:DNA开始合成的位置,一个初起始点(或双向复制起点—大多数起点是双向的)两侧都有一些二级起点,初起始点通常是0.5-2kb长,而二级起点可以跨越50kb,因此称为起始地带。转录:以

5、DNA为模板合成RNA的过程复制子(复制单位或复制元):DNA中含有一定复制起点和复制终点的复制单位。反义链:将作为转录模板的DNA单链称为模板链或反义链,非模板链称为有义链转录后的加工:指各种前体得RNA分子加工成成熟的RNA分子编辑(editing):是指转录后的RNA在编码区发生碱基的加入,丢失或转换等现象。核酶:是指本质为RNA或以RNA为主含有蛋白质辅基的一类具有催化功能的物质。染色体带型?①G带:Giemsa染色,A、T丰富;②C带:异染区;③Q带:芥子奎吖因染色,在G带产生另外的荧光带,不能长

6、期保留;④N带;⑤R带:与G带相反的带。质粒类型?①抗性质粒(R);②致育因子(F);③Col质粒:含编码大肠杆菌素基因;④降解质粒:这种质粒编码一种特殊蛋白,可使宿主细胞代谢特殊分子如甲苯或水杨酸;⑤侵入性质粒,如根癌农杆菌的Ti质粒DNA变性对片段的要求?(1)互补序列的碰撞和排列;(2)碱基的正确配对和氢键的形成。DNA双螺旋的结构特征?(1)DNA分子是由两条反向平行的多核苷酸链组成,形成右手双螺旋。(2)双螺旋的直径是2nm,螺距为3.4nm,上下相连碱基的垂直距离为0.34nm,交角为36°。(

7、3)两条链反向平行,即两条链的5′和3′的方向相反。(4)糖-磷酸键是在双螺旋的外侧,碱基对与轴线垂直。(5)糖与附着在糖上的碱基近似垂直。(6)碱基配对时必须是一个是嘌呤一个是嘧啶。(7)DNA双螺旋有大沟和小沟的存在。DNA二级结构的稳定因素?(1)碱基对间的氢键;(2)碱基堆积力:a疏水作用;b范德华力;c磷酸基团的负电荷斥力。Z-DNA的结构特点?(1)磷酸骨架呈之字形走向,(2)左旋;(3)分子外形呈波形;(4)大沟消失,小沟小而深;(5)每个螺旋有12bp.导致DNA变性的因素?高温、酸、碱、变

8、性剂(如尿素、甲酰胺、甲酸等)。DNA变性后无力性质发生的变化?(1)流体力学性质发生变化:粘度下降而沉降速度上升;(2)提高了对紫外线的吸收能力,次称为增色效应.影响复性反映因素?DNA片段大小、DNA浓度、DNA的复杂性、温度(最佳温度一般比Tm低25度)、盐的浓度。复性的检测?(1)减色效应,检测光密度,即OD值,单链→双链,OD260值减少30%;(2)羟基磷灰石柱层析。超螺旋的两种存在状态?(1)自由状

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