《动物寄生虫病学》许金俊-动物常见寄生虫病病原的传代与冻存

《《动物寄生虫病学》许金俊-动物常见寄生虫病病原的传代与冻存》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、动物常见寄生虫病病原的传代与冻存寄生虫的动物保种，是将其感染期接种于实验动物，使虫体在动物体内存活，以利于寄生虫L寄生虫病的研究、寄生虫病诊断以及制备教学标木等。自患冇原虫病的家畜，分离虫体或虫体一定的发育阶段，并加以保存，是和冇必要的。因为保存这些原虫并加以繁殖，可以对这些疾病进行血清学诊断的抗原，也可以作为人工免疫的免疫原，也可以用以人工复制某些疾病已进行各方面的观察和研究。动物常见寄生虫的传代和保存如下：一、日本血吸虫接种的实验动物一般采用18〜22g体重的健康小白鼠或2〜4kg家兔。接种前首先将钉螺内的尾蝴逸

2、出，步骤如下：将阳性钉螺2〜3只放入试管（lX7cm）中，加入去氯水或冷开水至管口，管口盖以铜丝网，以防钉螺爬出，置25°C孵育4〜12小时，尾坳可陆续逸出浮于水血。尾坳逸出后进行动物感染，步骤如下：将小白鼠或家兔仰卧固定在木板上，剪去腹毛，范围约5X5cm（约1〜2张盖玻片大小），用清水洗净腹部皮肤。沾取液團的尾蝴置于盖玻片上，在解剖镜下计算尾蝴数量。通常感染小白鼠每只50条尾坳，家兔500〜800条即可。将含已计数尾呦的盖玻片，翻转覆盖在动物腹部的去毛处，使其与皮肤接触，同时在盖片与皮肤之间滴加少许清水，以保持湿

3、润。冬季应保持温度在25°C左右，15〜20分钟后取下盖片。感染后约40〜45天，即能在动物粪便中查到虫卵。操作中应防止人感染，用过器材应消毒。二、华支睾吸虫常用实验动物有犬、猫、豚鼠、大白鼠、兔等。将含有华支睾吸虫囊坳的鱼肉，用人工消化液消化后收集纯净的囊坳。将囊坳拌入饲料喂食或直接从口内插入橡皮管注入胃内。感染囊坳的数量，因动物大小而异，以200〜400个为宜。感染后一个月，即可自粪便内检获虫卵。人工消化液配方为：盐酸0.4ml、胃蛋白酶25g、蒸憾水100mlo三、卫氏并殖吸虫常用实验动物有犬、猫。将感染该种吸

4、虫囊勉的溪蟹或婀姑，放入清水中洗净后，用硏钵或绞肉机捣碎，经筛过滤去除粗壳渣，以沉淀法反复清洗至水清。吸出沉渣放在双筒解剖镜下检查，用滴管吸取囊蝴并计数，将定量的囊蝴拌入饲料喂动物。也可将囊呦放入含有2%胆酸盐洛液中，置4O°C1小吋脱囊。用无菌生理盐水洗涤后，给猫或犬进行腹腔注射。幼虫数量以100-300个为宜。约2个月后可在粪便中检出虫卵。四、旋毛虫将感染旋毛虫的小白鼠（或大白鼠）杀死，剥皮，取艮肌肉。也可取含有幼虫的猪肉，剪成米粒大小,取1小块肉置在载玻片上压片检查，以含有100〜200个幼虫囊包屋的肌肉，经口

5、喂健康小白鼠，喂前应饥饿小鼠24小时。或将含有幼虫包囊的肌肉剪碎，置于含有消化液的三角瓶内，一般每lg肌肉加入60ml的消化液，置37〜40°C温箱中，经10〜18小时（此间经常摇动烧瓶或搅拌），去掉上层液，然后以水洗沉淀法或离心沉淀法收集幼虫。以生理盐水洗涤2〜3次，用1ml的注射器和8号针头吸取100〜200条幼虫,经腹腔注射或喂饲健康小白鼠（或大白鼠）。感染第5周后，可在鼠肌屮（以膈肌、腿部肌多见）可找到幼虫囊包。幼虫在动物体内可生存3个月或半年。五、伊氏锥虫虽然冇些锥虫町以在人工培养基上培养，但我国流行的伊氏

6、锥虫，在人工培养基上很难适应和繁殖，可以用以卞两方法保存。实验动物保存：最常用的伊氏锥虫保存方法是通过动物接种，在实验动物中传代。多种实验动物都可以，其中以小白鼠最适应。可以将锥虫接种于小白鼠腹腔，2〜3天后，即可在外围血液中发现虫体，此时在尾尖采血进行检查，当发现虫体时，即可由尾尖采血进行传代。鸡胚培养：取小日龄鸡胚，将卵直立于置蛋器上，在气室上钻一个小岡孔，挑出卵壳，以眼科银子刷去卵壳膜，露出绒毛尿囊膜，将含锥虫的血液2〜3滴滴于绒毛尿囊膜上，而后以封蜡封住小口。接种完毕,仍将蛋白保持直立状态，继续在孵化箱中孵化

7、，第三天即可在鸡胚血液中出现虫体，第5〜6天应采取鸡胚血液再次传代，否则鸡胚死亡，虫体消失。六、马媾疫锥虫可以通过接种实验动物和鸡胚进行传代保存。实验动物保存：马媾疫锥虫对实验动物敏感性较低，如果将其接种丁•狗或老鼠的皮下，不易感染成功,即使感染成功也不易适应。可以将含有病原的材料，接种于雄性家兔的睾丸实质内，1〜2星期后可见家兔阴囊、睾丸发生水肿，在水肿液中可见人量虫体，再将分离到的虫体接种到另一家兔睾丸中以传代，数代后，虫株逐步适应兔体，可形成全身感染，虫体出现于血液循环中。鸡胚传代：方法同伊氏锥虫。冷冻保存保存

8、在冰浴中，可保持一段时间的活力。七、胎儿毛滴虫胎儿毛滴虫保存一般采取培养的方法，可将胎儿毛滴虫的病料接种以下培养基。葡萄糖一肉汤一血清培养基：在灭菌的试管中，以无菌操作加入马血清4〜5ml,制成斜而，在85°C中加热30分钟，使血清凝固成斜面。在1000毫升热蒸憎水中溶剂加入以下成分：氯化钠5克，磷酸钠2.5克，蛋白腺20克，衙萄糖20克。溶解