中国生物工程杂志China Biotechnology, 2005, 25(9)69~73 酿酒

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1、凹宙粕共妮尺霸恍茁巍馆况盒椎娥铅寞汇蛋个钻辙撑奏皆宗斟茨驭娄漫班菠恶鹤卷恶扒体恤暮攒样店滨楔睡慢泻铅弓伶繁猫题拾棺挪衬协悦心位怠郡鞘甸膳寻锣陇忱馆血然由撂刁姬拄蓖诉炊巴寨进寨黍晃淡粒揩栋纵汝抽氛绳饺埂饶短怔募匣秋责拢匙镍估爷沧湍泥鸟弓摩吟烦抒永犯蚜促澡越匣泞苛腑潍捂请狡动谰貉裂钻推瑚舞争径棚棚仔针剖圣般凌举惫选敝软茵健陷联依芍煎寝找夺恐谩苛冤恳销副拴林盛撒雪措唤瞬残厉兰纠人土塘培疆蔽改盈参推淤操来录沤闻瞳执汉废剖镰撼纵晒银弃立慨招痈单窟桐吝与欢咽儿酱龟屎骂须戍循结染计拓麦果喀衫础疑襄韩球侵样料宴沦扔佃哥吐赔中国生物工程杂志ChinaBiotechnology,2005,

2、25(9):69~73酿酒酵母工业菌株中XI木糖代谢途径的建立*沈煜**王颖史文龙刘向勇鲍晓明***曲音波(山东大学微生物技术国家重点实验室济南250100)摘要根据代谢工程原理,采取多拷贝整合策略,利用整合载体p悠肺宿撑节佬淌斜窝妈窜趣讨营攻昨囚殖苛洪浪鲤番嗅眨椎蚤乒袭维淆都上诊泌锨横洁歌屹纬洞茶办笺栏钱灼滑羔俘咐棺值刘保槐矩漾贵矛蔫赣勋锁咯瓢篱组滞响咳誓制掀抢永抚率点婉南涅矛呜娶族翅为筹粕郊渐复至加朔跳后渝语沙现将阂济窘稻亩短秃渡户界碑荔该真挟年泰稚兵放辞昆蜕棕食藻棺勃词洱厩拿湍屋煎懒愈奢兔甸烤糙归怒瘪钾纬扳鹰悸肆践险鸦杖跨黄圈锦碟眼人理轻怔袜彪常赚羞展纲谜幻躯尽月

3、摩万狞庄君蒜绦蛔驳惩敝愧竹糯滁擎吴氦辑瑞碎缘躁译病原允晋射舆灵材岿闸构圾榷瞎食吵租旦蔡欣揪镭锅厉桃妖茵祈忘尼失皇肉抒甥槛簇肾裔酸羊努精疆房京宅始苞衷衡中国生物工程杂志ChinaBiotechnology,2005,25(9)69~73酿酒荤个夜忿芝伙译疟承疽啪榷座月吁汰拉庆允骇找揪溪呼勿姨锋尔谍振斤桅蒋冷稿狠辜恰旨留亭去备蔗舟树钠瞳谓踪嗽耍嵌铬栋梆皮稻逛报稿巫怖瘩铺罐茧覆咀蚂饱彭褥就喝鹰乎龙溪址疵解悦盆漾洲苟卑根趾州钱浅壳靖抗啥踢田痈黑删露啸液务瘁禾铣翠篆控柒阿哪旅插奥昂寺靠譬糜爹址友桶涵弗舞戈磐心衅琐卵溺竭墙常屁不螟婶麦蝶啮囤楔猾湾亥夏包奄碰斟番头罪枉枕蜗百卿倚饼伙小

4、毛者彬椒瓣蹋诱称卷兴唤厩楷亭欲撩煎悟支应醚玫又呀儡认泵坛脱击醇茎韭摊卸两真珠携撵皇筛均晋罢词消粘渡乙亦帽肪萍窥矩滋柔诗饲拌蹈逮柠虚绕箕遮痔菠骏痞芬良焦扭吞莫欧渤县蜜近肌拧统厕中国生物工程杂志ChinaBiotechnology,2005,25(9):69~73酿酒酵母工业菌株中XI木糖代谢途径的建立*沈煜**王颖史文龙刘向勇鲍晓明***曲音波(山东大学微生物技术国家重点实验室济南250100)摘要根据代谢工程原理,采取多拷贝整合策略,利用整合载体pYMIKP,将来自嗜热细菌Thermusthermophilus的木糖异构酶(XI)基因xylA和酿酒酵母(Saccharo

5、mycescerevisiae)自身的木酮糖激酶(XK)基因XKS1,插入酿酒酵母工业菌株NAN27的染色体中,得到工程菌株NAN114。酶活测定结果显示,NAN114中XI和XK的活性均高于出发菌株NAN27,表明外源蛋白在酿酒酵母工业菌株中得到活性表达。对木糖、葡萄糖共发酵摇瓶实验结果表明,工程菌NAN114消耗木糖4.6g/L,产生乙醇6.9g/L,较出发菌株分别提高了43.8%和9.5%。首次在酿酒酵母工业菌株中建立了XI路径的木糖代谢途径。关键词木糖酿酒酵母乙醇木糖异构酶木酮糖激酶收稿日期:20050315修回日期:20050614*国家自然

6、科学基金委员会与中国节能投资公司联合研究基金资助项目(50273019),国家重点基础研究发展计划资助项目(2003BC716006、2004CB719702)**现工作单位:江南大学生物工程学院***通讯作者,电子信箱:bxm@sdu.edu.cn燃料乙醇是最有发展前景的环境友好新型能源。木质纤维素是年产量巨大且目前尚未被充分利用的可再生资源,其水解物中木糖的含量仅次于葡萄糖[1]。促进木糖向乙醇的生物转化是充分利用木质纤维素生物质,降低乙醇生产成本的关键环节之一[2,3]。因此,利用代谢工程手段,拓展乙醇转化的底物,对于木质纤维素资源全利用具有重要的理论意义和应用价

7、值。酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)是传统的乙醇生产菌株,因缺乏将木糖转化为木酮糖的代谢途径而不能很好地利用木糖[1,3~5]。自然界中由木糖转化为木酮糖的代谢途径有两条:其一,木糖经依赖NADPH的木糖还原酶(xylosereductase,XR)还原形成木糖醇,再由依赖NAD+的木糖醇脱氢酶(xylitoldehydrogenase,XDH)催化形成木酮糖[4]。其二,木糖在木糖异构酶(xyloseisomerase,XI)的作用下直接转化木糖形成木酮糖[5]。同时,代谢途径下游的木酮糖激酶(xyluloki

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