中药多糖的提取、分离纯化及其含量测定方法研究

《中药多糖的提取、分离纯化及其含量测定方法研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、中药多糖的提取、分离纯化及其含量测定方法研究摘要：中药多糖的提取、分离纯化及其测定方法的有效研究，一方面能够凭借完善的制备流程，增强传统中药在药效方面的制药水准，以此完善临床医疗体系的构建；另一方面则能够凭借多糖提取的措施，巩固中药在降血脂、降血糖、抗衰老等方面的效果。本文基于中药多糖的提取方法分类深入研究,在明确分离纯化与含量测定方法的同时，期望能为后续中药医疗体系的构建提供良好参照。关键词：中药多糖；提取；分离纯化；含量测定；方法分析1中药多糖的提取分析1.1溶剂提取法溶剂提取法是从植物组织中提取多糖的常见方

2、法，其中利用了多糖不容于乙醇的性质，将多糖从植物组织中沉淀出来，以达到初步纯化的目的。根据溶剂选择的不同，可分为以下几种方法：(1)水提纯沉法水提纯沉法是根据多糖大分子化合物的特性，选择水与醇等极性强的溶剂。期间可用热水与冷水两种浸提方法，而后再将提取液弄错，待加入乙醇后便能将多糖从提取液中沉淀出来。其中，多糖提取率与水用量、提取温度、固液比、提取时间与提取次数等具备关联性。(1)酸提法此种方法是在水提纯沉法的基础上，为提升多糖提取率而提供的方法。期间，酸提法应当严格控制酸度，以便在酸性较强的环境中避免多糖中糖昔

3、键断裂，所以除弱酸外，一般强酸不适用于酸提法。另外，此种方法的提取时间宜短，且温度最好保持在50度以下。(2)碱提法部分多糖在碱液中具备更优异的提取率，为避免在酸性溶液中造成多糖损失，通常碱提法会防止多糖降解，并加入氮气或硼氢化钠等药品，以此控制碱性浓度，避免碱性较强发生多糖水解状况。1.2酶解法提取(1)单一酶解法单一酶解法是指使用单种酶对多糖进行提取，以确保提取率有效提升，同时排除多余元素干扰的状况。其中，经常使用的试剂有蛋白酶与纤维素酶等。(2)复合酶解法复合酶解法是通过一定比例的纤维素酶、蛋白酶与果胶酶混

4、合提供的溶剂，在此种溶剂使用期间，能够使植物组织细胞的细胞壁劈裂，释放出细胞壁内活性多糖，而后再与复合酶溶液反应，确保多糖被有效提取。此种酶解法与溶剂含量、酶解温度、酶解时间、PH值等数据有直接影响。1.3物理强化法(1)微波提取法微波提取法是根据不同物质吸收微波能力差异性，促使植物萃取体系中某些组分被加入，以此从物质体系中被分离，融入萃取剂环境中，以此实现多糖提取的目的。比较溶剂与酶解法而言，微波提取法不宜造成多糖损失，且环境影响干扰较低。(2)超声提取法超声波是通过机械效能增加介质运动，促使生物细胞组织破碎，

5、从而将多糖成分融入溶剂内，再利用空化效应将多糖析溶出，以此确保多糖提取有效，且生物活性能够保持不变。此种方法在提取时间方面具备效率性优势，且多糖提取率较高。2中药多糖的分离纯化分析2.1除蛋白分析中药多糖中除蛋白的分离纯化方法中包括三氟三氯乙烷法、酶解法、三氯乙酸法与具备氯仿有机溶剂变性特点的Sevage法。其中，Sevage法除蛋白效果良，且实验方法简单便捷，但无法有效去除多糖中的脂蛋白。期间，有实验以三氯乙酸法与Sevage法进行比照分析，可知三氯乙酸法在脱蛋白质方面的效果优于Sevage法，且多糖损失率较低

6、。2.2脱色分析脱色反应是指在重要多糖提取过程中，由于氧化反应会导致有色素生成，从而依据有色素的含量会影响多糖色谱分析与性质测定的准确性。故而，在分离纯化过程中，脱色工艺流程是非常重要的处理步骤。2.3多糖分解多糖分解在现阶段实验环境中，有分级沉淀法、金属盐沉淀法、色谱分离法、膜分离法、电渗析法、超滤法等多种分解方法。目前在中药多糖分离纯化过程中，多采用凝胶柱层或离子交换色谱法两种形式。3中药多糖的含量测定方法3.1比色法比色法包括咔哩一硫酸法、恵酮-硫酸法和苯酚一硫酸法测定多糖含量。目前比色法已广泛应用于多糖含

7、量测定，特别是苯酚-硫酸法和蔥酮-硫酸法应用最广。其原理是根据多糖在硫酸的作用下水解成单糖分子，并迅速脱水生成糖醛衍生物，再将其与苯酚或恵酮缩合成有色化合物，在适当波长下和一定浓度范围内，吸收值与糖浓度呈线性关系，从而可比色测定其含量。3.2滴定法滴定法是多糖经乙醇沉淀分离后，加酸、加热水解成单糖,以次甲基兰等做指示剂，滴定经标定过的碱性酒石酸铜溶液，根据样液消耗的体积，计算其含量。本方法需在沸腾状态下滴定，温度和滴定速度对结果影响较大，且本法是一种还原滴定法，不能排除还原糖的干扰。后来陆续有人报道采用间接碘量法

8、测定多糖的含量。间接碘量法可消除样品中还原性杂质对多糖含量测定的干扰，所测结果更接近实际多糖含量。如某实验中采用高猛酸钾滴定法测定多糖含量，还原剂为斐林试剂，滴定剂为0.02mol/L高猛酸钾，并进行方法专属性考察。结果为阴性对照试验相对标准差为4.6%,精密度试验相对标准差为3.9%,平均回收率为102.8%。得出结论本方法简单、准确，精密高、重现性好，可用于肝速康胶囊